Neurologico Reflex Test in neonatali Rat Pups

Sommario

test comportamentale è il gold standard per determinare i risultati in seguito a lesione cerebrale, e in grado di identificare la presenza di disabilità dello sviluppo nei neonati e nei bambini. i riflessi dello sviluppo neurologico sono un indicatore precoce di queste anomalie. Una serie di prove riflessi sviluppo facilmente realizzabile in roditori neonatale sono stati sviluppati e descritti qui.

Abstract

test riflesso neurologico è comunemente utilizzato nella pratica clinica per valutare la maturazione del sistema nervoso. riflessi dello sviluppo neurologico sono anche denominati riflessi, come primitivi. Sono sensibili e coerenti con i risultati successivi. riflessi anomali sono descritti come un'assenza, persistenza, ricomparsa, o latenza dei riflessi, che sono indici predittivi di neonati che sono ad alto rischio di disturbi dello sviluppo neurologico. Modelli animali di disabilità dello sviluppo neurologico, come la paralisi cerebrale, spesso mostrano riflessi sviluppo aberranti, come sarebbe essere osservato nei neonati umani. Le tecniche descritte valutare una varietà di riflessi dello sviluppo neurologico nei ratti neonati. test del riflesso neurologico offre l'investigatore un metodo di prova che non è altrimenti disponibili in tali animali giovani. La metodologia qui presentata si propone di aiutare gli investigatori in esame tappe dello sviluppo nei ratti neonati come un metodo per rilevare br ad esordio precocelesioni ain e / o determinare l'efficacia degli interventi terapeutici. La metodologia qui presentata si propone di fornire un orientamento generale per gli investigatori.

Introduzione

riflessi dello sviluppo neurologico, o tappe dello sviluppo, sono una delle prime valutazioni utilizzate sui neonati umani e neonati. riflessi neurologici sono movimenti involontari e ripetitivi che dimostrano tronco cerebrale e riflessi del midollo spinale. Maturazione delle maggiori reti corticali caratterizzate evolvendo migrazione, mielinizzazione, e sinaptogenesi promuovere controllo volontario e l'inibizione corticale. Alterazioni nel normale progressione dell'evoluzione del sistema nervoso centrale possono interrompere lo sviluppo cerebrale, con conseguente anomala cablaggio corticale, funzionamento, e mielinizzazione, causando ritardi riflessi neurologico o assenze. neonati umani ad alto rischio per la disabilità sviluppo neurologico spesso mostrano anomale primi riflessi. riflessi anormali possono presentare come un ritardo nell'acquisizione, assenza, presenza prolungata o ricomparsa tardi nella vita, e sono predittivi di disabilità dello sviluppo. ^{1, 2} Perciò, È importante simulare ritardi riflessi in modelli sperimentali di disabilità dello sviluppo neurologico.

I roditori sono comunemente impiegati come modelli sperimentali. cuccioli di ratto sono altricial quando nasce, e quindi troppo immatura per intraprendere motore specifico o complessa, compiti comportamentali sensoriali e / o cognitive. A questo proposito, la loro immaturità sviluppo riguarda sia il loro sviluppo fisico e organo. I ratti sono nati senza pelo con l'incapacità di termoregolazione, sono ciechi, e in grado di camminare. Con riferimento allo sviluppo del cervello, notevole maturazione corticale si verifica dopo la nascita. cuccioli di ratto appena nati (giorno della nascita indicati come postnatale giorno 1; PD1) sono stati suggeriti per raggiungere un livello di maturazione del cervello che è simile a un cervello umano pretermine di 23 - 28 settimane di gestazione, mentre PD7-10 cuccioli sono equivalenti a vicino- cervello umano termine. ^{3, 4, 5, 6}Questa correlazione si basa su analisi anatomiche lordi, tuttavia, sono anche state descritte altre misure di maturazione cerebrale come mielinizzazione e ampiezza integrato elettroencefalogramma. ^{5, 7} Ad esempio, pre-oligodendrociti sono le cellule predominanti nella sviluppo del cervello fetale umano da 23 - 32 settimane in utero, e questa fase di maturazione corrisponde ad un roditore PD1-3. ^{5, 8, 9, 10} Inoltre, myelination inizia in utero nell'uomo che nei ratti neonati appare nel proencefalo intorno PD7-10; il roditore cervello neonato rimane in gran parte non-mieliniche. ^{11, 12} Tucker et al. trovato che l'ampiezza integrato modello elettroencefalogramma di un ratto P1 per essere simile ad un 23 settimane gestazione feto umano, mentre un cucciolo PD7 e PD10 è simile a un 30-32 settimana e periodo infantile, rispettivamente. ⁷ Per queste ragioni, neonato test del riflesso in cuccioli di ratto neonatale offre l'opportunità per catturare l'ontogenesi e / o interruzione dello sviluppo del cervello.

