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Research Article
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Erratum Notice
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Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
Viene presentato un sistema di esposizione a flusso continuo robusto e flessibile progettato per mantenere i sedimenti in sospensione. Il sistema viene utilizzato per studiare gli effetti dei sedimenti sospesi su varie specie acquatiche e sulle fasi di vita in laboratorio.
Questo articolo descrive il Sistema di Esposizione delle Larve e delle Uova di Pesce (FLEES). Il sistema di esposizione a flusso continuo viene utilizzato per studiare gli effetti dei sedimenti sospesi su varie specie acquatiche e sulle fasi di vita in laboratorio utilizzando pompe e automatizzando l'erogazione di sedimenti e acqua per simulare la sospensione dei sedimenti. I dati FLEES vengono utilizzati per sviluppare curve esposizione-risposta tra gli effetti sugli organismi acquatici e le concentrazioni di sedimenti sospesi alla durata dell'esposizione desiderata. I dati sugli effetti vengono utilizzati per valutare le pratiche di gestione utilizzate per ridurre le interazioni tra gli organismi acquatici e le cause antropiche dei sedimenti sospesi. Il FLEES è in grado di generare concentrazioni di solidi sospesi totali (TSS) da un minimo di 30 a un massimo di 800 mg/L, rendendo questo sistema la scelta ideale per valutare gli effetti del TSS derivanti da molte attività, tra cui la simulazione di bassi livelli ambientali di TSS per valutare le fonti di sedimenti sospesi dalle operazioni di dragaggio, dal traffico navale, fresche e tempeste.
operazioni di dragaggio utilizzano metodi meccanici per rimuovere sedimenti del fondo di porti e canali di navigazione. Durante la rimozione, una parte del sedimento disturbato è sospeso nella colonna d'acqua, potenzialmente rendendo questa fonte di stress fisico per specie acquatiche. Oltre alla sospensione, il sedimento può essere trasportato dalla chiatta da condizioni ambientali prima sedimentazione della colonna d'acqua. La combinazione di questi due meccanismi significa che un organismo acquatico verificano vicino da un draga operativo può essere esposto a sedimenti in sospensione e soffrire effetti avversi. Per far fronte a tali preoccupazioni, finestre ambientali (restrizioni di dragaggio stagionale) sono abitualmente utilizzati come una pratica di gestione per ridurre o eliminare il rischio di effetti potenzialmente nocivi di sedimenti in sospensione dalle attività di dragaggio sulle risorse acquatiche 1,2.
finestre ambientali sono più comunemente stabiliti per proteggere in via di estinzione, minacciate oSpecie valore commerciale come la glaucomi (Sander vitreus) e ostrica orientale (Crassostrea virginica) 3. La giustificazione di supporto per imporre le finestre ambientali spesso si concentra su come le attività di dragaggio possono potenzialmente fisicamente disturbare (ad esempio, i sedimenti in sospensione) la capacità di un animale di completare una parte specifica della sua storia di vita. Le fasi della vita comunemente citati sono uova e larve per mantenere le rotte migratorie aperto per le specie anadrome 3. Tuttavia, vi sono informazioni limitate per quanto riguarda specie-specifici effetti biologici rilevanti per 4,5 sedimenti in sospensione a disposizione per informare utilizzando finestre ambientali come strumento di gestione del rischio.
Per queste ragioni, la fugge è stato progettato, costruito e utilizzato per simulare la sospensione dei sedimenti, e per determinare i suoi effetti sulla prime fasi di vita degli organismi acquatici. Fugge studi utilizzano particelle di sedimenti a grana fine (cioè, prevalentemente limi,argille e sabbie fini), che hanno più probabilità di rimanere in sospensione e migrano più lontano dalla sorgente. Il fugge è capace di uova di test e larve di pesce, ma può anche essere montato ad accogliere altri organismi acquatici, rendendolo una capacità unica. I dati della risposta biologica risultanti possono essere utilizzati per valutare gli effetti dei sedimenti in sospensione. Le seguenti procedure forniscono una panoramica di come la tecnologia può essere costruito e gestito per produrre concentrazioni di sedimenti in sospensione ripetibili e dati gli effetti utilizzando varie specie acquatiche.
Tutto fugge esperimenti con vertebrati sono stati eseguiti sotto la Ingegnere appropriata Centro di Ricerca e Sviluppo (ERDC) Laboratorio Ambientale Istituzionale cura degli animali e utilizzare i protocolli.
