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Articolo metodologico

Migliorare la forza, il potere, la capacità aerobica muscolare e la tolleranza al glucosio attraverso la formazione a breve termine di resistenza progressiva tra le persone anziane

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DOI:

10.3791/55518

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5 luglio 2017

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1Åstrand Laboratory of Work Physiology, The Swedish School of Sport and Health Sciences, GIH, 2Department of Neuroscience, Karolinska Institutet, 3Department of Physiology and Pharmacology, Karolinska Institutet

In questo articolo

Sommario

L'effetto della formazione di resistenza a breve termine su persone anziane è stato studiato attraverso l'utilizzo simultaneo di diversi metodi. Rispetto ad un gruppo di controllo, sono stati osservati molti miglioramenti, tra cui la capacità aerobica muscolare, la tolleranza al glucosio, la forza, la potenza e la qualità muscolare ( cioè le proteine ​​coinvolte nella segnalazione delle cellule e nella composizione del tipo di fibra muscolare).

Abstract

Questo protocollo descrive l'uso contemporaneo di un ampio spettro di metodi per esaminare la capacità aerobica muscolare, la tolleranza al glucosio, la forza e il potere nelle persone anziane che eseguono una formazione a resistenza a breve termine (RET). La formazione di resistenza progressiva supervisionata per 1 h tre volte alla settimana su 8 settimane è stata eseguita da partecipanti RET (71 ± 1 anni, range 65-80). Rispetto ad un gruppo di controllo senza formazione, il RET ha mostrato miglioramenti sulle misure utilizzate per indicare la resistenza, la potenza, la tolleranza al glucosio e diversi parametri della capacità aerobica muscolare. La formazione di resistenza è stata eseguita in una palestra con solamente robuste attrezzature fitness. Un dinamometro isocinetico per la resistenza all'estensore del ginocchio ha permesso di misurare la concentricità, l'eccentricità e la resistenza statica, aumentata per il gruppo RET (8-12% dopo-prova). Il potere (velocità di sviluppo della forza, RFD) al 0-30 ms iniziali ha anche mostrato un aumento per il gruppo RET (52%). Una prova di tolleranza al glucosio con frequeLa misurazione del glucosio nel sangue ha mostrato miglioramenti solo per il gruppo RET in termini di valori di glucosio nel sangue dopo 2 h (14%) e l'area sotto la curva (21%). Anche il profilo lipidico del sangue è migliorato (8%). Dai campioni di biopsia muscolare preparati utilizzando istochemia, la quantità di fibra IIa aumentata e una tendenza verso una diminuzione di IIx nel gruppo RET rifletteva una variazione a un profilo più ossidativo in termini di composizione della fibra. Western blot (per determinare il contenuto proteico relativo alla segnalazione per la sintesi proteica muscolare) ha mostrato un aumento del 69% in sia Akt che mTOR nel gruppo RET; Questo ha anche mostrato un aumento delle proteine ​​mitocondriali per il complesso OXPHOS II e la citrato sintetico (entrambi al 30%) e per il complesso IV (90%), solo nel gruppo RET. Ci dimostriamo che questo tipo di formazione di resistenza progressiva offre diversi miglioramenti ( ad esempio, forza, potenza, capacità aerobica, tolleranza al glucosio e profilo lipidico al plasma).

Introduzione

L'invecchiamento è associato ad una perdita di massa muscolare (sarcopenia), forza e potenza. La resistenza ridotta, e probabilmente ancor più importante, provoca l'immobilità, un aumento del rischio di lesioni e una minore qualità di vita. La formazione della resistenza è una strategia ben nota per contrastare la sarcopenia e la deteriorazione della funzione muscolare. Una stima della resistenza muscolare può essere ottenuta dal carico o dal numero di ripetizioni raggiunte. Tuttavia, questo studio ha ottenuto informazioni più dettagliate e precise sulla funzione muscolare usando un dinamometro isokinetico per raccogliere informazioni sulla coppia durante la contrazione isometrica, concentrica ed eccentrica, nonché sulla cinetica dello sviluppo della forza.

La capacità aerobica, sia a livello del corpo intero (VO 2max ) che nel muscolo scheletrico, è ridotta nelle persone anziane. La diminuzione della frequenza cardiaca con l'età spiega una gran parte della diminuzione di VO 2max 1 , ma diminuisce il musLa capacità ossidativa, in larga misura correlata all'attività fisica ridotta 2 , contribuisce. La funzione mitocondriale compromessa può anche essere coinvolta nello sviluppo della sarcopenia e della resistenza all'insulina 3 . La capacità aerobica muscolare è stata valutata in biopsie muscolari attraverso analisi biochimiche del contenuto di enzimi mitocondriali e complessi proteici situati sia nella matrice ( cioè nella citra sintetica) sia nella membrana mitocondriale interna. Inoltre, sono state utilizzate tecniche istochemiche per misurare l'effetto della formazione di resistenza sulla morfologia muscolare ( cioè composizione di fibra, sezione trasversale in fibra e densità capillare). Un metodo alternativo per valutare la capacità aerobica muscolare sarebbe quello di utilizzare spettroscopia a risonanza magnetica per misurare la velocità della resintensione di fosfato di creatina dopo l'esaurimento indotto dall'esercizio 4 . Questo metodo fornisce una stima della capacità aerobica muscolare in vivoMa non può discriminare tra disfunzione mitocondriale e disturbi circolatori. Inoltre, i costi elevati dell'apparecchiatura limitano l'uso di questa tecnica nella maggior parte dei laboratori. La capacità aerobica (VO 2max e densità mitocondriale) può essere migliorata con esercizio di resistenza sia nei giovani che negli anziani 5 , 6 . Tuttavia, l'effetto della formazione di resistenza su questi parametri è stato meno studiato, soprattutto nei soggetti anziani e i risultati sono in conflitto tra 7 , 8 , 9 , 10 .