La batteria di riflessi descritte qui sotto sono adattati da studi di WM Fox e A. Lubics ^{13, 14} WM Fox è stato uno dei primi investigatori rispetto alla ontogenesi dei riflessi nel topo. ¹³ Questi riflessi includono, ma non sono limitati a, arto presa e posizionamento, evitamento scogliera, raddrizzamento, accelerato raddrizzamento, andatura, trasalimento uditivo, la postura e l'apertura degli occhi. Sia forelimb e arti posteriori presa (denominato palmo-plantare afferrare nell'uomo, rispettivamente) sono facilitati da riflessi spinali e inibizione corticospinale dalle aree motorie non primarie. ^{15, 16} arti posteriori immissione (riflessologia plantare) riflette la maturazione del tratto corticospinale. ^{16, 17, 18} Cliff evitamento (risposte protettive), raddrizzamento (labirinto), e accelerato raddrizzamento comporta l'integrazione e la comunicazione tra ingresso e uscita del motore sensoriali (come quelli coinvolti nella vibrisse e sistemi vestibolari). ^{19, 20, 21} Gait riflette locomozione. ¹⁴ trasalimento uditivo valuta stimolazione acustica e connessioni sinaptiche dei neuroni giganti nel nucleo reticularis pontis caudalis. ²¹ postura coinvolge appropriate / proiezioni corticali-spinale spinali-corticale, la forza muscolare e innervazione neuromuscolare. ^{22, 23} mAturation gamma dei recettori dell'acido a-amminobutirrico può correlare con apertura degli occhi. ²⁴ È importante tenere presente che i riflessi riflettono una rete molto più complicato e fornito qui è una correlazione generale. Inoltre, questi riflessi forniscono un metodo rapido e semplice di valutazione dello sviluppo neurologico in età molto giovane in cui test comportamentali più complessi non è fattibile.

L'obiettivo di questo documento è di fornire una guida generale per il test riflesso neurologico che può essere facilmente incorporato in studi sperimentali neonatali di ratto. La metodologia descritta è stata svolta a Long-Evans cuccioli di ratto neonatale e la quantificazione dei risultati è basata su primo giorno di apparizione. Il giorno in cui reflex test è avviato e l'attrezzatura utilizzata può essere modificata per adattarsi meglio un modello sperimentale diverso (ad esempio per diversi ceppi e specie). Stabilendo la normale progressione fisiologica di refmaturazione lex in un modello animale specifico, i ricercatori possono valutare gli effetti dei fattori di stress esterni, manipolazioni endogeni e / o interventi terapeutici su neurodevelopment in modelli di ratto neonatale. Nel complesso, l'uso di riflessi, come una determinazione di maturità cerebrale è vantaggioso nel predire danno cerebrale perinatale, ed è riflettente dei risultati dello sviluppo neurologico successivi.

Protocollo

L'Animal Care and Use Committee, Scienze della Salute presso l'Università di Alberta ha approvato tutti gli studi su animali.

Nota: Anche se questo protocollo può essere adattato ad altre specie e ceppi, questo protocollo è stato scritto per i ratti a lungo Evans. Questi ratti hanno dimostrato di avere prestazioni del motore superiori e acuità visiva rispetto ad altri ceppi di roditori. ^{25, 26} Il protocollo per le gravidanze a tempo, l'integrazione alimentare, infiammazione materna, e riflessi dello sviluppo neurologico è la seguente.

