Abbiamo standardizzato una biopsia del tessuto adiposo addominale utilizzando un metodo non-diatermia eseguito in anestesia locale. Tre casi di eccessivo post-operazione sanguinamento fuori 115 operazioni (2,61%) si è verificato. Concludiamo che una biopsia chirurgica di tessuto adiposo addominale utilizzando un metodo non-diatermia può essere tranquillamente applicata agli uomini sani.
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Articolo metodologico
Una tecnica per la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo addominale tramite un metodo Non-diatermia
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Le biopsie del tessuto adiposo di offrire campioni di tessuto che, al momento dell'analisi, possono fornire panoramiche penetranti dei meccanismi relativi al metabolismo e malattia. Per ottenere le biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo nella zona addominale, i ricercatori e i medici utilizzano un chirurgica o una tecnica basata su ago. Tuttavia, le biopsie grasse sottocutanee chirurgiche in grado di offrire campioni di tessuto che possono fornire una panoramica più completa delle complessità di indici biologici nel tessuto adiposo bianco. Di solito, una biopsia chirurgica del tessuto adiposo comprende un trattamento di diatermia per cauterizzatori vasi sanguigni prevenire il sanguinamento eccessivo. Tuttavia, sono stati segnalati effetti collaterali, come il flash si attiva e le lesioni cutanee nel tessuto, dopo la diatermia. Di conseguenza, abbiamo mirato a standardizzare una biopsia del tessuto adiposo addominale chirurgica eseguita in anestesia locale utilizzando un metodo non-diatermia. Abbiamo condotto 115 biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo in uomini in buona salute usando un metodo non-diatermia addominale biopsia chirurgica. I nostri risultati hanno mostrato tre casi di eccessivo post-operazione sanguinamento fuori 115 operazioni (2,61%). In conclusione, il nostro biopsia chirurgica standardizzata del tessuto adiposo sottocutaneo addominale utilizzando un metodo non-diatermia può applicarsi sicuro per uomini sani al capezzale, con effetti collaterali minimi.
Introduzione
Le biopsie del tessuto adiposo di offrire campioni di tessuto che, al momento dell'analisi, possono fornire una panoramica penetrante dei meccanismi relativi al metabolismo e malattia. Per esempio, essi sono utilizzati per seno cancro tumore identificazione1, acido grasso composizione esame2e ricerca sulle malattie metaboliche ed ormonali importanti vie3. Per ottenere le biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo nella zona addominale, i ricercatori e i medici utilizzano un chirurgica o una tecnica basata su ago. Tuttavia, le biopsie grasse sottocutanee chirurgiche in grado di offrire campioni di tessuto che possono fornire una panoramica più completa dei complessi meccanismi biologici [ad es., espressione dell'acido ribonucleico (mRNA) di messenger, l'analisi istologica, ecc.]4 . Essi sono stati utilizzati in precedenza in adulti sani4 e possono essere effettuate sicuro al comodino5.
La tecnica basata su ago biopsia richiede intensa liposuzione che può distruggere l'integrità del tessuto, e di solito recupera una piccola quantità di tessuto (100-500 mg)6. Questi campioni di tessuto possono non essere appropriati per studi di ricerca complessa. Inoltre, rispetto alla tecnica basata su ago, biopsie grasse sottocutanee chirurgiche possono offrire campioni di tessuto che possono disegnare un quadro più completo di parecchi indici infiammatori (per esempio, B - e T-cell signaling); regolazione del citoscheletro; vie cellulari; vie metaboliche di lipidi, carboidrati e aminoacidi; e vie di fosforilazione ossidativa4. Inoltre, la tecnica basata su ago include un elevato rischio per contaminazione delle cellule del sangue che chirurgico one4, fornendo poche informazioni sulle regioni fibrotiche del tessuto4,7,8 .
Di solito, una biopsia chirurgica del tessuto adiposo comprende un trattamento di diatermia per cauterizzazione vasi sanguigni per evitare eccessivo sanguinamento9. Una diatermia è anche utilizzato per bruciare e distruggere i tessuti colpiti da neoplasie e verruche o tessuti che sono infettati da malattia9. Questa tecnica è particolarmente applicabile in neurochirurgia e occhio chirurgia9.