Il diabete di tipo 2 è una malattia diffusa nella popolazione anziana. L'inattività fisica e l'obesità sono fattori importanti di stile di vita che spiegano l'aumento dell'incidenza del diabete di tipo 2. L'esercizio aerobico a bassa intensità è spesso consigliato a soggetti con ridotta tolleranza al glucosio. Tuttavia, è uncCome l'addestramento della forza negli anziani influenza la tolleranza al glucosio / sensibilità all'insulina 11 , 12 . Il modo più preciso per misurare la sensibilità all'insulina è quello di utilizzare la tecnica del mastice di glucosio, in cui il glucosio nel sangue è mantenuto costante mediante l'infusione di glucosio in condizioni di elevata insulina 13 . Gli svantaggi con questa tecnica sono che richiedono tempi e invasivi (cateterizzazione arteriosa) e richiedono speciali strutture di laboratorio. In questo studio è stato utilizzato il test orale di tolleranza al glucosio, che è comune nelle unità sanitarie. Questo metodo è adatto quando diversi soggetti devono essere studiati per un periodo di tempo limitato.

Il test e la sequenza temporale della procedura sperimentale possono essere riassunti come segue. Utilizzare tre giorni separati per il test prima e dopo un periodo di otto settimane, con la stessa disposizione e pianificazioni di tempo approssimative (≥24 ore tra ogni giorno, < Forte> Figura 1). Al primo giorno di prova, misurare: dati antropometrici, come ad esempio l'altezza, la massa corporea, la massa senza grassi (FFM) e la circonferenza della gamba superiore ( cioè 15 cm sopra le patelle apice in posizione supina rilassata); Capacità ciclo submaximale; E la forza muscolare del ginocchio, come descritto nei passaggi 4 e 5. Prenda una biopsia muscolare dalla coscia alla seconda prova giornata. Per ulteriori descrizioni, vedere la fase 6.1. Testate la tolleranza orale di glucosio (OGTT) nell'ultimo giorno di prova. Per ulteriori descrizioni, vedere la fase 7.1. Chiedere a tutti i partecipanti di evitare attività fisiche vigorose per 24 ore e di veloci durante la notte prima di ogni giorno di prova. Tuttavia, chiedere loro di evitare attività fisica carente per 48 ore prima della giornata di prova OGTT. Chiedi loro di seguire la loro normale attività fisica quotidiana e le abitudini alimentari. Si noti che l'intervento pre-e post-intervento, l'assunzione di cibo e il tipo di alimenti da parte di entrambi i gruppi erano invariati.

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Figura 1: Protocollo sperimentale. Diagramma schematico. Il tempo tra i tre pre- e post-test è stato simile per ogni soggetto ed è stato di almeno 24 ore. Ulteriori dettagli sono riportati nel testo. Questa cifra è stata modificata da Frank et al. Scand. J. Med. Sci. Sport . 2016: 26, 764-73. 28 Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Questo studio ha cercato di indagare l'effetto della formazione di resistenza a breve termine nelle persone anziane sulla capacità ossidativa del muscolo e sulla tolleranza al glucosio. Il secondo obiettivo era quello di esaminare l'effetto sulla forza, sul potere e sui miglioramenti qualitativi muscolari ( cioè le proteine ​​coinvolte nella segnalazione cellulare e nella composizione del tipo di fibra muscolare).

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Protocollo

Il Comitato Regionale Etico di Stoccolma, Svezia, ha approvato la progettazione dell'inchiesta.

1. Materiale

  1. Reclutare donne relativamente sane e uomini 65-80 anni che hanno valori BMI compresi tra 20 e 30 kg · m -2 . Randomizzi in due gruppi. Assicurarsi che gli individui in entrambi i gruppi abbiano livelli relativamente bassi di attività fisica ( ossia moderata attività fisica quotidiana e nessun addestramento fisico regolare).
  2. Escludere gli utenti beta-bloccanti e quelli con malattia coronarica e gravi problemi neurologici o congiunti.
  3. Chiedere ai soggetti per il loro consenso scritto dopo aver informato loro del possibile disagio e rischi durante le prove e le sessioni di allenamento.
  4. Bilancia la formazione di resistenza (RET) e il controllo senza formazione (CON) in termini di età, sesso e BMI. Chiedere a un gruppo di eseguire RET sotto un allenatore per 1 ora tre volte alla settimana per otto settimane; L'altro gruppo servirà come controLs (CON).

2. Test e formazione

Nota: gli otto esercizi sono esercizi di allenamento standard: la seduta a gamba, la crisi addominale seduta, la schiena supina, l'estensione posteriore seduta, la pressa a spalla seduta, il canottamento seduto, l'estensione della gamba seduta (estensione del ginocchio) e la curvatura della gamba (ginocchio) ; Vedere la figura 8 nella sezione Risultati rappresentativi.

  1. Durante la prima sessione di allenamento, valutare la massima forza ad una ripetizione massima (1 RM) per ogni esercizio di allenamento.
    NOTA: Il modello 1 RM è comunemente usato e viene definito come il carico in cui il soggetto può sollevare o spingere la resistenza solo una volta ma non due volte.
    1. Prima dell'avvio, chiedere al partecipante di effettuare un breve riscaldamento (con poche prove iniziali a carichi pesanti molto bassi) dell'esercizio esaminato. Successivamente aumentare il carico fino a poco al di sotto del probabile 1 valore RM (più spesso il massimo di 3-4 aumenta loAnnunci). Registrare il carico massimo che il soggetto può eseguire solo una volta (= 1 RM).
    2. Misura 1 RM nelle otto esercitazioni di resistenza standard (vedere la figura 8 nella sezione Risultati rappresentativi). Chiedere ai soggetti di riposare per almeno 2-3 minuti tra ciascun esercizio fisso.
      NOTA: L'attrezzatura di allenamento a forza è stata utilizzata per tutti gli esercizi di allenamento, inclusi i test di ogni esercizio di allenamento.
  2. Chiedere a tutto il gruppo RET di eseguire 1 h di allenamento di resistenza sorvegliata tre volte alla settimana per otto settimane. Chiedere ai partecipanti di eseguire, dopo il riscaldamento, gli otto esercizi di formazione standard sopra menzionati. Dovrebbero ripetere un esercizio di 12 volte in ciascuna serie e eseguire tre serie di ogni esercizio. Lasciare riposare per 1 min tra ogni set e 2-3 minuti tra ciascun esercizio.
    1. Chiedere ai soggetti di eseguire ogni esercizio il più velocemente possibile durante la fase concentrica ( ossia la fase di accorciamento muscolare) e lentamente durante la faseFase eccentrica ( cioè, fase di allungamento muscolare).
      NOTA: I soggetti possono eseguire gli esercizi in qualsiasi ordine. Tuttavia, chiedere loro di iniziare e terminare con un esercizio di gamba e anche per cercare di eseguire gli otto esercizi nell'ordine presentato. Utilizzate le attrezzature di allenamento per tutte le otto esercitazioni.
    2. Durante ogni sessione di allenamento, chiedere ai partecipanti di eseguire tre serie a 75-80% di 1 RM per ogni esercizio. Aumenta il carico di circa il 5% della sessione dopo quando un partecipante può effettuare 12 ripetizioni in tutti e tre i set di un esercizio.

