Patch Angioplastica nel ratto aorta o vena cava inferiore

Sommario

Abbiamo stabilito un modello di angioplastica pericardica a cerotti che può essere utilizzata sia in vene di piccolo diametro che in arterie. Questo modello può essere utilizzato per confrontare la formazione di iperplasia neointimale venosa e arteriosa.

Abstract

patch pericardiche sono comunemente utilizzati in chirurgia vascolare per chiudere i vasi. Per facilitare gli studi di iperplasia neointimale che si forma sulla patch, abbiamo sviluppato un modello di ratto di angioplastica cerotto che può essere utilizzato sia in una vena o un'arteria, creando un venoplasty patch o un Angioplastica patch, rispettivamente. Gli aspetti tecnici di questo modello sono discussi. L'IVC o dell'aorta infra-renali sono sezionati e poi serrati prossimale e distale. Un venotomia 3 mm o arteriotomy viene eseguita in infrarenale vena cava inferiore o aorta da 6 a 8 settimane di età ratti Wistar. Una patch di pericardio bovino (3 mm x 1,5 mm x 0,6 millimetri) viene quindi utilizzato per chiudere il sito utilizzando una sutura 10-0 nylon. Rispetto alle patch arteriose, venose patch mostrano un aumento dello spessore neointimale su postoperatoria giorno 7. Questo nuovo modello di angioplastica cerotto pericardio può essere utilizzato per esaminare neointimale sui biomateriali vascolari, nonché di confrontare le differenze tra arterioso e venosoambienti.

Introduzione

Chirurghi vascolari comunemente stretti vasi sanguigni con patch pericardico, sia bovina o suina, per ridurre il rischio di restenosi ^{1, 2.} Nella chirurgia arteriosa, pericardico cerotto angioplastica riduce il tasso di restenosi rispetto ad una chiusura primaria ^{3, 4.} Patch venoplasty è anche simile eseguita per chiudere le vene, anche se meno frequentemente rispetto alle procedure arteriosa ^{5, 6.} Le patch di solito si sviluppano neointimale sulla loro superficie luminale; Tuttavia, il meccanismo di formazione della neointima è chiaro, soprattutto nel confronto delle differenze in formazione neointimale tra arterioso e venoso ambienti. Abbiamo precedentemente dimostrato che le patch pericardico attraggono le cellule progenitrici sia arterioso e venoso degli ambienti e quella patch venoso angioplastica mostra più di unaformazione neointimale ggressive rispetto ai cerotti arteriosi ^{7, 8.}

In questo studio, descriviamo il modello di ratto di angioplastica patch di pericardio che è comune a chiudere entrambe le vene e le arterie e che possono essere utilizzati per studiare la formazione neointimale; Questo metodo è un piccolo modello animale di una tecnica operatoria comunemente utilizzato in pazienti umani. Il modello di ratto ha un diametro maggiore del modello di topo, facilitando aspetti tecnici della chirurgia e migliorando la curva di apprendimento per il modello.

Protocollo

Approvazione da parte del Comitato di cura e l'uso di animali istituzionale adeguato deve essere ottenuto, che indica che il protocollo segue le linee guida del comitato etico di ricerca animale del proprio istituto.

1. Anestesia e procedure pre-operatorie

1. Anestetizzare ratti maschi Wistar, del peso di circa 200 g, con vaporizzato 3% isoflurano e 1 L / min di ossigeno somministrato in una camera di induzione acrilico.
2. Confermare un'anestesia adeguata per mancanza di reazione ad un dito del piede e la coda pizzico. Posizionare pomata sugli occhi per prevenire la secchezza mentre gli animali sono sotto anestesia. Posizionare la supina ogni ratto sulla piastra di funzionamento di plastica e posizionare una maschera di silicone per fornire vaporizzato 2 - 3% isoflurano per inalazione continua. Non lasciare un animale incustodito fino a quando non ha ripreso conoscenza sufficiente a mantenere decubito sternale.
3. Indossando guanti sterili, rimuovere i capelli ventrale utilizzando un dispositivo di rimozione dei capelli. Buprenorphine, sottocutanea o intraperitoneale, è spesso data a questo punto.