1. fugge moduli, bagno d'acqua, e Aquaria

Figura 2. serbatoio in polietilene. Una cupola del serbatoio 19 L in polietilene in basso mostra la scarico di troppo pieno (in alto, con inserto schermo; 1.3.1, 5.6.1), ingresso acqua liquami (gomito destro, 1.3.2), uscita della pompa (in basso al centro, 1.3.3), pompa (in basso fuori centro; 1.3.4) di ingresso, la sonda OBS e morsetto (4.1), e schermo inferiore (anello nero su fondo; 5.6.1). Clicca qui per vedere una versione più grande di tla sua figura.

Figura 3. bagnomaria. Descrizione di un bagno d'acqua con cinque acquari disposti su due file. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
2. Sistema Slurry

Figura 4. serbatoio liquami. Cone-fondo della vasca liquami con coperchio e supporto poli. temperatura dell'acqua Slurry è controllata dal refrigeratore acqua situato sul pavimento sinistra del basamento. Il serbatoio è collegato ad un Aeropulsometro doppia membrana (primo piano a sinistra) per fornire slurry per ogni acquario (2.2). Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
3. Impianto dell'acqua
4. Sensori, acquisizione dati, controllo dello strumento e di automazione
5. Preparazione sperimentale

Figura 5. fugge sub-camera. Descrizione di un sub-camera di esposizione sospeso in un acquario senza sedimenti aggiunto (a sinistra). Le larve della dimensione appropriata può essere contenuto all'interno del sub-camera di ridurre la possibilità di fuga e lesioni (a destra). Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
6. Procedure sperimentali
Una serie di prove operative viene eseguita prima di iniziare un esperimento per verificare che fugge è fornire le concentrazioni appropriate di sedimenti per ogni acquario (sezioni 5.5 e 6.2). La Figura 6 illustra come concentrazioni NTU sono mantenuti in acquari sperimentali per ottenere concentrazioni di sedimenti in sospensione di destinazione. In questo esempio, fugge valutato se sedimenti in sospensione può essere mantenuta per un periodo di tre giorni con la proposta sedimenti test, una durata dell'esposizione tipico di tali esperimenti simulano esposizioni tipiche del settore. Ciascuno degli acquari è stato fissato per mantenere costantemente una torbidità durante il periodo di tre giorni. Sedimenti di prova sono stati introdotti in un periodo di 4 ore il 30 maggio 2016. Il 0 mg / L concentrazione TSS ha rappresentato un acquario di controllo senza sedimenti aggiunto. Alle concentrazioni 100, 250, e 500 mg / L di destinazione, acquari costantemente mantenuto torbidità di 90, 240, e 430 NTU rispettivamente, nel periodo sperimentale di tre giorni (Figura 6). impulsi sedimenti riflettenti di aggiunte programmato e temporizzato di sedimenti in sospensione sono visibili a ciascuna concentrazione nel grafico. La flessibilità del fugge consente agli investigatori di entrare nel giro di circa 20-40 NTU del livello target. Questi dati dimostrano la capacità della tecnologia fugge per mantenere la concentrazione di sedimenti in sospensione desiderata nel tempo.

Figura 6. Rappresentante fugge risultati a quattro concentrazioni di sedimenti in sospensione. dati dell'unità torbidità nefelometrica (NTU) registrati da un software fugge a 5 min intervalli su un periodo di 3 giorni durante un esperimento a conseguire sospesi concentrazioni 0, 100, 250 e 500 mg / L solidi totali.arge.jpg "target =" _ blank "> Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Analogamente, la figura 7 mostra i risultati di come concentrazione TSS può essere mantenuta a notevolmente concentrazioni inferiori rappresentano condizioni ambientali.

Figura 7. Rappresentante fugge risultati vicino a condizioni ambientali. dati dell'unità torbidità nefelometrica (NTU) registrati da un software fugge a 5 min intervalli durante un periodo di 7 giorni durante un esperimento a conseguire 25 NTU, equivalente di 20 mg / L TSS per il sedimento prova. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
Il fugge è CalibraTed utilizzando il test sedimento per quantificare il rapporto tra TSS e torbidità per garantire bersaglio concentrazioni TSS vengono raggiunti (sezioni 5.4 e 5.5.2). La Figura 8 illustra la relazione tra NTU e TSS un sedimento esempio prova valutata nel fugge. In questo esempio, il sedimento prova esposta costantemente superiore NTU valori relativi a ciascuna concentrazione corrispondente TSS valutata. Questi dati possono poi essere utilizzati per calibrare i fugge e risultati del report in TSS per la successiva valutazione appropriata degli effetti.

Figura 8. Il rapporto NTU-TSS un sedimento esempio test. Le concentrazioni di trattamento TSS mirate erano 0 (controllo), 100, 250 e 500 mg / L. Le barre di errore rappresentano SEM. Cliccate qui per vedere una grander Versione di questa figura.