3. Prova ciclabile submaximale

Nota: eseguire il test ciclo submaximale sul primo giorno di prova (vedere Introduzione e Figura 1 ).

  1. Eseguire un test di ergometro a ciclo, compresi due livelli submaximali, ciascuno per 4 min 14 , 15 . Impostare la prima velocità di lavoro a bassa (30 W) e la seconda a 60-120 W, senza pausa tra i carichi dell'erogometro di ciclo.
    NOTA: Il primo carico è lo stesso per tutti i soggetti, ma il secondo ed ultimo livello submaximale dovrebbe essere di circa il 65-85% della frequenza cardiaca massima per ogni soggetto. Entrambi i carichi devono essere gli stessi prima e dopo il periodo di intervento di 8 settimane di allenamento.
    1. Stabilire il secondo livello di carico più elevato sui test di familiarizzazione effettuati prima delle prove, chiedendo come è fisicamente attivo la persona e avendo inizialmente il ciclo del soggetto per un breve periodo; Il test leader creerà un parere basato sulla frequenza cardiaca del soggetto in merito a quale carico submaximale finale è appropriato.
    2. Registrare la frequenza cardiaca media (HR) usando un monitor di frequenza cardiaca tramite un cinturone toracico durante l'ultimo minuto sulle basse e elevate tasse di lavoro, assumendo la media degli HR osservati alle 3:15, 3:30, 3:45 , E 4:00 min ad ogni tasso di lavoro.
    3. Utilizzare un dispositivo ergo-spirometrico per accertare la composizione del gas (O 2 e CO 2 ) nell'aria scaduta e ispirata. Registrare il rapporto di respirazione (RER, cioè CO 2 / O 2 ) e quantificare i valori medi di RER durante l'ultimo minuto (da quattro misure ogni 15 secondi) a entrambi i carichi di frequenza.

4. Forza dell'estensore del ginocchio: la coppia di picco statica, eccentrica e concentrica e la velocità di sviluppo della forza

Nota: eseguire le misure della resistenza al ginocchio al giorno di prova 1 (vedere Introduzione e Figura 1 ).

  1. Prima delle registrazioni, chiedere al soggetto di eseguire un riscaldamento a ciclo per 8-10 minuti su un ergometro a livello submaximale (ossia circa il 65-85% della frequenza cardiaca massima).
  2. Chiedere all'oggetto di sedersi sul banco di un dinamometro isokinetico. Fissare il tronco del soggetto con cinghie sulle spalle e sui fianchi. Fissare saldamente la gamba del soggetto all'albero del dinamometro con due cinghie: uno sotto il ginocchio e uno appena sopraLa caviglia. Allineare l'asse del ginocchio con il centro di rotazione dell'albero del dinamometro.
  3. Quando il soggetto è protetto, valutare la massima forza ginocchio volontaria come la coppia di picco, con il soggetto seduto nel dinamometro isocinetico. Inizialmente consentire al soggetto di svolgere diverse prove per familiarizzare con l'apparecchiatura di resistenza al ginocchio (dinamometro isocinetico).
  4. Chiedere all'individuo di eseguire quattro estensioni massime volontarie eccentriche e concentriche a ginocchio (alternativamente), con la gamba destra con una velocità angolare costante di 30 deg / s. Impostare l'intervallo di movimento tra 90 ° e 15 ° (gamba dritta = 0 °).
    1. Nel compito eccentrico, chiedere al soggetto di resistere all'albero del dinamometro con sforzo massimo durante tutto il movimento dall'angolo del ginocchio 15 ° a 90 °. Nel compito concentrico, chiedere all'oggetto di premere la gamba inferiore dell'albero del dinamometro in un'estensione del ginocchio, il più difficile possibile per tutta la gamma di movimento.
  5. Lasciare riposare 4 minuti dopo le registrazioni dinamiche. Successivamente, valutare la coppia statica massima di contrazione volontaria (MVC) quattro volte ad un angolo di 65 ° di ginocchio. In ogni prova statica, chiedere ai soggetti, seduti nello stesso dinamometro, di scuotere il più velocemente e più duro possibile contro l'albero del dinamometro, che ora è fisso (a 65 °) e non può essere spostato.
  6. Per i segnali di coppia (forza), convertite i segnali di coppia analogici in digitale utilizzando una casella convertitore analogico-digitale collegata al dinamometro isocinetico.
    NOTA: Il convertitore modifica automaticamente i segnali analogici dal dinamometro ai segnali digitali, che successivamente vengono esportati automaticamente nel computer in cui vengono raccolti i dati.
    1. Impostare la frequenza di campionamento a 5 kHz nel programma di analisi software del computer. Memorizzare i segnali digitali sul computer per una successiva analisi del valore di forza con il programma di analisi software.
  7. Nell'analisi successiva, utilizzareIl valore più alto ottenuto da quattro prove per ogni soggetto nelle misurazioni eccentriche, concentriche e statiche. Nel programma software, fare clic sul valore più alto dei quattro trial e scrivere il valore di resistenza mostrato sullo schermo del computer.
    1. Registrare la coppia massima di picco nell'eccentrico e nelle registrazioni concentriche per ogni soggetto e il valore massimo di forza tra i quattro processi statici.
      NOTA: Il test dinamometrico isokinetico della resistenza all'estensore del ginocchio in posizione seduta ha una corretta affidabilità e validità 16 , 17 .
  8. Misurare il tasso di sviluppo della forza (coppia) durante 0-30 ms e 0-200 ms nel valore più alto trovato tra le prove statiche. Impostare il valore di zero al livello di 7,5 Nm per l'inizio della contrazione per la forza dell'estensore del ginocchio (tempo: 0 ms) 18 , 19 . Spostare il cursore (nel programma software per il muscoloAnalisi di forza) al valore "7,5 Nm" sulla scala y per ottenere la posizione per 0 ms.
    1. Per la valutazione pre-test, impostare il cursore sul valore 30 ms (dopo il tempo 0 ms). Scrivi il valore che mostra l'aumento in Nm a 30 ms ( cioè l'aumento di Nm da 7,5 Nm = 0 ms). Effettuare la stessa procedura per il valore post-test.
    2. Calcolare l'aumento percentuale del valore Nm post-prova (numeratore) rispetto al valore Nm pre-test (denominatore) nel periodo di 0-30 ms. Così, presentate l'aumento del RFD in percentuale dal pre-test al post-test. Eseguire le stesse analisi per l'intervallo di tempo di 0-200 ms.