1. Gli animali sperimentali

1. Quando i topi arrivano alla struttura stabulazione degli animali, astenersi da ogni interazione per un giorno o due per permettere loro di acclimatarsi al nuovo ambiente. A seguito di acclimatazione, gestire i ratti ogni giorno per circa cinque giorni, o quando i topi non sono più mostrando segni di stress. lo stress indotto dall'uomo può alterare i risultati dei test e leannuncio a perdita di gravidanza.
2. Una volta che i ratti sono confortevoli, l'allevamento ha inizio. Mettere due femmine e un ratto maschio in una gabbia di allevamento a due piani (h = 38 cm, 1.800 cm ² Superficie) durante la notte (3:00 - 8 AM). Queste gabbie impediscono lo stress e sovraffollamento. Al mattino, usando una pipetta di trasferimento, lavare la vagina dei ratti femmina con circa 0,25 mL di soluzione salina. Trasferire la soluzione in una provetta.
3. Posizionare i due femmine e maschi nelle loro rispettive gabbie convenzionali.
4. Visualizzare la soluzione raccolta nella sezione 1.2 sotto un microscopio ottico (100X) per determinare quale fase del ciclo estrale ratto sta sperimentando e se spermatozoi o non sono presenti. Se ci sono spermatozoi, registrare la data come giorno embrionale (E1) (Figura 1). In caso di gravidanza, dare la femmina la propria gabbia su E14.
   NOTA: Le cellule striscio vaginale sono chiari, quindi utilizzare un ambiente a bassa luce. Assicurarsi che il condensatore è regolato nella sua posizione più bassa. Anno Dominisolo il controllo della luminosità per attenuare la luce. Se un quadrante luminosità è disponibile, impostarlo 1.

2. dietetici supplementazione

NOTA: Questo protocollo ha lo scopo di valutare gli effetti terapeutici di broccoli nella dieta il consumo di germogli durante l'ultima settimana di gravidanza. Crescere i germogli secondo Wu et al. ^27.

1. Mettere a bagno i semi germogli di broccoli per 2 - 3 ore. Diffondere i semi su una scatola di semi sprouter piano di lavoro e impostato su una superficie calda per la germinazione.
2. Innaffiare i semi di due volte al giorno, una al mattino (8-9 del mattino) e una volta nel PM (3-4 PM).
3. Il giorno cinque, posizionare i germogli da una finestra per il giorno (germogli devono avere due foglie ciascuno e diventerà verde nel corso della giornata).
4. Alla fine della giornata, raccogliere i germogli tirando leggermente i germogli di broccoli dalla scatola setacciata e posare su una superficie piana ad asciugare.
5. Una volta che i germogli sono completamente essiccati, weigh su 200 mg e posto in un sacchetto di plastica.
6. Inizia l'E14, avanzare ciascun incinta ratto 200 mg di germogli di broccoli secchi giornalmente fino PD21 (il giorno cuccioli vengono svezzati).

3. L'infiammazione

1. Per indurre l'infiammazione e riprodurre lesioni della sostanza bianca nella prole, iniettare ratte gravide con lipopolisaccaride (LPS) ogni 12 ore sulla E19 e E20. Il giorno di iniezione, portare la gabbia in laboratorio dalla struttura alloggiativa. Lasciare che il ratto in gravidanza si adatti e diventare la calma per almeno 1 ora. Se un ratto mostra segni clinici di danno renale sistemica o permanente, verrà immediatamente eutanasia e rimosso dallo studio.
2. Pesare la diga incinta.
3. Sciogliere 200 ug / kg di LPS (sierotipo 0127: B8) in 100 ml di soluzione fisiologica. Aspirare la soluzione in una siringa da 1 ml munito di 30 G ½ ago.
   1. Usare un nuovo ago ad ogni iniezione. Lasciare che la soluzione si riscaldi per un paio di minuti per ridurre al minimo il disagio.
4. Registrare il tempo e iniettare la diga di gravidanza per via intraperitoneale. iniezioni alternano tra parti per garantire un'equa distribuzione.
   NOTA: Machholz et al. descrive le corrette procedure di contenimento e di iniezione. ²⁸

