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Articolo metodologico

Nerve-sparing Mid-ostruzione uretrale (Nemo) nel femminile piccoli roditori

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DOI:

10.3791/55288

25 aprile 2017

In questo articolo

Sommario

modellazione tradizionale di parziale ostruzione della vescica nei roditori è carico di mortalità degli animali. Una lesione denervazione dalla dissezione attorno alla uretra e la vescica collo prossimale è anche di grande preoccupazione. Abbiamo sviluppato e valutato un modello mid-ostruzione uretrale sicuro ed affidabile, evitando le carenze del modello tradizionale.

Abstract

Parziale ostruzione della vescica (pBOO) ha una elevata prevalenza, provoca notevole onere del paziente, e costi sanitari enormi. Il modello animale più comune per indagare rimodellamento della vescica in pBOO sono roditori di sesso femminile sottoposte a parziale ostruzione al uretra prossimale. Variabilità nel grado di ostruzione e mortalità degli animali sono maggiori preoccupazioni con ostruzione prossimale. Inoltre, sezionare intorno al uretra e la vescica collo prossimale mette a repentaglio innervazione della vescica.

Abbiamo sviluppato un modello un'ostruzione uretrale metà nerve-sparing (Nemo) per pBOO evitando gli svantaggi del modello tradizionale. Ci siamo avvicinati l'uretra appena inferiore alla sinfisi pubica, che ha ovviato alla necessità di laparotomia, nonché per la dissezione in questo settore; Inoltre, lo sfintere uretrale striato rimasta intatta. Abbiamo eseguito nemo in ratti femmina Sprague-Dawley (12 ostruzioni, 6 animali sham), così come nella femminili / topo BL6 C57 (20 ostruzioneS, 18 animali sham). Dopo due settimane abbiamo valutato la funzione della vescica, la massa della vescica e la massa corporea.

Non avevamo alcuna mortalità tra i ratti femminili ostruiti o affamati; Come descritto per il tradizionale metodo pBOO prossimale, abbiamo legato la sutura attorno all'uretra prossimale e un asta metallica temporaneamente posizionata di 0.9 mm. NeMO ha indotto un aumento dell'85% della massa della vescica dopo due settimane, il volume medio di urina residuo è stato di 0,4 mL in ratti parzialmente ostruiti, mentre solo 0,03 mL negli animali affamati. Nei topi abbiamo testato 3 dimensioni di cannole che abbiamo posto lungo l'uretra quando legano la sutura. Abbiamo scoperto che l'utilizzo di una cannula da 27 gauge ha determinato una mortalità animale superiore al 50%; Posizionare la cannula a 25 gauge non ha dato la risposta desiderata in massa aumentante della vescica; Utilizzando una cannula a 26 gauge ha dato risultati favorevoli con una minima mortalità animale (1/8), ma un significativo aumento di massa della vescica di due volte.

Introduzione

Parziale di uscita della vescica ostruzione (pBOO) ha una elevata prevalenza e può causare grave disfunzione della vescica 1; lo spettro varia da malformazioni congenite come valvole uretrali posteriori o ipospadia, oltre stenosi uretrale acquisiti a iperplasia prostatica benigna. Quest'ultima colpisce oltre il 30% degli uomini sessant'anni e più 2. Grande peso del paziente e costi sanitari associati immensi pBOO garantiscono il notevole sforzo di ricerca messo in studiare il rimodellamento della vescica in risposta alla resistenza maggiore deflusso 3. Dal 2006 fino al 2015, oltre 220 Pub....

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Protocollo

Il seguente protocollo sperimentale è stato approvato dal comitato di cura degli animali dell'istituzione.

1. Nemo ratti femmina

  1. Preparazione
    1. Posizionare un ratto femmina Sprague-Dawley del peso di circa 200 g sotto il 3% isoflurano anestesia, pesare l'animale, e la rasatura e disinfettare la zona prepubico 3 volte utilizzando uno scrub chirurgico iodio.
    2. Su una piastra elettrica, nastro arti posteriori e la coda verso il basso e cateterizzarla la vescica con un'angiocatheter calibro 20, che è anche leggermente nastro adesivo per impedire scorrimento.
  2. Di....