5. Biopsia muscolare

Nota: eseguire una biopsia muscolare durante il giorno di prova 2 (vedere Introduzione e Figura 1 ).

  1. Prendi una biopsia muscolare dalla parte centrale del muscolo coscia laterale utilizzando un conchotomo 20 .
    1. Prima della biopsia, iniettare 1-2 mL di anestesia locale sottocutanea e nella fascia. Dopo un paio di minuti, effettuare un'incisione con un piccolo bisturi attraverso la pelle e la fascia, circa 1/3 della distanza dalla patella alla colonna vertebrale superiore anteriore. Estrae circa 100-150 mg di tessuto muscolare usando il conchotomo.
  2. Freeze campioni per istochemia in isopentane raffreddati al punto di congelamento in azoto liquido e conservarli a -80 ° C. Conservare un campione di 30-50 mg di tessuto muscolare.
  3. Rapidamente congelare i campioni per analisi proteica in azoto liquido e conservarli a -80 ° C. Conservare un campione di 30-50 mg di tessuto muscolare.

6. OGTT

Nota: eseguire OGTT (prova di tolleranza orale di glucosio) nel giorno di prova 3 (vedere Introduzione e Figura 1 ). Il tempo tra l'esercizio e l'OGTT deve superare 48 h e dovrebbe essere simile tra il pre e il post-test. Un OGTT orale a 2 ore viene utilizzato per indagare se frequenti campioni di sangue durante questo periodo mostrano livelli normali o aumentati, indicando il diabete o le condizioni di prediabete.

  1. Esegui la prova OGTT al mattino su soggetti che hanno digiunato durante la notte e non hanno fatto alcun esercizio fisico durante il giorno di prova o il giorno prima.
  2. Prendete i campioni di sangue (4 mL) dai pazienti supinati attraverso una cannula venosa nella vena antecubita 15 minuti prima e poco prima dell'assunzione di glucosio, seguita da 15, 30, 60, 90 e 120 minuti dopo l'ingestione del glucosio ( 75 g di glucosio in una soluzione di 250 g / L).
  3. Centrifugare i campioni di sangue a 1.500 xg e 4 ° C per 10 minuti e memorizzare il plasma a -20 ° C per ulteriori analisi. Utilizzare i campioni per eseguire test standard di livello di glucosio (passo 7).
  4. Per il glucosio, l'insulina e il c-peptide, calcolare l'area sotto la curva (AUC) determinando l'intero tempo del glucosio sopra i livelli di glucosio basale. Utilizza i risultati OGTTPer calcolare la sensibilità dell'insulina per tutto il corpo utilizzando il metodo Matsuda 21 , come per l'equazione: 10 000 * √ [Basso di glucosio * Basalto dell'insulina] * (Glucosio medio * Insulina media ).

7. Analisi dei campioni di sangue

  1. Quantificare la concentrazione di glucosio nel plasma venoso con un analizzatore automatizzato. Impostare il livello di tolleranza al glucosio a valori di glucosio nel sangue> 7,8 mmol / L dopo 2 ore di OGTT 22 .
  2. Usare kit ELISA 22 per eseguire analisi plasmatiche di insulina e c-peptide. Utilizzare un lettore di piastre. Mettere le piastrine ELISA per insulina e c-peptide in un lettore di piastra (ognuna in un'occasione separata).
    NOTA: il lettore di piastre misura la quantità di insulina e la quantità di c-peptide misurando i campioni sulla piastra ad alcune assorbanze. I lipidi ematici TG, HDL, apolipoproteina A1 e apolipoproteina B sono stati analizzati con metodi standard aL'Ospedale Universitario di Karolinska, Stoccolma, in Svezia.