L'uso eccessivo della diatermia può portare alla formazione di tessuto necrotico, che causano infezioni e ritardando il processo curativo10. Infatti, sono stati segnalati effetti collaterali quali flash scatta e lesioni cutanee nel tessuto seguito diatermia9. Inoltre, sono state sollevate preoccupazioni circa la tossicità dei fumi chirurgici rilasciata dalla diatermia l'ambiente della chirurgia, che può essere inalata dal partecipante/paziente e il personale operativo9. Infatti, l'uso della diatermia può causare la tossicità di aria in sala operatoria pari a quella prodotta dai fumatori sigarette sei11 e, anche se sale operatorie in genere hanno buona ventilazione sistemi, la contaminazione può durare per almeno 20 min12 . Tuttavia, in pazienti di intraprendere un intervento chirurgico di tonsillectomia, il metodo di diatermia ha mostrato meno, ma non significativo dolore post-operatorio13 e spurgo14 rispetto al metodo di emostasi di legatura classico. Nel complesso, la prova per quanto riguarda le differenze nel dolore post-operatorio e sanguinamento tariffe dopo le biopsie di tessuto adiposo in individui in buona salute a malapena esiste. Data la mancanza di prove e gli effetti collaterali di diatermia, è opportuna una standardizzazione di un metodo non-diatermia per biopsia del tessuto adiposo. Di conseguenza, lo scopo di questo studio era di standardizzare una tecnica chirurgica per la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo addominale, eseguita in anestesia locale utilizzando un metodo non-diatermia in uomini in buona salute. Inoltre, abbiamo delineare le procedure per la raccolta di tessuto per determinare l'espressione di mRNA e concentrazione nella proteina e per eseguire analisi istologiche.
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Protocollo
lo studio conformi agli standard stabiliti dalla dichiarazione di Helsinki ed è stato approvato dall'Università della Tessaglia, dipartimento di scienze motorie, Βiοethics Comitato.
1. preparazione della chirurgia attrezzature e consumabili
- posizionare un campo chirurgico disinfettato su un basamento di Mayo chirurgico 4 ruote.
- Posizionare i seguenti materiali di consumo e apparecchiature chirurgiche su un basamento di Mayo chirurgico 4 ruote:
Un paio di Forbici rette operative (15cm)
un bisturi (n. 11)
manico per uno bisturi
un paio di forbici curve (14 cm)
forcipe una zanzara
un paio di pinzette Kocher
una pinzetta chirurgica
Povidone-iodio (su una sterile garza)
una sutura (4.0)
un paio di Forbici rette (11 cm)
un ago titolare (15cm)
cinque garze sterili
una garza sterile adesivo
una siringa 10 mL con un ago disinfettato
10 mL di lidocaina 2% (senza adrenalina)
uno paio di guanti chirurgici disinfettati - i seguenti materiali di posizione su un banco separato:
due provette per microcentrifuga
una provetta contenente 5 mL di formalina al 10%
un piccolo contenitore contenente 50-100 mL di azoto liquido a-190 ° C.
2. La preparazione dei partecipanti
- chiedere ai partecipanti di seguire un veloce 8 h 15 prima della procedura di biopsia.
- Avere partecipanti astenersi da esercizio fisico, stress eccessivo, alcool e attivo e fumo passivo 72 h prima la biopsia 16 , 17.
3. Eseguire la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo
- posizionare il partecipante sul letto chirurgico in posizione supina.
- Disinfettare la regione dell'incisione con povidone-iodio.
- Iniettare 10 mL di lidocaina 2% (senza adrenalina) lentamente e costantemente 18 nella regione selezionata per servire come anestesia locale.
- Posizionare un campo chirurgico sterile sull'area per coprire il corpo del partecipante, escluse la regione dell'incisione.
- Almeno 3-5 min in seguito, applicare pressione con un paio di pinzette per l'area di anestesia locale e chiedere il partecipante se si sente alcun dolore 19 per garantire che l'anestesia locale è stato raggiunto.
- Allegare il bisturi n. 11 al manico bisturi.
- Creare un'incisione di 2-2.5 cm di lunghezza, 3-5 cm a sinistra o destra dell'ombelico.
- Rimuovere il tessuto sottocutaneo con un paio di cm 15 dritti forbici di funzionamento.
- Una volta che il tessuto adiposo viene rivelato, catturarlo con un paio di pinzette e un paio di forbici curve 14 cm.
- Tagliare e rimuovere circa 1 g di tessuto adiposo.
- a seguito di rimozione del tessuto, posizionare garze sterili sopra l'incisione per ottenere l'emostasi.
- Quando l'emostasi è confermato, catturare la sutura 4.0 con un ago di 14 cm e la pelle con un paio di pinzette chirurgiche fino a rendere visibile il tessuto sottocutaneo.
- Inserire l'ago di sutura nella pelle, in movimento verso il tessuto sottocutaneo mentre la pelle e sottocutaneo sono strettamente allineati.