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Risultati

Nerve-sparing Mid-ostruzione uretrale (Nemo) nei ratti femmina

Mortalità

Abbiamo effettuato un mid-ostruzione uretrale su più di 40 ratti femmina finora e non ha avuto mortalità.

massa della vescica

massa vescica .......

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Discussione

Mortalità animale è una delle principali preoccupazioni del modello tradizionale della pBOO presso l'uretra prossimale, al 15% o più in molte relazioni 10, 11, 13. NeMO sembra avere la mortalità minima quando viene applicata nei ratti femmina. Prossimale ostruzione uretrale nei topi è tecnicamente più impegnativo rispetto nei ratti, e quindi anche più inclini a complicazioni. Utilizzando una cannula 26-gaug.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Il lavoro è stato finanziato da una sovvenzione operativa CHIR (DJB).

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Femmina di rattoCharles-River CanadaSprague Dawley Rat (Crl:SD); Codice ceppo: 400circa 200 g
Vaporizzatore IsofloraneBenson medical industries inc.TEC III Isoflurano; codice prodotto: 53-T3ISO 
IsofloraneFresenius Kabi Salute AnimaleIsoflorane; codice prodotto CP0406V2  Flacone da 250 ml
Bisturi monousoTed Pella, Inc.#15 Bisturi sterili in acciaio inossidabile; numero di catalogo 549-9-15S
Pinza per microscopiaTed Pella, Inc.Pinze per microscopia Aesculap, Finepoint, 115mm; codice prodotto 5443
Pinze AdsonTed Pella, Inc.Pinza per dissezione Aesculap Adson, curva, 120mm; codice prodotto 5002-9
Forbici chirurgiche curveTed Pella, Inc.Forbici chirurgiche, curve, acciaio inox, 105mm; numero di catalogo 1376
Asta in metallo inox da 0,9 mmgoodfellow.comacciaio inox - AISI 316L Diametro filo: 0,9 mm; codice d'ordine 911-684-65
Ganci per pelle - autocostruiti in acciaio inoxgoodfellow.comacciaio inox - AISI 316L Diametro filo: 0,9 mm; codice d'ordine 911-684-65
4-0 Sutura inseta esutures.com4-0 Filo di seta nero 98"; codice prodotto LS640
5-0 SuturaVicry esutures.com5-0 Vicryl non tinto 27" cono RB-1; codice prodotto J213H
Porta agoMedsupplier.comIntegra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Porta aghi - 5 1/2"; codice prodotto SKU NEE4484-8-40TC
SKU NEE4484-8-40TC
SKU NEE4484-8-40TC 
Temgesic (Buprenorfina)prima fornitura veterinariaBuprenex 0.3MG/ml inj amps; articolo #075701
siringa da 1 ml con ago da 27 GFisher ScientificBD  Siringa per tubercolina, BD 309623
20 g AngiocathFisher ScientificAndwin Scientific  ANGIOCATH 20 GA; N. catalogo
Dieta di recuperoclearh2oDietGel 31M; 72-08-5022
C57Bl/6 topi femminaCharles-River CanadaC57BL/6 Topo (C57BL/6NCrI); Codice ceppo: 027circa 18 g
24 G angiocathFisher ScientificHanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; N. catalogo
5-0 Ethibondesutures.com5-0 Ethibond verde 30" cono RB-1; codice prodotto X550H
Ago per siringa da 26 GSigma-AldrichBD Precisionglide, calibro 26; z192392
salina normaleBaxterper iniezione di cloruro di sodio allo 0,9%, USP, mini-bag da 100 ml; codice prodotto 2B0043
NC9561906NC9814340 Soluzione

Riferimenti

  1. Andersson, K. E. Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects. Urology. 62 (5), 3-10 (2003).
  2. Boyle, P., et al. The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study. BJU Int. 92 (4)....

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Ristampe e permessi

Tag

Ostruzione parziale dell estensione vescicalemodello di roditore femminainnervazione dell estensione vescicaleposizionamento di cannula uretraleaumento della massa vescicalevolume di urina residuaratti Sprague Dawleytopi C57BL 6tecnica chirurgica