8. Analisi dei campioni muscolari

  1. immunoblotting
    1. Innanzitutto congelare il campione muscolare in un liofilizzatore ad una pressione inferiore a 10 -1 mbar per 12 h. Disseccarlo in modo che sia privo di sangue e tessuto connettivo utilizzando un ago e una pinza sotto un microscopio leggero. Conservarlo a -80 ° C.
      NOTA: Una quantità adeguata di muscoli è compresa tra 1 e 5 mg di peso secco, ma il protocollo può essere regolato a meno di 1 mg, fino a singole fibre. A causa della bassa quantità di tessuto muscolare presente in una biopsia, i valori di quel partecipante RET non sono stati utilizzati per l'immunoblotting.
    2. Omogeneizzare i campioni muscolari Con un fascio di mini bead in tampone ghiaccio-freddo (80 μL / mg) composto da 2 mM di acido 4- (2-idrossietil) -1-piperazinattanesolfonico (HEPES), 1 mM acido etilendiammintetraoacetico (EDTA), 5 mM etilene glicol-bis (Β-aminoetil etere) -N, N, N ', N'-tetraacet(EGTA), 10 mM MgCl2, 50 mM ß-glicerofosfato, 1% TritonX-100, 1 mM Na 3 VO 4 , 2 mM dithiothreitolo, 20 μg / ml leupeptina, 50 μg / ml aprotinina, Cocktail e 40 μg / μL di PMSF (fenilmetilsolfonilfluoruro).
      1. Mettere una scoop di branelli di ossido di zirconio da 0,5 mm in ogni tubo con il muscolo. Aggiungere tampone e omogeneizzare per 2 x 1 min alla fase di velocità 7-8 (qui il massimo è 10) e 4 ° C.
    3. Centrifugare l'omogenato per 10 min a 10.000 x g. Trasferire il rimanente supernatante in nuovi tubi e scartare il pellet contenente le proteine ​​strutturali.
    4. Determinare spettrofotometricamente la concentrazione proteica nel surnatante con un kit disponibile in commercio utilizzando un lettore di piastre a 660 nm 23 .
      1. Successivamente diluire i campioni con tampone di campione di 2x Laemmli e tampone omogeneizzante (1: 1) ad una concentrazione proteica finale di 1,5 μg /# 181; L. Scaldare a 95 ° C per 5 minuti per denaturare le proteine. Conservare i campioni diluiti a -20 ° C prima dell'analisi.
    5. Per l'elettroforesi con gel nativo-poliacrilammide (PAGE), caricare 30 μg di proteine ​​da ciascun campione in gel di gradiente prefabbricato a 18 pozzetti (4-20% acrilammide) e eseguire elettroforesi a 300 V per 30 minuti in ghiaccio.
    6. Equilibrare il gel in tampone di trasferimento (25 mM Tris base, 192 mM glicina e 10% metanolo) per 30 minuti a 4 ° C. Trasferire le proteine ​​in membrane di polivinilidene fluorurate con pori di 0,2 μm a una corrente costante di 300 mA per 3 ore a 4 ° C.
    7. Per confermare il carico e il trasferimento uguali, macchiare le membrane con una macchia proteica totale 24 . Per ogni proteina bersaglio caricare tutti i campioni di ogni soggetto sullo stesso gel e eseguire tutti i gel contemporaneamente.
    8. Bloccare la membrana per 1 h a temperatura ambiente in soluzione tris-tampone (20 mM Tris-base, 192 mM NaCl, TBS, pH 7,6) contenente5% di latte non grasso.
    9. Incubare le membrane durante la notte con anticorpi primari (vedi Elenco materiali) diluiti in TBS contenenti latte non grasso del 2,5% e completati con 0,1% di Tween-20 (TBS-TM).
    10. Dopo l'incubazione primaria di anticorpi, lavare le membrane (2 x 1 min più 3 x 5 min) con TBS-TM e incubare con anticorpi secondari (vedi Elenco Materiali) coniugati con perossidasi di rafano per 1 ora a temperatura ambiente. Lavare di nuovo con TBS-TM (2 x 1 min e 3 x 10 min) e sottoporre nuovamente a quattro lavaggi supplementari di 5 min con TBS.
    11. Applicare 6-12 ml di substrato chemiluminescente alla membrana per 5 min. Posizionare la membrana tra due fogli di plastica trasparenti. Posizionare le membrane di fronte a una fotocamera CCD che blocca la luce esterna. Prendere le esposizioni seriali usando un filtro della fotocamera chemiluminescente.
      1. Utilizzare il programma software per acquisire 10 esposizioni per 2 minuti o fino a quando i segnali sono saturi. Utilizzare un'impostazione standard, sia per le impostazioni del filtro ottico tO acquisire la chemiluminescenza, oltre che per le impostazioni delle lenti.
    12. Utilizzare la massima esposizione che non porta alla saturazione e contrassegnare i contorni della banda. Quantificare le bande come intensità x mm 2 usando lo stesso software. Sottrai il rumore di fondo dall'intensità della banda. Presentare i risultati relativi alla macchia proteica totale e esprimerlo come cambiamento percentuale rispetto alla linea di base.
  2. istochimica
    NOTA: La tecnica dell'istochemia qui di seguito è basata sui metodi descritti in una pubblicazione precedente 25 .
    1. Per istochemia, tagliare le sezioni trasversali di serie (10 μm) a -20 ° C utilizzando un criostato. Montare le sezioni trasversali su vetrate conservate in una cuvetta di vetro e asciugare le fettine di biopsia a temperatura ambiente.
    2. Preparare soluzioni tampone per ogni livello di pH per la preincubazione a pH 4,3, 4,6 e 10,3 per la colorazione ATPasi 26 . Per visualizzare i capillari, staNelle sezioni trasversali utilizzando il metodo di amilasi-PAS 27 .
    3. Calibrare un misuratore di pH versando soluzioni di calibrazione in bicchieri di taratura etichettati. Premere il pulsante appropriato per selezionare il pH dal menu principale.
      1. Sciacquare la sonda con acqua deionizzata e posizionare la sonda nel primo becher di calibrazione. Assicurarsi che non ci siano bolle d'aria nella membrana. Misurare la prima soluzione di calibrazione e presentare la soluzione di calibrazione successiva (il display chiede la soluzione successiva).