Le opinioni, le interpretazioni, le conclusioni e le raccomandazioni sono quelle degli autori e non sono necessariamente approvate dall'esercito degli Stati Uniti. Le citazioni di organizzazioni commerciali o nomi commerciali in questo rapporto non costituiscono un'approvazione ufficiale del Dipartimento dell'Esercito dei prodotti o dei servizi di queste organizzazioni. Gli autori Burton C. Suedel e Justin L. Wilkens, entrambi dell'US Army Engineer Research and Development Center, dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.
Viene presentato un sistema di esposizione a flusso continuo robusto e flessibile progettato per mantenere i sedimenti in sospensione. Il sistema viene utilizzato per studiare gli effetti dei sedimenti sospesi su varie specie acquatiche e sulle fasi di vita in laboratorio.
Questa ricerca è stata finanziata dal Direttore del Corpo degli Ingegneri dell'Esercito degli Stati Uniti per le Operazioni di Dragaggio e la Ricerca Ambientale, Todd Bridges. Il Capo degli Ingegneri concesse il permesso di pubblicare questo materiale.
| Elenco delle parti per un modulo FLEES, bagno d'acqua e acquario | |||
| post, legno - utilizzato per costruire il modulo (tagliato a 78 pollici) | Fornitore locale | N/A | Quantità: 4 Dimensioni: 4 in x 4 in x 8 ft |
| compensato, grado marino - fissato a pali di legno a circa 18 pollici da terra - per contenere bagni d'acqua (60 in x 42 in) | Fornitore locale | N/A | Quantità: 1 Dimensioni: 3/4 in x 4 piedi x 8 piedi |
| compensato - fissato sulla parte superiore dei pali di legno - per contenere tubi, solenoidi ed elettricità (60 in x 42 in) | Fornitore locale | N/A | Quantità: 1 Dimensioni: 1/4 in x 4 ft x 8 ft |
| perno, legno - utilizzato per rinforzare compensato e pali di legno (tagliati per adattarsi) | Fornitore locale | N/A | Quantità: 4 Dimensioni: 2 in x 4 in x 96 in |
| serbatoio, fibra di vetro - bagno d'acqua con due scarichi: 1) per alimentare il refrigeratore; e 2) per drenare l'acqua | Hydro Composites, LLC, Stockdale, TX, USA | FBT-226 | Quantità: 1 Dimensioni: refrigeratore da 150 gal |
| , acqua con pompa autonoma - per bagnomaria; il refrigeratore si trova sotto il modulo | Remcor Products Co., Glendale Heights, IL, USA | CFF-500 | Quantità: 1 Dimensioni: serbatoio da 1/2 hp |
| , fondo a cupola - FLEES aquaria - sedersi all'interno del bagno d'acqua | Stati Uniti Plastic Corp, Lima, OH, USA | 5197 | Quantità: 5 Dimensioni: serbatoio da 19 L |
| , supporto - supporto in acrilico, 12 in x 12 in x 6 in - per contenere acquari | costruiti su misura dai negozi ERDC | N/A | Quantità: 5 Dimensioni: pompa personalizzata |
| , azionamento magnetico - per sospendere i sedimenti in ogni acquario | March Manufacturing Inc., Glenview, IL, USA | MDX-3-1/2 115 v | Quantità: 5 Dimensioni: 28 litri al minuto |
| luce, LED - installato su bagno d'acqua | C2 Development, Inc., Ames, IA, USA | Hydra 26 | Quantità: 2 Dimensioni: in base all'area da illuminare |
| tubo, PVC schedule 40 - installato nello scarico del bagno d'acqua per controllare il livello dell'acqua | Fornitore locale | N/A | Quantità: - Dimensioni: 1 in |
| raccordi, paratia - per collegamenti di acquari/bagni d'acqua a pompe, scarichi, linee dell'acqua e dei liquami | Lifegard Aquatics, Cerritos, CA, USA | R270900 | Quantità: 30 Dimensioni: 1/2 in raccordi FPT x FPT |
| , Inserti filettati per tubi maschio a sgancio rapido - Inserto nella paratia del serbatoio | Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA | EW-31303-36 | Quantità: 10 Dimensioni: 1/2 in Raccordi MPT |
| , sgancio rapido, portagomma con valvola - collegamento tra acquario e inserto nella paratia del serbatoio | Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA | EW-31303-11 | Quantità: 10 Dimensioni: 1/2 in |