4. I test Developmental Reflex

1. Su PD1 (giorno della nascita), togliere i cuccioli dalla diga e registrare peso alla nascita. Posizionare i cuccioli nelle loro rispettive gabbie e spostarli alla struttura animale fino PD3. Questo assicura legame materno tra diga e cucciolo.
   1. Registrare il test reflex per la valutazione affidabile. Regolare la telecamera in modo che sia alla massima velocità dell'otturatore per analisi (1 / 1.000 s) fotogramma per fotogramma. Posizionare la telecamera in modo che sia direttamente sopra oa fianco del cuccioli di ratto e tutti i materiali utilizzati per ogni riflesso. Ad esempio, per l'immissione degli arti posteriori, posizionare la telecamera accanto cuccioli di ratto per permettere il sollevamento e sistemazione del arti posteriori viene catturato.
   2. Per il raddrizzamento accelerata, posizionare la telecamera sopra il cucciolo ratto e piattaforma di atterraggio al fine di registrare la capacità del cucciolo a destra a mezz'aria.
2. Registra pesi tutti i giorni fino alla fine dell'esperimento. Su PD3, iniziare neurologico prova del riflesso (figura 4). Spostare gabbie in una stanza tranquilla per almeno 1 ora prima del test per consentire acclimatazione all'ambiente.
3. Eseguire il test del riflesso neurologico alla volta coerente ogni giorno come i ratti sono animali notturni. Ad esempio, prova tra le 09:00-12:00 tutti i giorni. Mantenere i cuccioli direttamente sotto una lampada riscaldante o su un tappetino di calore in ogni momento, per mantenere una temperatura corporea stabile di 36,5 ° C; cuccioli di ratto di questa età perdono calore facilmente. Misurare con una sonda di temperatura rettale. Se fatto in modo efficiente, le temperature cuccioli corpo non cambiano, perché non vengono rimossi dalla diga e lettiera abbastanza a lungo. NOTA: Monitorare la temperatura della lampada di calore per assicurare che non superi i 37 ° C.
   1. Registrare il punteggio di ogni riflesso ogni giorno fino a quando si osserva una risposta positiva. Una risposta positiva riflesso si verifica quando il cucciolo è in grado di eseguire un'operazione in due giorni consecutivi. La data della prima occorrenza di una risposta positiva è usato per la quantificazione. Nessun ulteriore test è richiesto in seguito alla risposta positiva. Di qui il termine ultimo per ogni riflesso è variabile.
4. forelimb Grasping
   1. A partire dal PD3, condurre il test del riflesso zampa anteriore portata. Con un'asta smussato contro il palmo di ogni zampa anteriore e applicare una leggera pressione manuale. La leggera pressione dovrebbe leggermente spostare zampa anteriore per assicurare che il contatto è fatto ei cuccioli può sentire l'asta. Cogliere apparirà come la flessione di tutte le cifre intorno all'asta. acquisizione di successo di questo riflesso si verifica quando due zampe anteriori afferrare l'asta per due giorni consecutivi.
   2. Punteggio la stretta zampa anteriore:
      0 per nessun attaccamento
      1 per afferrare con successo da uno zampa anteriore (sinistra o right zampa anteriore può essere specificato qui)
      2 per la presa di successo da entrambe le zampe anteriori
5. hindlimb Grasping
   1. A partire dal PD3, condurre il test del riflesso degli arti posteriori portata. Con un'asta smussato contro la suola di ogni zampa posteriore ed esercitare una leggera pressione manuale. La leggera pressione dovrebbe leggermente spostare la zampa posteriore per assicurare che il contatto è fatto ei cuccioli può sentire l'asta. afferrare il successo dell'asta appare come la flessione delle cifre intorno all'asta. acquisizione di successo di questo riflesso si verifica quando entrambi hindpaws afferrare l'asta per due giorni consecutivi.
   2. Punteggio alla portata degli arti posteriori:
      0 per nessun attaccamento
      1 per il successo afferrare da una zampa posteriore (a sinistra oa zampa posteriore destra può essere specificato qui)
      2 per la presa di successo da entrambe le hindpaws
6. raddrizzamento
   1. A partire dal PD3, iniziare il test del riflesso di raddrizzamento. Tenere saldamente il cucciolo in posizione supina, con tutte e quattro le zampe in posizione verticale. Lasciar andare of il cucciolo e subito avviare il timer. Raddrizzante si ottiene quando il cucciolo è in grado di capovolgere / rotolarsi su tutte e quattro le zampe, e ogni zampa è perpendicolare al corpo. Dare ad ogni cucciolo un massimo di 15 s per raggiungere questo obiettivo.