      2. Sciacquare la sonda con acqua deionizzata e posizionarla nel secondo bicchiere di calibrazione. Assicurarsi che non ci siano bolle d'aria nella membrana. Misurare una seconda soluzione di calibrazione e procedere alla successiva soluzione di calibrazione.
      3. Sciacquare la sonda con acqua deionizzata e collocarla in un terzo recipiente di calibrazione. Assicurarsi che non ci siano bolle d'aria nella membrana. Misurare la terza soluzione di calibrazione.
        NOTA: quando è la calibrazioneBuono, il display mostrerà brevemente, "Buffer tre riga OK" e quindi tornerà al menu principale.
    4. Utilizzare i tamponi come segue per la colorazione di ATPasi.
      1. Per preparare una soluzione a pH 10,3, utilizzare due soluzioni diverse: (A) 4.506 g di glicina, 4.8 g di CaCl2, 3.51 g di NaCl e 600 ml di dH2O e (B) 2.176 g di NaOH e di 540 ml Di dH 2 O. Conservare le soluzioni in una stanza fredda o in un frigorifero. Usarli entro un mese.
      2. Per preparare soluzioni a pH 4.3 e 4.6, eseguire "preincubazione acido". Preparare l'acido per la preincubazione utilizzando: 6,47 g di Na acetato, 3,7 g di KCl e 500 ml di dH 2 O. Successivamente preparare 1% CaCl2 sciogliendo 2,5 g di esso in 250 ml di dH2O. Preparare 2 % Di CoCl 2 sciogliendo 5 g in 250 mL di dH 2 O.
      3. Conservare e utilizzare queste soluzioni come sopra indicato. Infine, preparare 0,2% di solfuro di ammonio perMescolando 800 μl di 20% (NH 4 ) 2 S in 40 ml di dH 2 O. Preparare questi ultimi freschi.
    5. Preparare soluzioni a determinati valori di pH come segue. Dopo la calibrazione del pH-meter, rimuovere le cuvette e i cloruri di calcio e cobalto dal frigorifero e lasciarli riscaldare a temperatura ambiente prima della colorazione.
      1. Per pH 10,3 , aggiungere circa 25 ml di soluzione A ad un piccolo bicchiere di vetro (circa 70 ml). Misurare il pH. Continuare ad aggiungere la soluzione B fino a raggiungere il pH richiesto di 10,37. Se la colorazione è troppo scura, aumentare il pH. Se è troppo luminoso, ridurre il pH.
      2. Per il pH 4.6 , aggiungere circa 25 ml di "preincubazione acido" ad un piccolo bicchiere di vetro. Misurare il pH. Ridurre il pH utilizzando 5 M di acido acetico . Se l'immagine della macchia è troppo scura, cercare di schiarire con un pH aumentato. Se è troppo luminoso, scurire con un pH ridotto. Se la colorazione non aiuta, prova un altro pH: 4,8 instEad di 4.6.
      3. Per il pH 4.3 , fare lo stesso come per il 4.6, ma aggiungere più acido acetico. Diminuire il pH se la macchia è troppo luminosa e aumentare il pH se è troppo scuro per le fibre da specificare.
      4. Preparare la soluzione ATP come segue. Ponderate 0,017 g di ATP per cuvetta (10 ml), quindi 0,051 g per 3 cuvette o 0,068 g per 4 cuvette. Prendete 30 mL (per 3 cuvette, 10 mL / cuvetta) di soluzione a pH 10.3 (utilizzare un vetro di scala a cilindro) e metterlo in un bicchiere di vetro con ATP pesato.
        1. Mescolare accuratamente e misurare il pH. Ridurre il pH usando HCl concentrato finché il pH raggiunge esattamente 9,40.
      5. Per l'incubazione a vari valori di pH, procedere come segue. Posizionare la soluzione 10.3 in una cuvetta e incubarla in un bagno d'acqua a 37 ° C per 9 min. Mettere la soluzione 4.3 in un'altra cuvetta e incubarla a temperatura ambiente per 5 min. Inserire la soluzione 4.6 nell'ultima cuvetta e incubare a RT per 1 minuto.
      6. Seguendo il pH preferitoProcedura di incubazione, applicare il contenuto di ciascuna cuvetta come segue. Lavare 15 volte con dH 2 O. Aggiungere la soluzione ATP (0,170 g di ATP / 100 ml di H 2 O) al campione di biopsia. Incubare in un bagno d'acqua a 37 ° C per 30 min. Lavare 15 volte con dH 2 O.
      7. Aggiungere la soluzione CaCl2 (1 g di CaCl 2/100 mL di H 2 O) al campione di biopsia nelle cuvette. Incubare a RT per 3 min. Lavare 15 volte con dH 2 O. Aggiungere la soluzione di CoCl2 (2 g di CoCl 2/100 mL di H 2 O) al campione di biopsia nelle cuvette. Incubare a RT per 3 min. Lavare 15 volte con dH 2 O.
      8. Metterlo in soluzione (NH 4 ) 2 S per 30 s e lavare rapidamente 15 volte sotto il cofano. Incollare la biopsia fette sul vetro scorrevole. Per evitare le bolle, spremere le biopsie, ma non troppo duro.
    6. Selezionare una regione della sezione trasversale senza manufatti o tagli longitudinali della fibra. Analizza sotto un liGht microscopio con software.
    7. Valutare l'area di sezione trasversale (CSA), i capillari e la classificazione del tipo di fibra (tipo I, IIA o IIX) attraverso l'analisi dell'immagine computerizzata da una media di almeno 150-200 fibre per biopsia. Da un quadro microscopico delle fibre muscolari nelle sezioni trasversali, assicurarsi che i tre tipi di fibre muscolari (tipo I, IIA e IIX) presentino varie sfumature di bianco a grigio a nero, a seconda della colorazione pH ( cioè, 4.34, 4.65 e 10.37).
    8. Inizia con la marcatura di alcune fibre di tipo I. Successivamente, il programma registra automaticamente le altre fibre di tipo I. Controllare che tutte le fibre di tipo I siano contrassegnate correttamente. Per contrassegnare una determinata fibra, fare clic sul pulsante "Vector". Utilizzare il cursore per misurare l'area per ciascuna fibra muscolare selezionata individualmente.
    9. Dopo l'analisi delle fibre di tipo I continuare la stessa procedura per il tipo IIA e il tipo IIX. La media ± SEM per ogni tipo di fibra muscolare ( cioè tipo I, IIA e IIX) dovrebbero essere calcolati per quanto riguarda la quantità di fibre e la CSA per i gruppi RET e CON.
      Nota: La sezione trasversale (CSA), i capillari e la classificazione del tipo di fibre (tipo I, IIA e IIx) sono state valutate da una media di 163 ± 9 fibre per biopsia.