| raccordi, gomito filettato HDPE nero - per acquari Collegamenti di tubi in vinile alla linea liquame/acqua e alla pompa | United States Plastic Corp, Lima, OH, USA | 62043 | Quantità: 20 Dimensioni: 1/2 NPT x 1/2 pollici Raccordi ID tubo flessibile |
| , adattatore filettato HDPE nero - per collegamenti tra pompa e paratia del serbatoio | United States Plastic Corp, Lima, OH, USA | 62017 | Quantità: 10 Dimensioni: 1/2 NPT x 1/2 in tubo flessibile ID |
| tubo, vinile - collegare la linea liquame/acqua agli acquari e collegare le pompe agli acquari | Fornitore locale | N/A | Quantità: 25 ft Dimensioni: 1/2 in tubo ID |
| , vinile - collegare agli scarichi degli acquari inserti e allo scarico del bagno d'acqua | Fornitore locale | N/A | Quantità: 25 ft Dimensioni: 5/8 in |
| ID morsetto, tubo flessibile, acciaio inossidabile - per fissare il tubo in vinile alle spine del tubo Fornitore | locale | N/A | Quantità: 40 Dimensioni: #8 |
| Elenco delle parti per il sistema di liquami | |||
| chiller, acqua con pompa autonoma - si trova a lato del serbatoio dei liquami | Remcor Products Co., Glendale Heights, IL, USA | CFF-500 | Quantità: 1 Dimensioni: 1/2 hp |
| 125 galloni open top cono fondo serbatoio w / Stand - 42 in x 35 in - contiene l'acqua e il sedimento per fare liquami | Stati Uniti Plastic Corp, Lima, OH, USA | 8586 | Quantità: 1 Dimensioni: 125 gal |
| Copertura per serbatoio da 125 galloni | Stati Uniti Plastic Corp, Lima, OH, USA | 8935 | Quantità: 1 Dimensioni: 42 in x 35 in |
| valvola, PVC - collegare lo scarico del serbatoio alla pompa - isolare per la manutenzione | fornitore di impianti idraulici locali | N/A | Quantità: 2 Dimensioni: 1-1/2 in |
| pompa, doppio diaframma montato su supporto - utilizzato per il ricircolo dei liquami | Wilden-pumps.co.uk & Air Pumping Ltd., Essex, Regno Unito | P2/PPPP/WF/WF/PTV/400 | Quantità: 1 sensore distributore |
| di contatto, retrodiffusione ottica - misura NTU nel serbatoio dei liquami | Campbell Scientific, Logan, UT, USA | OBS-3+ | Quantità: 1 Dimensioni: 0-1.000 tubo NTU |
| , PVC Schedule 40 - per ricircolare i liquami | fornitore di impianti idraulici locali | N/A | Quantità: 20 ft Dimensioni: 1 in |
| tubo, PVC flessibile - dotato di raccordo e utilizzato per il collegamento al fornitore | di impianti idraulici locale | del modulo successivoN/A | Quantità: 10 ft Dimensioni: 1 in |
| raccordo, PVC Schedle 80 Presa - collegare la linea dei liquami con | il fornitore di impianti idraulici locale | del modulo successivoN/A | Quantità: 8 Dimensioni: Solenoide da 1/2 pollice |
| , plastomatic (normalmente chiuso) - introdurre il liquame | Plast-O-Matic Valves, Inc., Cedar Grove, NJ, USA | EASYMT4V12R24-PV | Quantità: 5 Dimensioni: 1/2 in NPT filettato, 24 VAC raccordo distributore |
| , raccordo a T in PVC - collegare il tubo del liquame con | il fornitore di impianti idraulici locale | del solenoideN/A | Quantità: 5 Dimensioni: 1 in x 1 in x 1 in x 1 in slip x slip x FIPT |
| raccordi, 1 in PVC valvola a sfera filettata - chiusa per l'erogazione del liquame al solenoide/linee dell'acqua | fornitore idraulico locale | N/A | Quantità: 7 Dimensioni: 1/2 poll. |
| raccordi, 1 pollice raccordo in PVC filettato - collegare il solenoide liquame alla valvola di intercettazione | del fornitore idraulico locale | N/A | Quantità: 5 Dimensioni: 1/2 pollice |
| tubo, vinile - collegamento tra il solenoide dell'acqua e il solenoide dei liquami | Fornitore locale | N/A | Quantità: 50 ft Dimensioni: 1/4" ID |
| Elenco delle parti per il sistema idrico | |||
| chiller, acqua con pompa autonoma - si trova a lato del serbatoio | Remcor Products Co., Glendale Heights, IL, USA | CFF-500 | Quantità: 1 Dimensioni: 1/2 hp |
