Articolo metodologico

Un metodo per testare l'efficacia della lavata a mano per la rimozione di nuovi patogeni infettivi

DOI:

10.3791/55604

⸱

7 giugno 2017

 , 
1Department of Civil and Environmental Engineering, Tufts University

In questo articolo

Sommario

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La lavata a mano è ampiamente raccomandata per prevenire la trasmissione delle malattie infettive. Tuttavia, non vi è alcuna prova su cui i metodi di lavaggio della mano sono più efficaci nella rimozione di patogeni delle malattie infettive. Abbiamo sviluppato un metodo per valutare l'efficacia dei metodi di lavaggio a mano alla rimozione dei microrganismi.

Abstract

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La lavata a mano è ampiamente raccomandata per prevenire la trasmissione delle malattie infettive. Tuttavia, esistono scarse prove comparabili sull'efficacia dei metodi di lavaggio a mano in generale. Inoltre, esistono poche prove che consentono di confrontare i metodi di lavaggio a mano per determinare quali sono i più efficaci per la rimozione di patogeni infettivi. È necessaria la ricerca per fornire prove sui diversi approcci di lavaggio a mano che possono essere utilizzati durante i focolai di malattie infettive. Qui viene descritto un metodo di laboratorio per valutare l'efficacia dei metodi di lavaggio a mano per rimuovere i microrganismi dalle mani e la loro persistenza nell'acqua di risciacquo. Le mani dei volontari sono dapprima forate con l'organismo di prova e poi lavate con ogni metodo di lavaggio a mano d'interesse. In generale, i microrganismi surrogati vengono utilizzati per proteggere i soggetti umani dalla malattia. Il numero di organismi che rimangono sulle mani dei volontari dopo il lavaggio viene testato utilizzando un metodo "succo di guanti" modificato: le mani vengono collocate in guanti con un eluE vengono sciacquati per sospendere i microrganismi e renderli disponibili per l'analisi mediante filtrazione a membrana (batteri) o test di placca (virus / batteriofagi). L'acqua di risciacquo prodotta dalla lavata a mano viene direttamente raccolta per l'analisi. L'efficacia del lavaggio manuale viene quantificata confrontando il valore di riduzione del log tra i campioni prelevati dopo lavaggio a campioni senza lavaggio a mano. La persistenza della risciacquatura dell'acqua è quantificata confrontando i campioni di acqua di risciacquo da vari metodi di lavaggio a mano a campioni prelevati dopo lavaggio a mano con acqua sufficiente. Mentre questo metodo è limitato dalla necessità di utilizzare organismi surrogati per preservare la sicurezza dei volontari umani, raccoglie aspetti di lavaggio a mano che sono difficili da replicare in uno studio in vitro e riempie le lacune di ricerca sull'efficacia della lavaggio e la persistenza degli organismi infettivi in ​​risciacquo acqua.

Introduzione

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La lavata a mano è ampiamente raccomandata per prevenire la diffusione delle malattie, in particolare quelle trasmesse dalla via fecale-orale o aerea, comprese le malattie diarrea e respiratoria 1 . Sorprendentemente, non vi è alcuna prova comparabile sull'efficacia dei metodi di lavaggio a mano, come la lavaggio a mano con sapone e acqua (HWWS) e con il liquido sanitario a base di alcol (ABHS), sulla rimozione di organismi dalle mani. La ricerca iniziale ha scoperto che l'azione meccanica della lavaggio a mano, al contrario del metodo di lavaggio a mano, può rappresentare la maggior parte delle rimozioni dell'organismo

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Protocollo

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Dichiarazione di etica: Lo studio qui descritto (su Phi6 ed E. coli come surrogati per Ebola) è stato approvato dal consiglio di revisione istituzionale presso Tufts Medical Center e Tufts University Health Sciences Campus (# 12018); L'Università di Harvard ha ceduto la revisione al consiglio di revisione istituzionale di Tufts.