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Risultati

Materiale

Nello studio, 21 donne e uomini relativamente sani, 65-80 anni e con valori BMI compresi tra 20 e 30 kg · m -2, hanno partecipato e sono stati randomizzati in due gruppi. Gli individui in entrambi i gruppi avevano livelli di attività fisica relativamente bassi ( cioè un moderato livello di attività fisica quotidiana e nessuna formazione regolare). Un gruppo (n = 12, 6 donne e 6 uomini) ha eseguito RE...

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Discussione

In questo studio sono state utilizzate numerose tecniche per studiare gli effetti della formazione a resistenza progressiva a breve termine sulla funzione muscolare / morfologica dei soggetti anziani, capacità aerobica e tolleranza al glucosio. Il risultato principale è stato che, rispetto ad un gruppo di controllo, si sono verificati molti miglioramenti nella capacità aerobica muscolare, nella tolleranza al glucosio, nella forza, nella potenza e nella qualità muscolare ( cioè nella proteina coinvolta nella seg...

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Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

Ringraziamenti

Gli autori sono grati a Andrée Nienkerk, Dennis Peyron e Sebastian Skjöld per la supervisione delle sessioni di formazione e di numerosi test; Ai soggetti partecipanti; A Tim Crosfield per la revisione linguistica; E al sostegno economico della Scuola svedese di sport e salute.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Western blot
Pierce 660 nmThermo Scientific, Rockford, IL, USA22662
Substrato di massima sensibilità SuperSignal West Femto Thermo Scientific34096
Cocktail di inibitori della proteasi Halt (100x)Thermo Scientific78429
Restore PLUS Western Blot Stripping BufferThermo Scientific46430
Pierce Kit di colorazione proteica reversibile per membrane PVDFThermo Scientific24585
10 st - 4– 20% Criterion TGX Gel, 18 pozzetti, 30 µ LBio-Rad Laboratories, Richmond, CA, USA567-1094
Membrana PVDF Immun-Blot Bio-Rad162-0177
Precision Plus Protein Dual Color Standards Bio-Rad161-0374
2x Laemmli Sample BufferBio-Rad161-0737
10x Tris/GlycineBio-Rad161-0771
2-MercaptoethanolBio-Rad161-0710
Tween 20Bio-RadP1379-250ML
Analisi della banda con Quantity One versione 4.6.3.softwareBio-Rad
Inibitore della fosfatasi all'1% coctailSigma-Aldrich, Saint Louis, Missouri, USA
strong>Anticorpi
mTOR (1:1.000)Cell Signaling, Danvers, Massachusetts, USA2983
Akt (1:1.000)Cell Signaling, Danvers9272
Secondario anti-coniglio e anti-topo HRP-linked (1:10.000)Cell Signaling, Danvers
Citrate Sintasi (CS) (1:1.000)Gene tex, San Antonio, California, USA
OXPHOS (1:1.000)Abcam, Cambridge, UK
strong>Equipment - Analisi di campioni muscolari
Bullet Blender 1.5 per omogeneizzazioneNext Advance, New York, USA
Lettore di lastreTecan infinite F200 pro, Mä nnedorf, Svizzera
Istochimica
Mayer ematossilinaHistoLab, Vä stra Frö lunda, Svezia 1820
Olio Rosso oSigma-Aldrich, Saint Louis, Missouri, USA00625-25y
NaClSigma-Aldrich793566-2,5 kg
Cloruro di cobaltoSigma-Aldrich60818-50G
AmilasiSigma-AldrichA6255-25MG
ATPSigma-AldrichA2383-5G
GlicinaVWR-chemicals / VWR-international, Spå nga, Svezia101196X
Cloruro di calcioVWR-chemicals / VWR-international22328.262
Iso-pentanoVWR-chemicals / VWR-international24872.298
Etanol 96%VWR-chemicals / VWR-international20905.296
NaOHMERCK, Stoccolma, Svezia1.06498.1000
Na acetatoMERCK1.06268.1000
KClMERCK1.04936.1000
Solfuro di ammonioMERCKU1507042828
Acido acetico 100%MERCK1.00063.2511
Schiffs´ ReagenteMERCK1.09033.0500
Acido periodicoMERCK1.00524.0025
CloroformioMERCK1.02445.1000
pH-metro LANGEHACH LANGE GMBH, Düsseldorf, Germania
Microscopio otticoOlympus BH-2, Olympus, Tokyo, Giappone
Criostato  Leica CM1950Leica Microsystems, Wetzlar, Germania
Software Leica Leica Qwin V3Leica Microsystems
Gel Doc 2000 - Bio-Rad, configurazione della fotocameraBio-Rad Laboratories AB, Solna, Svezia 
Programma software Quantift One - 4.6 (versione 4.6.3; Bio Rad)Bio-Rad Laboratories AB, Solna, Svezia
Test di tolleranza orale al glucosio, OGTT
Glukos APL 75 gAPL, Stoccolma, Svezia323.188
Analizzatore automatico Biosen 5140EKF Diagnostics, Barleben, Germania
Kit di insulina e peptide C nel plasma ELISAMercodia AB, Uppsala Svezia10-1132-01, 10-1134-01
Piastra lettoreTecan infinite F200 pro, Mä nnedorf, Svizzera
Altre attrezzature
Misure di massa magraFFM-Tanita T5896, Tanita, Tokyo, Giappone
Attrezzature per l'allenamento della forza per tutti gli esercizi di allenamentoCybex International Inc., Medway, Massachusetts, USA 
Cicloergometro Monark Ergometro 893E, Monark Exercises, Varberg, Svezia
Cardiofrequenzimetro RS800, PolarPolar Electro OY, Kampele, Finlandia
Oxycin-Pro - dispositivo ergo-spirometrico automaticoErich Jaeger GmbH, Hoechberg, Germania
Dinamometro isocinetico, Isomed 2000, forza muscolare del ginocchioD& R Ferstl GmbH, Henau, Germania
Sistema di acquisizione dati CED 1401 e software di segnaleCambridge Electronic Design, Cambridge, Regno Unito
Software per l'analisi della forza muscolare, Spike 2, versione 7Signal Hound, LA Center, WA, USA
Software statistico per analisi statisticheStatistica, Stat soft. inc, Tulsa, Oklahoma, USA
Apparecchiatura per biopsia muscolare
Concotomo di Weil BlakesleyWisex, Mö lndal, Svezia
Anestesia locale Carbocaina, 20 mL, 20 mg/mL; Astra Zeneca, Sö dertä lje, Svezia169.367
lama chirurgicaCO, LTD, Osaka, Giappone 
Kit di analisi delle proteine <<Rasoio di sicurezza a11048030