   2. Punteggio ottenuto il raddrizzamento:
      0 per supina (o 15 s per il tempo massimo consentito)
      1 per sdraiato sul lato (lato sinistro o destro può essere specificato qui) o la capacità del cucciolo di destra, ma nella posizione sbagliata (o 15 s per il tempo massimo consentito)
      2 per il raddrizzamento di successo e la postura adeguata
7. collocazione degli arti posteriori
   1. A partire dal PD4, iniziare l'arti posteriori mettendo reflex test. Mantenere il cucciolo in verticale in aria, dal torso. Delicatamente ictus dorso della zampa posteriore con una superficie smussata (come il bordo di una tabella). Una corretta collocazione riflesso è quando il cucciolo ratto ritira il hindlimb stimolata, seguita da posizionamento della arti posteriori giù su quella superficie.
   2. Punteggio ottenuto il pl arti posterioriacing reflex:
      0 per nessun successi
      1 per l'immissione di una zampa posteriore (a sinistra oa zampa posteriore destra può essere specificato qui)
      2 per il successo immissione degli arti posteriori per entrambe le hindpaws
8. Cliff Prevenzione
   1. A partire dal PD4, iniziare il test scogliera evitamento. Posizionare il cucciolo ratto a bordo di una superficie piana, in modo che le zampe anteriori e muso del cuccioli sono oltre il bordo. Il risultato corretto è una risposta protettiva, dove il cucciolo ratto si allontana dal bordo della scogliera. la mano dello sperimentatore o di un atterraggio di schiuma è posto sotto la scogliera per prendere il cucciolo dalla caduta.
   2. Punteggio scanso scogliera:
      0 per nessun movimento o cadere bordo
      1 per i tentativi di allontanarsi dalla scogliera, ma con arti appesi
      2 per il movimento di successo lontano dalla scogliera
9. Andatura
   1. Iniziare la valutazione della deambulazione sul PD6. Posizionare cuccioli nel centro di un 15 centimetri diameter cerchio e consentire il cucciolo 30 s per completare l'operazione. ¹⁴ Un andatura successo viene eseguita quando il cucciolo ratto è in grado di spostare entrambe le zampe anteriori fuori del cerchio in meno di 30 s.
   2. Segnare l'andatura come il tempo in secondi necessario il cucciolo ratto per spostare fuori dal cerchio. Registrare il tempo necessario il cucciolo per spostare entrambe le zampe anteriori di fuori del cerchio. Record 30 s se il cucciolo è in grado di completare l'operazione entro il tempo determinato
10. Auditory Startle
    1. Iniziare l'analisi di trasalimento uditivo su PD10. Presentare un forte rumore (campana) direttamente sopra il cucciolo di valutare se un risposte di allarme è presente. Una risposta positiva startle si osserva quando il cucciolo visualizza un movimento 'strappi', lontano dal suono.
    2. Punteggio ottenuto il trasalimento uditivo:
       (O no) per nessun risposte di allarme
       (O sì) per una risposta positiva trasalimento
11. posizione
    1. Iniziare analisi posturale sul PD12. Inserire cuccioli su una superficie aperta non scivolosa, e osservare la postura il cucciolo ha quando si muove. Una postura immaturo si riflette trascinando dell'addome durante lo spostamento e puntamento perpendicolare sia zampe anteriori e hindpaws rispetto al corpo. Una posizione matura è ottenuto quando il cucciolo può sollevare l'addome dalla superficie ed entrambe le zampe anteriori e hindpaws sono puntata direttamente, o parallela al corpo, quando si muove.
    2. Nota la postura:
       0 per nessun movimento
       1 per la postura immaturo quando si muove
       2 per la postura matura durante il movimento
12. Aprire gli occhi
    1. Iniziare analisi aprire gli occhi su PD12. Registra il giorno di entrambe le palpebre aperte:
       0 per nessun occhi visibili
       1 per un occhio visibile (a sinistra oa destra può essere specificato qui)
       2 per due occhi visibili
13. raddrizzamento Accelerated
    1. A partire dal PD14, iniziare il test di raddrizzamento accelerato. Mettere il cucciolo in una posizione supina 30.48 centimeters sopra un atterraggio di schiuma. Eliminare il cucciolo e osservare la sua capacità di raddrizzarsi. Raddrizzante riferisce a quando il cucciolo è in grado di ruotare verso la posizione prona e atterrare sulle zampe.
    2. Punteggio ottenuto il raddrizzamento accelerata:
       0 per caduta sul dorso
       1 per caduta su un lato (lato sinistro o destro può essere specificato)
       2 per l'atterraggio sulle zampe