| 125 galloni aperto superiore cono fondo serbatoio w / Stand - 42 in x 35 in - contiene l'acqua e il sedimento per fare liquami | Stati Uniti Plastic Corp, Lima, OH, USA | 8586 | Quantità: 1 Dimensioni: 125 gal |
| Copertura per serbatoio da 125 galloni | United States Plastic Corp, Lima, OH, USA | 8935 | Quantità: 1 Dimensioni: 42 in x 35 in |
| valvola, PVC - collegare lo scarico del serbatoio alla pompa dell'acqua | fornitoreidraulico locale | N/A | Quantità: 2 Dimensioni: 1 in |
| pompa, azionamento magnetico, uso in linea - utilizzato per ricircolare l'acqua verso acquari e refrigeratori | Little Giant, Fort Wayne, IN, USA | 3-MD-SC | Quantità: 1 Dimensioni: solenoide da 1/12 hp |
| , alco - introdurre acqua | fuori produzione; ASCO, Florham Park, NJ, USA per simile | N/A | Quantità: 5 Dimensioni: 24 v, 1/4 in raccordi NIPT |
| , connettore riduttore in HDPE nero - collegare 1/4 in tubo flessibile linea dell'acqua dal solenoide a 1/2 in tubo flessibile | fornitore idraulico | locale N / A | Quantità: 5 Dimensioni: 1/2 in tubo ID x 1/4 in raccordi ID tubo |
| , tee in HDPE nero - collegare 1/2 in tubo flessibile linea di acqua e liquami al | fornitore di impianti idraulici locali | di acquariN / | A Quantità: 5 Dimensioni: 1/2 in NPT x 1/2 in ID tubo x 1/2 in raccordi ID tubo |
| , gomito stradale | fornitoredi impianti idraulici locali | N / A | Quantità: 5 Dimensioni: 1/2 in 90 ° grado Raccordi MIPT x FIPT |
| , nippli filettati in PVC - collegare i raccordi di raccordo con solenoidi e altri collegamenti | fornitore idraulico locale | N/A | Quantità: 12 Dimensioni: 1/2 pollice |
| raccordi, raccordi filettati - collegare le linee di liquame/acqua con il modulo successivo | fornitore idraulico locale | N/A | Quantità: 6 Dimensioni: 1 in PVC |
| raccordi, boccola del riduttore - collegare al raccordo a T del riduttore nel | fornitore di impianti idraulici locali | della linea dell'acquaN/A | Quantità: 5 Dimensioni: 1/2 in maschio per 1/4 in raccordi FIPT femmina |
| , nippli filettati per tubi - collegamento tra boccola e solenoide dell'acqua | fornitore di impianti idraulici locali | N/A | Quantità: 5 Dimensioni: 4 in lunghezza x 1/4 in |
| tubo, PVC - effettuare collegamenti tra serbatoio, pompa e refrigeratore | fornitoredi impianti idraulici locali | N/A | Quantità: 5 ft Dimensioni: Schedule 40 |
| Elenco delle parti per sensori, dispositivo di acquisizione dati e software per computer | |||
| software, LabView | National Instruments, Austin, Texas, USA | LabView 2015 Quantità di base | : 1 Dimensioni: N / A |
| SCXI-1001 Chassis a 12 slot, U.S. 120 VAC | National Instruments, Austin, Texas, USA | 776571-01 | Quantità: 1 Dimensione: N/A |
| SCXI 1100 - 32 canali, ± Modulo di ingresso analogico da 10 V | National Instruments, Austin, Texas, USA | 776572-00 | Quantità: 1 Grandezza: N/A |
| SCXI 1303 - Morsettiera progettata per misure di termocoppie ad alta precisione | National Instruments, Austin, Texas, USA | 777687-03 | Quantità: 2 Grandezza: N/A |
| SCXI 1102B - Modulo di ingresso termocoppia/tensione a 32 canali | National Instruments, Austin, Texas, USA | 776572-02B | Quantità: 1 Grandezza: N/A |
| SCXI 1161 - Modulo relè per uso generico | National Instruments, Austin, Texas, USA | 776572-61 | Quantità: 6 Grandezza: N/A |
| SCXI 1300 - Modulo di tensione per uso generico | National Instruments, Austin, Texas, USA | 777687-00 | Quantità: 1 Taglia: N/A |
| PCMCIA Card DAQCARD-AI-16E-4 | National Instruments, Austin, Texas, USA | N/A - legacy | Quantità: 1 Dimensione: N/A schede usate disponibili online |
| sensore, retrodiffusione ottica - misura NTU in ogni acquario | Campbell Scientific Inc., Logan, UT, USA | OBS-3 | +Quantità: 5 Dimensione: 0-1.000 NTU |