Riferimenti

  1. Carrick-Ranson, G., et al. The effect of age-related differences in body size and composition on cardiovascular determinants of VO2max. J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 68 (5), 608-616 (2013).
  2. Peterson, C. M., Johannsen, D. L., Ravussin, E. Skeletal muscle mitochondria and aging: a review. J. Aging. 2012, 194821(2012).
  3. Russell, A. P., Foletta, V. C., Snow, R. J., Wadley, G. D. Skeletal muscle mitochondria: a major player in exercise, health and disease. Biochim. Biophys. Acta. 1840 (4), 1276-1284 (2014).
  4. Conley, K. E., Jubrias, S. A., Esselman, P. C. Oxidative capacity and ageing in human muscle. J. Physiol. 526 (Pt 1), 203-210 (2000).
  5. Holloszy, J. O. Adaptation of skeletal muscle to endurance exercise. Med. Sci. Sports. 7 (3), 155-164 (1975).
  6. Menshikova, E. V., Ritov, V. B., Fairfull, L., Ferrell, R. E., Kelley, D. E., Goodpaster, B. H. Effects of exercise on mitochondrial content and function in aging human skeletal muscle. J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 61 (6), 534-540 (2006).
  7. Balakrishnan, V. S., et al. Resistance training increases muscle mitochondrial biogenesis in patients with chronic kidney disease. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 5 (6), 996-1002 (2010).
  8. Ferrara, C. M., Goldberg, A. P., Ortmeyer, H. K., Ryan, A. S. Effects of aerobic and resistive exercise training on glucose disposal and skeletal muscle metabolism in older men. J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 61 (5), 480-487 (2006).
  9. Frontera, W. R., Meredith, C. N., O'Reilly, K. P., Evans, W. J. Strength training and determinants of VO2max in older men. J. Appl. Physiol. (1985). 68 (1), 329-333 (1990).
  10. Toth, M. J., Miller, M. S., Ward, K. A., Ades, P. A. Skeletal muscle mitochondrial density, gene expression, and enzyme activities in human heart failure: minimal effects of the disease and resistance training. J. Appl. Physiol. (1985). 112 (11), 1864-1874 (2012).
  11. Zachwieja, J. J., Toffolo, G., Cobelli, C., Bier, D. M., Yarasheski, K. E. Resistance exercise and growth hormone administration in older men: effects on insulin sensitivity and secretion during a stable-label intravenous glucose tolerance test. Metabolism. 45 (2), 254-260 (1996).
  12. Davidson, L. E., et al. Effects of exercise modality on insulin resistance and functional limitation in older adults: a randomized controlled trial. Arch. Intern. Med. 169 (2), 122-131 (2009).
  13. DeFronzo, R. A., Tobin, J. D., Andres, R. Glucose clamp technique: a method for quantifying insulin secretion and resistance. Am. J. Physiol. 237 (3), E214-E223 (1979).
  14. Åstrand, P. O., Ryhming, I. A nomogram for calculation of aerobic capacity (physical fitness) from pulse rate during sub-maximal work. J. Appl. Physiol. 7 (2), 218-221 (1954).
  15. Björkman, F., Ekblom-Bak, E., Ekblom, Ö, Ekblom, B. Validity of the revised Ekblom Bak cycle ergometer test in adults. Eur. J. Appl. Physiol. 116 (9), 1627-1638 (2016).
  16. Seger, J. H., Westing, S. H., Hanson, M., Karlson, E., Ekblom, B. A new dynamometer measuring eccentric and eccentric muscle strength in accelerated, decelerated and isokinetic movements: validity and reproducibility. Eur. J. Appl. Physiol. 57 (5), 526-530 (1988).
  17. Westing, S. H., Seger, J. Y., Karlson, E., Ekblom, B. Eccentric and concentric torque-velocity characteristics of the quadriceps femoris in man. Eur. J. Appl. Physiol. 58 (1-2), 100-104 (1988).
  18. Aagaard, P., Simonsen, E. B., Andersen, J. L., Magnusson, P., Dyhre-Poulsen, P. Increased rate of force development and neural drive of human skeletal muscle following resistance training. J. Appl. Physiol. 93 (4), 1318-1326 (2002).
  19. Andersen, L. L., Aagaard, P. Influence of maximal muscle strength and intrinsic muscle contractile properties on contractile rate of force development. Eur. J. Appl. Physiol. 96 (1), 46-52 (2006).
  20. Henriksson, K. G. "Semi-open" muscle biopsy technique. A simple outpatient procedure. Acta Neurol. Scand. 59 (6), 317-323 (1979).
  21. Matsuda, M., DeFronzo, R. A. Insulin sensitivity indices obtained from oral glucose tolerance testing: comparison with the euglycemic insulin clamp. Diabetes Care. 22 (9), 1462-1470 (1999).
  22. American Diabetes, Association. Diagnosis and classification of diabetes mellitus. Diabetes Care. 28, Suppl 1. S37-S42 (2005).
  23. Moberg, M., Apró, W., Ekblom, B., van Hall, G., Holmberg, H. C., Blomstrand, E. Activation of mTORC1 by leucine is potentiated by branched-chain amino acids and even more so by essential amino acids following resistance exercise. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 310 (11), C874-C884 (2016).
  24. Antharavally, B. S., Carter, B., Bell, P. A., Krishna Mallia,, A, A high-affinity reversible protein stain for Western blots. Anal. Biochem. 329 (2), 276-280 (2004).
  25. Brooke, M. H., Kaiser KK, Muscle fiber types: how many and what kind? Arch. Neurol. 23 (4), 369-379 (1970).
  26. Brooke, M. H., Kaiser, K. K. Three "myosin adenosine triphosphatase" systems: the nature of their pH lability and sulfhydryl dependence. J. Histochem. Cytochem. 18 (9), 670-672 (1970).
  27. Andersen, P. Capillary density in skeletal muscle of man. Acta Physiol. Scand. 95 (2), 203-205 (1975).
  28. Frank, P., Andersson, E., Pontén, M., Ekblom, B., Ekblom, M., Sahlin, K. Strength training improves muscle aerobic capacity and glucose tolerance in elderly. Scand. J. Med. Sci. Sports. 26 (7), 764-773 (2016).
  29. Blomstrand, E., Celsing, F., Fridén, J., Ekblom, B. How to calculate human muscle fibre areas in biopsy samples--methodological considerations. Acta Physiol. Scand. 122 (4), 545-551 (1984).
  30. Cuthbertson, D., et al. Anabolic signaling deficits underlie amino acid resistance of wasting, aging muscle. FASEB J. 19 (3), 422-424 (2005).
  31. Vincent, K. R., Braith, R. W., Feldman, R. A., Kallas, H. E., Lowenthal, D. T. Improved cardiorespiratory endurance following 6 months of resistance exercise in elderly men and women. Arch. Intern. Med. 162 (6), 673-678 (2002).
  32. Cadore, E. L., et al. Effects of strength, endurance, and concurrent training on aerobic power and dynamic neuromuscular economy in elderly men. J. Strength Cond. Res. 25 (3), 758-766 (2011).
  33. Jubrias, S. A., Esselman, P. C., Price, L. B., Cress, M. E., Conley, K. E. Large energetic adaptations of elderly muscle to resistance and endurance training. J. Appl. Physiol. (1985). 90 (5), 1663-1670 (1985).
  34. Benton, C. R., Wright, D. C., Bonen, A. PGC-1alpha-mediated regulation of gene expression and metabolism: implications for nutrition and exercise prescriptions. Appl. Physiol. Nutr. Metab. 33 (5), 843-862 (2008).

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