2. Procedure Operative

1. Patch venoplasty
   1. Prima della chirurgia, tagliare la patch di pericardio bovino utilizzando un microscissor a una dimensione tre millimetri x 1,5 mm x 0,6 mm. Immergere il cerotto in 10 mL di soluzione salina sterile per 5 minuti in un piatto di coltura cellulare.
   2. Preparare il sito di incisione con un antisettico topico secondo il protocollo istituzionale e applicare un telo chirurgico. Utilizzare guanti e strumenti sterili per mantenere la tecnica asettica in tutta la chirurgia. L'anestesia locale possono essere iniettati nel sito della incisione cutanea previsto.
   3. Usando un bisturi, fare una incisione addominale mediana estende dal livello del xiphoid appena sopra il pube.
   4. Inserire un divaricatore e sviscerare tutte le viscere dalla cavità addominale verso il lato destro. Avvolgere le viscere in una garza imbevuta con soluzione fisiologica.
   5. Esporre l'ivena cava nfrarenal (IVC). Il sito del cerotto dell'impianto è di circa 2 mm sotto il livello dell'origine delle vene renali; sezionare il IVC gratuitamente in questo sito. Legare e dividere tutte le vene lombari e tributari a questo livello con 6-0 punti di sutura in nylon.
   6. Mettere due clip di microchirurgia attraverso sia prossimale e distale infarenal IVC. Eseguire un venotomia con un ago 25 G perforando la parete anteriore della IVC, e poi estenderla a circa 3 mm con forbici (Figura 1A).
   7. Chiudere il venotomia con la patch utilizzando in esecuzione o interrotto 10-0 suture in nylon (Figura 1B).
   8. Completare la chiusura venoplasty. Rimuovere il morsetto distale prima di sfogare la patch e quindi rimuovere il morsetto prossimale per ripristinare il flusso di sangue al IVC.
   9. Confermare emostasi osservando per 30 s senza compressione. Riportare le viscere alla loro posizione naturale. Chiudere l'addome con una sutura in esecuzione secondo protocolli approvati animali.
2. Patch Angioplastica
   1. Prima della chirurgia, tagliare la patch di pericardio bovino utilizzando un microscissor a una dimensione tre millimetri x 1,5 mm x 0,6 mm. Immergerlo in soluzione fisiologica sterile.
   2. Preparare il sito di incisione con un antisettico topico e applicare un telo chirurgico. Utilizzare guanti e strumenti sterili per mantenere la tecnica asettica in tutta la chirurgia.
   3. Usando un bisturi, fare una incisione addominale mediana estende dal livello del xiphoid appena sopra il pube.
   4. Inserire un divaricatore e sviscerare tutte le viscere dalla cavità addominale verso il lato destro. Avvolgere le viscere in una garza imbevuta con soluzione fisiologica.
   5. Esporre l'aorta. Il sito del cerotto dell'impianto è di circa 2 mm sotto il livello dell'origine delle arterie renali; sezionare l'aorta gratuitamente in questo sito. Legare e dividere tutte le arterie lombari a questo livello con 6-0 punti di sutura in nylon.
   6. Bloccare l'aorta sottorenale. Utilizzare un ago G 25 per eseguire un arteriotomia da puncturing parete anteriore dell'aorta, e poi estenderla a circa 3 mm forbici usando (Figura 1C).
   7. Chiudere il arteriotomia con la patch utilizzando in esecuzione 10-0 suture in nylon (Figura 1D). Completare la chiusura Angioplastica. Rimuovere il morsetto distale prima di sfogare la patch e quindi rimuovere il morsetto prossimale per ripristinare il flusso di sangue all'aorta.
   8. Confermare emostasi osservando per 30 s senza compressione. Riportare le viscere alla loro posizione naturale. Chiudere l'addome con una sutura in esecuzione secondo protocolli approvati animali.

Procedure 3. post-operatorie

1. Dopo la chiusura del ventre, interrompere l'anestesia. Applicare cure post-operatorie, tra cui l'analgesia e la cura delle ferite, secondo le istruzioni raccomandate dal Comitato Cura e uso istituzionale degli animali.
2. Per l'analgesia, utilizzare buprenorfina a 0,1 mg / kg per via intramuscolare non meno di ogni 12 ore per 24 ore seguonoing le procedure chirurgiche. Controllare lo stato dell'animale ogni giorno nella sala animale, garantendo il corretto recupero dal periodo perioperatorio nonché un'adeguata trattamento del dolore post-operatorio. Non restituire un animale che ha subito un intervento chirurgico per la compagnia di altri animali fino a quando non ha pienamente recuperato.

Risultati

Dopo l'angioplastica patch, non c'era trombosi sia venoso (n = 42) o arteriosa gruppi di patch (n = 24). La sopravvivenza al giorno 7 è stata del 100% in entrambi i gruppi sia con un venosa o arteriosa cerotto.

I cerotti sono stati raccolti il giorno 7 e colorate con ematossilina ed eosina, e lo spessore neointimale stato confrontato come precedentemente descritto ^7. A causa della differenza morfologica nett...

Discussione

Descriviamo un modello angioplastica patch nel topo che può essere utilizzato sia in vene o arterie, creando un venoplasty patch o patch di Angioplastica rispettivamente. Utilizzando questo modello di patch pericardico, abbiamo mostrato aggressivo e stabile iperplasia neointimale nel ratto IVC venoplasty rispetto al Angioplastica aortico (Figura 2) ^{7, 8.}

Diversi aspetti tecnici sono notevoli. Nel Angioplastica aortic...

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Cerotto pericardico bovino	LeMaitre Vascular Morsetto vascolare
	Roboz Surgical Instrument Co.	RS-5424
Pinze per applicazione morsetto	Roboz Surgical Instrument Co	RS-5410
10-0 Sutura in prolene	Arosurgical Co.	T05A10N10-13