Nota: I diversi tipi di quantificazione dei riflessi sono disponibili a seconda della domanda degli investigatori. Quantificazione dei riflessi può essere fatto come prima osservazione di un riflesso, primo giorno di apparizione fino alla scomparsa del riflesso, il tempo necessario per eseguire con successo il compito, velocità di esecuzione, e / o il miglioramento delle prestazioni nel tempo. ^{13, 14, 29, 30, 31} Per il cstudio orrente, il primo giorno di apparizione è stata usata come un punteggio. Quando si utilizzano modelli pluripare, cuccioli della stessa cucciolata di solito si comportano in modo simile a causa del loro corredo genetico, in utero e l'ambiente dopo il parto, e la disponibilità nutrizionale. ³² Pertanto, un singolo cuccioli non può essere spiegata come n = 1 a causa di polarizzazione lettiera. Cuccioli esaminate entro un disordine possono essere mediate in modo che ogni lettiera rappresenta un n = 1. ^{32, 33} In alternativa, diversi cuccioli all'interno della stessa cucciolata possono essere analizzati utilizzando il modello a effetti misti, che tiene conto cuccioli all'interno della stessa cucciolata. ^{32, 33}

Risultati

La sequenza temporale di questo disegno sperimentale è presentato in figura 2. ³⁰ I metodi e risultati sono stati pubblicati in precedenza. ³⁰ L'obiettivo dello studio era di valutare se la supplementazione dietetica con germogli di broccoli durante la gestazione e nel periodo preweaning protetto la prole da ritardo dello sviluppo neurologico indotta da esposizione in utero a LPS. ratte gr...

Discussione

test riflesso neurologico è una misura predittiva di anormale sviluppo corticale e maturazione, che può essere di importanza in circostanze in cui neuropatologia palese non è evidente. Durante il test neurologico, è fondamentale garantire che i cuccioli vengono esaminate contemporaneamente quotidiano. I ratti sono animali notturni e, quindi, il loro ritmo circadiano possono alterare le prestazioni se il test viene eseguito in tempi diversi durante il giorno. ³⁴ Il test dovrebbe essere completato ...

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Breeding
Transfer pipette	Fisherbrand	12-711-9AM	Utilizzate per le vampate vaginali.
Soluzione salina sterile	Hospira	7983254	La soluzione utilizzata per raccogliere le cellule durante le vampate vaginali.
400 & micro; L Provette per microcentrifuga	Fisherbrand	05-408-120	Utilizzate per contenere la soluzione salina.
Microscopio ottico	Leica	Leica ATC 2000	Per l'osservazione della soluzione salina. Può essere qualsiasi microscopio ottico utilizzato in laboratorio.
Vetrini	Fisherbrand	12-552-5	La soluzione salina viene posizionata sul vetrino. Può essere qualsiasi diapositiva utilizzata in laboratorio.
Vetrini coprioggetti	Fisherbrand	12-545-F	Per far scivolare i vetrini. Può utilizzare qualsiasi vetrino coprioggetti utilizzato in laboratorio.
Dietetico  Integrazione
Semi di germogli di broccoli	Semi		semi di germogli di broccoli vengono ordinati e coltivati in laboratorio.
Scatola per germogliatori di semi	da banco Semi		Una scatola viene utilizzata per germinare e far crescere i semi prima del raccolto.
		250 ml	Il becher viene utilizzato per immergere il seme. È possibile utilizzare un bicchiere di qualsiasi dimensione che si adatti.
Infiammazione materna
Lipoplisaccaride (LPS)	Sigma	L3129	L'endotossina utilizzata per imitare l'infiammazione materna.
Siringa da 1 ml Siringa	BD	309659	Utilizzato per iniettare il ratto gravido.
Calibro (30 G x 1/2)	BD PrecisionGlide Ago	305106	Utilizzare l'ago più piccolo per evitare dolore e disagio.
Soluzione salina sterile (cloruro di sodio allo 0,9%, USP)	Hospira		viene utilizzata per sciogliere l'LPS.
Pesi
Bilancia	Denver Strumento		Per registrare i pesi. Può essere qualsiasi scala con 2 cifre decimali utilizzata in laboratorio.
Riflessi dello sviluppo neurologico
Sottile asta			Può essere una graffetta o uno stuzzicadenti. Questo è per la presa degli arti anteriori e posteriori.
Carta da filtro rotonda	Whatman	1001 150	carta da 15 cm di diametro utilizzata per l'analisi dell'andatura.
Timer	Fisher Scientific	06-662-51	Per cronometrare il tempo assegnato al raddrizzamento e all'andatura.
		smussata	Può essere il bordo di un tavolo. Questo serve per posizionare gli arti posteriori ed evitare la scogliera.
Atterraggio			Per quando i cuccioli eseguono il raddrizzamento accelerato.
Videoregistratore	Sony	VCT-D580RM	Per registrare tutti i riflessi testati. Deve essere in grado di registrare a 1/1.000 fps
Bell			Per lo spavento uditivo.
Lampada termica o cuscinetto			Per mantenere la temperatura corporea dei cuccioli sottoposti all'esame.