- Con l'ago di sutura, seguire una tecnica continua a zig-zag nel tessuto sottocutaneo fino a guidato esternamente fuori la pelle. Continuare fino a quando l'incisione cutanea è chiuso.
- Esternamente legare la sutura.
- Pulire la zona dell'incisione con soluzione salina e coprirlo con una garza sterile adesiva.
4. Deposizione del tessuto
- separare il tessuto adiposo raccolto in tre pezzi: 150, 350 e 500 mg.
- Situare i 150 e 350 mg di tessuto campione di microcentrifuga.
- Microcentrifuga immergere i due nel piccolo contenitore con l'azoto liquido a-190 ° C fino a deposizione finale in un congelatore a -80 ° C.
Nota: In anticipo, usi un ago sterile per perforare un piccolo foro nei tubi del microcentrifuge per evitare il fallimento di Coppa durante l'immersione delle provette microcentrifuga nell'azoto liquido a -190 ° C. - Immergere il pezzo di 500 mg di campione tessuto-da utilizzare per l'analisi istologica-in una provetta contenente 5 mL di formalina al 10%.
Nota: Utilizzare il forcipe di zanzara solo in caso di eccessivo sanguinamento durante l'intervento chirurgico. In tali casi, catturare la nave con il forcipe di zanzara per legare e chiudere fino a quando emostasi.
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Risultati
Le caratteristiche dei partecipanti sono fornite nella tabella 1. I punti di sutura nella zona dell'incisione è caduto entro i prossimi 8-12 giorni. Abbiamo completato un totale di 115 biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo, utilizzando il metodo di non-diatermia biopsia chirurgica addominale in uomini adulti sani (età: 35,2 ± 6,9 anni; indice di massa corporea: 27,3 ± 4.4; e percentuale di grasso corporeo: 27,0 ± 9,0%). Eccessivo sanguinamento post-biopsia è stato osser...
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Discussione
Lo scopo di questo studio era di standardizzare una tecnica chirurgica per la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo addominale, eseguita in anestesia locale con un metodo non-diatermia in uomini in buona salute. Diatermia è comunemente usato in sala operatoria; Tuttavia, possono verificarsi ritardi nella guarigione10 e possibili effetti collaterali (cioè, flash scatta e tossicità ambientale)9 . Questi effetti indesiderati di diatermia possono generare rischi per...
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere nessun concorrenti interessi finanziari.
Ringraziamenti
Questo lavoro ha ricevuto finanziamenti da Orizzonte 2020 (concessione contratto n. 645710) 7th Framework e dell'Unione europea (grant accordi n. 612547 e 319010) programmi. Gli autori desiderano ringraziare il Dr. Fotini Sourli-Chasioti per l'assistenza con la procedura di biopsia. Gli autori ringraziano anche Mr. Yiorgos Paterakis per il suo prezioso aiuto nella preparazione del video.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Campo chirurgico disinfettato | Hartmann | 23516-00 | |
| Supporti per strumenti in acciaio inossidabile (Mayo chirurgico) | Deposito di dispositivi medici Inc. | 32000 | |
| Forbici operative diritte 15 cm | Karl Storz | 791903 | |
| bisturi n. 11 | Swann-Morton | 203 | Bipolare, numero di catalogo 429011 |
| Scarpel manico No 3 | Karl Storz | 488090 | |
| Forbici curve 14 cm | Karl Storz | 511514, 752918 | |
| Pinze per zanzare | Karl Storz | 535012 | |
| Pinzette Kocher | Karl Storz | 530416 | Bipolare, numero di catalogo 830316 |
| Pinzette chirurgiche | Karl Storz | 793216 | Bipolare, numero di catalogo 831016 |
| Povidone-iodio | Varie | Non applicabile | |
| Sutura 4.0 Vicryl | Johnsons | V4970H | |
| Forbici dritte 11 cm | Karl Storz | 512511 DS | |
| Porta aghi 15 cm | Karl Storz | 515515 | Bipolare, numero di catalogo 213015 |
| Garze sterili | Hartmann | 3021 | |
| Α garza sterile adesiva | Digas medical equipment | 2889 | |
| Siringa da 10 ml con ago disinfettato | Alpha medical solutions | 10310-55-0010 | |
| 2%-xilocaina (senza adrenalina) | Vari | Non applicabile | |
| Guanti chirurgici sterili | Sempermed | 10001 | |
| Eppendorf tubi | Kartell | 16283 | |
| 10% formalina | Alpha medical solutions | 11016-30-2909 | |
| Provette 120 mL | Apparecchiature mediche Digas | 9025 | |
| Azoto liquido a -190° C | Revival | Non applicabile |
Riferimenti
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