Qui presentiamo la preparazione di un decotto er-xiano (EXD) in quattro fasi - immersione, decotto, filtrazione e concentrazione - e dimostrare la somministrazione di un siero preparato con EXD ai ratti. Questi metodi sono applicabili allo studio in vivo e in vitro di decotti a base di erbe come i medicinali cinesi tradizionali.
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Articolo metodologico
Preparazione della medicina a base di erbe: Eruzione di Er-Xian e Serum contenente Er-Xian per
In questo articolo
Sommario
Abstract
La medicina tradizionale a base di erbe, una medicina alternativa nell'ambiente clinico, ha ricevuto un'attenzione maggiore negli ultimi anni. Prima della consegna al corpo, è necessaria una procedura di estrazione aggiuntiva per liberare i costituenti attivi dalle erbe grezze. La decozione dell'acqua è una procedura di estrazione classica che è ancora ampiamente utilizzata nelle impostazioni cliniche. Qui proponiamo un protocollo dettagliato per la decotto er-xian (EXD) per applicare decotti a base di erbe a studi sperimentali. Viene descritto il calcolo di una dose appropriata per l'animale, nonché le quattro fasi principali di EXD: l'ammollo, la decozione dell'acqua, la filtrazione e la concentrazione. Inoltre, EXD contenente siero viene introdotto nei ratti come mezzo di convalida in vitro . Qui, i ratti sono stati somministrati per via orale con EXD per tre giorni. I campioni di sangue sono stati raccolti, inattivati, centrifugati e filtrati. Il siero, diluito con il mezzo di coltura, può essere utilizzato per trattare cellule o tessuti in vItro. Ad esempio, EXD è stato applicato sia agli studi in vivo che in vitro e ha dimostrato che EXD migliora l'osteogenesi. Questo protocollo può essere utilizzato come riferimento per la preparazione e l'applicazione di medicinali a base di erbe.
Introduzione
L'interesse per lo studio e l'applicazione della medicina tradizionale a base di erbe sta crescendo. Al contrario di farmaci moderni, in cui gli ingredienti chimici sono definiti, le formule a base di erbe hanno alcuni ingredienti sconosciuti e richiedono processi di estrazione per consentire la consegna dei loro composti attivi. Anche se molti studi cercano di selezionare un piccolo composto con una struttura ben nota come rappresentante dell'intera erba o di formula a base di erbe, né le efficienze farmacologiche né i meccanismi possono essere considerati equivalenti 1 , 2 . Mentre l'impront....
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Protocollo
Il protocollo segue le linee guida per la cura degli animali dell'Università di Medicina tradizionale cinese di Shanghai ed è approvato dall'esperimento animale Comitato di etica degli animali di Shanghai.
1. Protocollo I: preparazione di EXD
- Calcolo
- Amministrare l'EXD ad un gruppo di trattamento di 10 minicenne femminile (CNR) (0.02 kg / mouse), 5 giorni alla settimana per 12 settimane.
NOTA: sono necessari complessivamente 1.702 EXD. Poiché gli EXD sono misurati in incrementi discreti, in pratica reale, amministrare 2 EXDs. - Calcolare il volume di EXD applicato per mouse (....
- Amministrare l'EXD ad un gruppo di trattamento di 10 minicenne femminile (CNR) (0.02 kg / mouse), 5 giorni alla settimana per 12 settimane.
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Risultati
L'effetto di EXD sulla densità ossea dei topi OVX
La colorazione ematossilina e eosinica (H & E) della sezione vertebra lombare mostra una maggiore trabecola ossea dopo il trattamento EXD in vivo ( Figura 1A , pannello destro) rispetto a quelli del gruppo OVX ( Figura 1A , pannello a sinistra). Figura 1B mostra le immagini μCT rappresentative del 4 ° l.......
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Discussione
Negli ultimi anni, più attenzione è stata prestata alle medicine a base di erbe, un tipo di medicina alternativa che è stato applicato nel contesto clinico nel mondo orientale per migliaia di anni. Diverso dal modello "banco a letto" della medicina moderna, la medicina tradizionale a base di erbe richiede innanzitutto il modello "letto a panca" per spiegare i propri meccanismi. Ciò può essere seguito dalla convalida eseguita in fase di panificazione e di elaborazione per lo sviluppo di nuovi farmaci .......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Science Foundation della Cina (81573992). Ringraziamo Emily K. Lo e Kathleen DiNapoli per la loro assistenza per la modifica del linguaggio.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Curculigo orchioides Gaertn (9 g), Herbaa Epimedii (9 g), Radix Morindae Officinalis (9 g), Radix Angelicae Sinensis (9 g), Cortex Phellodendri (6 g), e Rhizoma Anemarrhenae (6 g) | Kang-qiao Chinese Medicine Yinpian Co. Ltd (Shanghai, CN) | 160922 | componenti EXD Carta |
| da filtro | GElifesciences | 99-103-952 | Filtro decotto EXD prima della concentrazione |
| Imprinting Control Region (ICR) topi | Shanghai Laboratory Animal Center | SCXK 2007-0005 | Studio in vivo |
| ratti Sprague Dawley | Shanghai Laboratory Animal Center | SCXK 2007-0005 | Preparato di siero contenente EXD |
| Filtro per siringa | Millipore | SLGP033RB | 0,22 &; m |
| aghi gavage (10 ml) | Shanghai BO Ge commercio ufficio vendite | 59104274 | Amministrazione di EXD |
| Ketamina (80 mg/kg) | Fujian Gutian Pharma Co. Ltd | H35020148 | Anestesia |
| Xilazina (10 mg/kg) | Sunway Pharma Co. Ltd | CB07591 | Anestesia |
| Dulbecco' s modifica di Eagle' s medium Dulbecco (DMEM) terreno di coltura | Gibco | 12800-116 | DMEM con 2 mM di L-glutammina e senza ribonucleosidi e ribonucleotidi |
| Streptomicina | Sigma | 1277 | 100 &; g / ml |
| Penicillina | Sigma | 4687 | 100 µ g / ml |
Riferimenti
- Zhang, L. G., Ouyang, X. W., Wu, T. T., Ni, L. J., Shi, W. Z. Quantitative evaluation of in vitro effects and interactions of active fractions in a Chinese medicinal formula (Yaotongning Capsule) on rat chondrocytes. J Ethnopharmacol. 155 (3), 1424-1432 (2014).
- Ogawa, Y., Fujii, Y., Sugiyama, R., Konishi, T.
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Ristampe e permessi
