Articolo metodologico
La superficie interna polmonare (ISA) è un criterio critico per valutare la morfologia polmonare e la fisiologia delle malattie polmonari e della rigenerazione alveolare indotta da lesioni. Qui descriviamo un metodo standardizzato che può ridurre al minimo la polarizzazione di misura per ISA sia nei modelli di polmonite polmonare sia nei modelli di protesi.
La morfologia polmonare, la fisiologia e le funzioni respiratorie cambiano sia in condizioni fisiologiche che patologiche. La superficie polmonare interna (ISA), che rappresenta la capacità di scambio gassoso del polmone, è un criterio critico per valutare la funzione respiratoria. Tuttavia, la distorsione dell'osservatore può influenzare in modo significativo i valori misurati per i parametri morfologici polmonari. Il protocollo che descriviamo qui minimizza le variazioni durante le misurazioni di due parametri morfologici utilizzati per il calcolo ISA: il volume polmonare interno (ILV) e l'intercetta lineare media (MLI). Utilizzando l'ISA come parametro morfometrico e funzionale per determinare l'esito della rigenerazione alveolare sia in modelli murini di pneumonectomia (PNX) che di impianto di protesi, abbiamo scoperto che l'aumento dell'ISA dopo il trattamento con PNX era significativamente bloccato dall'impianto di una protesi nella cavità toracica1. La capacità di quantificare con precisione l'ISA non solo dovrebbe migliorare l'affidabilità e la riproducibilità degli studi sulla funzione polmonare in modelli di rigenerazione alveolare indotta da lesioni, ma anche promuovere scoperte meccanicistiche di più malattie polmonari.
La funzione fondamentale del polmone è lo scambio di ossigeno e di anidride carbonica tra i vasi sanguigni e l'atmosfera. Le malattie polmonari come la displasia broncopolmonare (BPD), la malattia polmonare cronica ostruttiva (COPD) e le infezioni respiratorie acute provocano una riduzione dell'ISA 2 . I ricercatori che studiano la malattia polmonare hanno sviluppato diversi metodi quantitativi per valutare i cambiamenti morfologici nei polmoni, tra cui MLI, ILV, numero di scambiatori di gas, ISA e conformità ai tessuti polmonari 2 , 3 . Studi pionieristici di Weibel et al.....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Tutte le procedure utilizzate in questo protocollo sono state eseguite in conformità alle raccomandazioni contenute nelle Linee Guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio dell'Istituto Nazionale di Scienze Biologiche di Pechino. I topi maschi CD-1 di 8 settimane sono stati alloggiati in una struttura specifica senza patogeni (SPF) fino all'esecuzione degli esperimenti. Le chirurgie sono state eseguite utilizzando topi completamente anestetizzati ( cioè , senza risposte a pizzicotto). Dopo l'intervento chirurgico, i topi sono stati tenuti in una stanza calda e umida con cibo sufficiente e acqua dolce. I topi sono stati sacrificati ....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Abbiamo eseguito qui un esperimento con un gruppo trattato con PNX e un gruppo di protesi (impianto protesico). Questi raggruppamenti sono gli stessi dei raggruppamenti utilizzati in uno studio precedentemente pubblicato dal nostro gruppo di ricerca 14 .
Le mostre PNX e le protesi di protesi sono mostrate in Figura 2 . 8 settimane vecchi topi maschi CD-1 vengono utili.......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
In questo protocollo forniamo descrizioni dettagliate sulla misura dei parametri polmonari dopo il polmone a sinistra del polmone PNX e l'impianto di protesi. L'ISA è ora considerata una metrica chiave per la valutazione della funzione respiratoria in molte malattie polmonari e nella rigenerazione alveolare indotta da lesioni. Tuttavia, sebbene la comunità di ricerca polmonare sia d'accordo sull'utilità dell'ISA come metrica utile, fino ad oggi non è stata presa in considerazione la standardizzazione.......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Gli autori non hanno niente da rivelare.
Gli autori vorrebbero riconoscere all'Istituto Nazionale di Scienze Biologiche di Pechino per l'assistenza. Questo lavoro è stato sostenuto da Beijing Municipal Natural Science Foundation (numero Z17110200040000).
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Kit cauterio a basso costo | Strumenti per le scienze fini | 18010-00 | |
| Forbici Noyes | Strumenti per le scienze | 15012-12 | |
| Pinze per modelli standard | Strumenti per le scienze | 11000-12 | |
| Castroviejo Micro Portaaghi | scienze fini | 12060-01 | |
| Clip per vasi | Strumenti per le scienze fini | 18374-44 | |
| I. V. Cannula-20 gauge | Jinhuan Medical Product Co., LTD. | 29P0601 | |
| Sutura chirurgica | Jinhuan Medical Product Co., LTD. | F602 | |
| Piattaforma per intubazione per topi | Penn-Century, Inc | Modello MIP | |
| Laringoscopio per piccoli animali | Penn-Century, Inc | Modello LS-2-M | |
| TOPO Ventilatore per piccoli animali | Kent Scientific | RSP1006-05L | |
| Cuscinetto termico | Attrezzatura Stuart | SBH130D | |
| Pentobarbital sale sodico | Sigma | P3761 | |
| Eparina sale sodico | Sigma | H3393 | |
| Ematossilina Soluzione | Sigma | GHS132 | |
| Eosina Y soluzione, alcolica | Sigma | HT110116 | |
| 10 mL Pipetta | Thermo Scientific | 170356 | |
| Paraformaldeide | Sigma | P6148 | |
| OCT | Composto Tissue-Tek | 4583 | |
| macchina per criosezione | Leica | CM1950 | |
| Stampi base monouso | Fisher HealthCare | 22-363-553 | |
| ago calibro 18 | Becton Dickinson | 305199 | |
| Iodio povidone | Fisher Scientific | 19-027132 | |
| 70% etanolo | Fisher Scientific | BP82011 | |
| Set di infusione per singolo utilizzare | Weigao | SFDA 2012 3661704 | |
| soluzione salina tamponata con fosfato | Gibco | 10010023 | |
| Tapes | 3M Scotch | 8915 | |
| Cotton pad | Vinda | Dr.P | |
| Protesi in silicone | |||
| Strumento righello Olympus | VS120 | ||
| Adobe Valentina |
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Richiedi il permesso di riutilizzare il testo o le figure di questo articolo JoVE
Richiedi permesso