Questo manoscritto descrive l'utilità dell'ultrasuono eseguito su ratti femminili di progettare modelli sperimentali per ricerca riproduttiva e ginecologica. Una spiegazione dettagliata di come eseguire la valutazione ecografica è mostrata.
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Articolo metodologico
Ecografia in indagini sperimentali riproduttive sui ratti
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Con lo sviluppo della tecnologia riproduttiva aiutata e i limiti etici della ricerca sugli esseri umani, modelli animali ratto sono stati ampiamente utilizzati in medicina riproduttiva. Nel passato, lo studio dello sviluppo del sistema riproduttivo nei roditori è stato basato su una tantum esame istologico dei tessuti asportati. Recentemente, con lo sviluppo dell'ecografia transaddominale ad alta risoluzione, l'ecografia di alta qualità ora possa essere eseguita per valutare gli organi riproduttivi dei ratti, permettendo un nuovo metodo per studiare il sistema riproduttivo. Immagini sono state ottenute utilizzando un sistema ad alta definizione ultrasonographic. Ecografia ginecologica è stata effettuata il 28 otto-settimana-vecchi ratti non gravide e 5 ratti Sprague-Dawley incinti. Descriviamo come riconoscere gli organi del sistema riproduttivo e strutture associate nelle tipiche viste durante le diverse fasi dell'estro del ciclo. Colore flusso che Doppler è stato usato per misurare il flusso sanguigno dell'arteria uterina e valutare i cambiamenti di modello del flusso di sangue uterino durante diverse fasi della gravidanza. Abbiamo dimostrato che l'esplorazione di ultrasuono è un metodo utile per la valutazione dei cambiamenti negli organi riproduttivi interni. Il suo utilizzo genera la possibilità di condurre ulteriori esperimenti, comprese le procedure mediche o chirurgiche e fornisce la possibilità di monitorare i cambiamenti ecografici agli organi interni senza sacrificare animali.
Introduzione
Modelli animali di ratto sono stati ampiamente utilizzati in medicina riproduttiva, tra cui in embrione e trapianto ovarico1,2. Tuttavia, in passato, lo studio dello sviluppo del sistema riproduttivo nei roditori è stato basato su una tantum esame istologico dei tessuti asportati e studio longitudinale delle variazioni quotidiane organo riproduttivo non è stato possibile in ratti3. Ultrasuono è stato ampiamente usato in riproduzione assistita in esseri umani da oltre 30 anni, ma questa preziosa tecnologia è stata applicata ai ratti recentemente.
Il nostro obi....
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Protocollo
Questo studio è stato effettuato in stretta conformità con le raccomandazioni della Guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio del National Institutes of Health e secondo all'arrivo (Animal Research: Reporting In Vivo esperimenti) linee guida. Il protocollo ha ricevuto una licenza per la sperimentazione animale conformi direttiva 2010/63/UE con il numero di autorizzazione A13170404 (Anexo 1). Tutti gli esperimenti sono stati effettuati in un laboratorio certificato di Unione europea seguendo le linee guida nazionali per la cura etica degli animali (SR 53/2013, direttiva UE 63/2010). Il protocollo è stato approvato dal comitato etico di esperimenti di animale ....
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Risultati
Non c'erano differenze di significative, nei diametri anteroposteriore corno uterino o nello spessore dell'endometrio, tra i due lati del corno uterino (tabella 1). Rispetto al gruppo 2, lo spessore dell'endometrio medio nel gruppo 1 era più spesse, ma non significative differenze (P > 0,05) sono state trovate fra i due gruppi (Figura 3). Tuttavia, abbiamo trovato liquido all'interno dell'utero (in 8 dei 28 ratti) vicino il ciclo di estro connesso con i cambiamenti nella mor.......
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Discussione
A causa delle modifiche procedurale e risoluzione dei problemi che è stato richiesto in questo studio, nonostante il nostro scopo di individuare tutte le fasi dell'estro ciclo in ratti facendo uso dell'ultrasuono, siamo stati in grado di trovare eventuali differenze significative. Supponiamo che queste difficoltà possono essere perché il ciclo di estro dura solo pochi giorni in ratti, a differenza del ciclo nelle donne. Siamo sicuri che tutte le misurazioni sono state fatte proprio il momento giusto per determinare event.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Questa ricerca è stata sostenuta da animale sperimentazione sezione dell'Università di Murcia e l'ostetricia e ginecologia dipartimento di Murcia Università. Ringraziamo tutti i tecnici che lavorano presso il CEIB (Centro sperimentale en Investigaciones Biomédicas), la sezione della sperimentazione animale dell'Università di Murcia, che hanno collaborato a questo progetto.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sistema di micro-imaging in vivo ad alta risoluzione Vevo3100* | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| sistema ferroviario integrato Vevo con unità di monitoraggio fisiologico. | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| MX400 Trasduttore | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo Lab Software | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| HSD: Sprague Dawley SD | Envigo, inc. | per ceppi di ratto | |
| Fornitura | |||
| CIBERTEC CA-EAC20 Sistema di carrello per anestesia | Cibertec S.A | Macchina per anestesia | |
| Ecogel 100 gel per ultrasuoni | Eco-Med Pharmaceuticals Inc. | ||
| Lozione depilatoria (Nair) | Fornitura | ||
| Isoflurano | Esteve Veterinaria | Anestesia inalatoria | |
| * Il software richiesto è il software Vevo, che include l'applicazione B-Mode, l'applicazione Doppler a onde di polso e il pacchetto di strumenti per l'analisi della deformazione vascolare. |
Riferimenti
- Hunter, R. K. II, et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10 (12), e0144823(2015).
- Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet.
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Ristampe e permessi