NOTA: Prima di iniziare questo protocollo, è necessario completare due passaggi. In primo luogo, deve essere identificata e selezionata una versione surrogata o non infettiva del livello 1 di biosicurezza (BSL-1) del patogeno da studiare e sicuro da usare sui soggetti umani. Per questo protocollo è necess....

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Risultati

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Qui, il protocollo ( Figura 1 ) è stato completato con 18 volontari, che sono stati testati sia con E. coli che Phi6. Differenze significative sono state riscontrate tra i risultati di lavaggio a mano con E. coli sia con e senza carico del suolo e Phi6 con carico del suolo ( Figura 2 e Figura 3 ). Per E. coli senza carico del suolo, la lavata a mano con HTH, NaDCC e NaOCl .......

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Discussione

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Il metodo qui descritto fornisce un approccio per testare l'efficacia del lavaggio delle mani in un ambiente di laboratorio controllato. Questo metodo evidenzia l'uso di volontari umani e organismi surrogati non infettivi. Utilizzando il metodo, è stato possibile dimostrare le differenze in: 1) l'efficacia dei metodi di lavaggio delle mani e 2) la persistenza dell'organismo nell'acqua di risciacquo. Lo scopo della presentazione di questo protocollo è quello di fornire un quadro generale che possa essere adattato per test.......

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Dichiarazioni

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Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

Ringraziamenti

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Questo lavoro è stato sostenuto dall'Agenzia degli Stati Uniti per lo Sviluppo Internazionale, Ufficio di Assistenza Estera Del Disastro (AID-OFDA-A-15-00026). Marlene Wolfe è stata sostenuta dalla National Science Foundation (sovvenzione 0966093).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
SaponettaDoveWhite Beauty Sapone
per le mani a base di alcolPurellAdvanced Instant Hand Sanitizer con alcool
HTH in polvereAcros Organics300340010
NaDCC in polvereMedentechKlorsept granuli
NaOCl SolutionAcros Organics419550010
ElettrocloratoreAquaChlor
Titolatore iodometricoHach1690001
Albumina sierica bovinaMP BiomedicalsNC0117242
TriptoneFisherBP1421-100
Mucina bovinaEMD Milipore49-964-3500MG
0,22 &; m FilterEMD MiliporeGVWP04700
NaClFisherBP358-1
Sonda pH cutaneaHanna InstrumentsH199181
Sacca per campioni Whirlpak grande Sacca per campioni WhirlpakNascoB01447WA
Small BottigliaNascoB01323WA
ThermoScientific3120850001È possibile praticare un foro di dimensioni adeguate nel coperchio di una bottiglia per formare un imbuto che erogherà l'acqua alla portata appropriata
EtanoloThermoScientific615090010Mescolare con acqua per produrre etanolo al 70%
Flacone sprayQorpakPLC06934
E. coliATCC25922
LB BrodoFisher BioReagentiBP1426-2
LB AgarFisher BioReagentsBP1425-500
Anello sterileGlobe Scientific22-170-204
Phi6HER102
Brodo nutrienteBD DifcoBD 247110
Spettrofotometro GeneQuant 100General Electric28-9182-04
Tiosolfato di sodioFisher ChemicalS445-3
Filtro a membrana (47 mm, 0,45 & micro; m)EMD MilliporeHAWP04700
m-ColiBlue24 brodo mediaEMD MilliporeM00PMCB24
Petri piatto con tampone (47 mm)Fisherbrand09-720-500
Collettore per vuotoThermo Scientific/Nalgene09-752-5
Imbuti filtrantiThermo Scientific/Nalgene09-747
Pseudomonas syringaeHER1102
Soluzione salina termoscientifica tamponata con fosfato10010031può anche essere miscelato da composti di origine secondo qualsiasi ricetta di base
Saponeetilico al 70% a imbuto

Riferimenti

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kampf, G., Kramer, A. Epidemiologic Background of Hand Hygiene and Evaluation of the Most Important Agents for Scrubs and Rubs. Clin Microbiol Rev. 17 (4), 863-893 (2004).
  2. Miller, T., Patrick, D., Ormrod, D. Hand decontamination: influence of common variables on hand-wa....

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