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Articolo metodologico

Utilizzo di Laser Doppler Imaging e monitoraggio per analizzare il microcircolo del midollo spinale nel ratto

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DOI:

10.3791/56243

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30 maggio 2018

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Qui presentiamo una combinazione della perfusione Doppler laser imaging (LDPI) e monitoraggio di laser Doppler aspersione (LDPM) per misurare spinale cord flussi sanguigni locali e saturazione dell'ossigeno (SO2), così come una procedura standardizzata per l'introduzione del midollo spinale trauma da ratto.

Abstract

Flussometria del laser Doppler (LDF) è un metodo non invasivo per la misura di portata (BF) di sangue, che lo rende preferibile per la misurazione microcircolatorie alterazioni del midollo spinale. In questo articolo, il nostro obiettivo era di utilizzare sia Laser Doppler imaging e monitoraggio per analizzare il cambiamento di BF dopo la ferita del midollo spinale. Sia il laser scanner di immagini Doppler e il sonda/monitor sono stati impiegati per ottenere ogni lettura. I dati di LDPI fornito una distribuzione locale di BF, che ha dato una panoramica di aspersione intorno al sito di lesione e reso accessibile per l'analisi comparativa di BF tra posizioni diverse. Intensamente misurando l'area sondaggio per un periodo di tempo, una sonda combinata è stata utilizzata per misurare simultaneamente la saturazione di ossigeno e BF del midollo spinale, mostrando perfusione generale del midollo spinale e rifornimento di ossigeno. LDF stessa ha alcune limitazioni, quali flusso relativo, segnale di sensibilità al movimento e zero biologico. Tuttavia, la tecnologia è stata applicata in studio clinico e sperimentale, grazie alla sua semplice installazione e misura rapida di BF.

Introduzione

Il tessuto del midollo spinale è estremamente sensibile all'ipossia indotta da lesione del midollo spinale (SCI) e altamente vascularized. Nostri studi precedenti hanno mostrato che il flusso di sangue del midollo spinale è stato diminuito significativamente dopo trauma cranico lesioni1,2, che potrebbe essere collegato al deficit della funzione motoria. Recenti studi hanno dimostrato che l'integrità dei vasi sanguigni dopo SCI è ben correlato con il miglioramento della funzione motoria sensoriale3. È stato segnalato che una migliore vascolarizzazione potrebbe salvare la materia bianca, ....

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Protocollo

Protocolli degli animali che coinvolgono gli animali sperimentali seguivano linee guida stabilite dai National Institutes of Health (NIH) e sono stati approvati dalla cura degli animali e uso Comitato di Capital Medical University.

Le procedure di introduzione di SCI e di misurazione BF del midollo spinale utilizzando laser Doppler apparecchiature descritte di seguito sono state utilizzate in un studio pubblicato1.

1. preparazione per la chirurgia

  1. Preparare il sodio pentobarbital soluzione 3% (p/v) in soluzione salina e amministrare alla dose di 35 mg/kg.
    Attenzione: il sodio ....

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Risultati

LDPI fu utilizzato per misurare il BF nel midollo spinale, che è stato quantificato lungo l'asse rostro-caudale del midollo spinale tramite l'estrazione di profili lineari (Figura 4). Figura 5A e 5B figura rappresentano rispettivamente l'imaging di flusso del midollo spinale del gruppo SCI e del gruppo finto. Figura 5 e Figura 5 rappresentan.......

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Discussione

Alcuni dettagli dovrebbero essere notati durante l'esecuzione di questo protocollo. In primo luogo, il processo di anestesia e chirurgia dovrebbe essere effettuato in modo più rapido ed elegantemente possibile per ridurre al minimo lo stress introdotto all'animale. Per ridurre il disturbo ai risultati, è possibile mantenere l'animale in uno stato relativamente tranquillo e stabile. In secondo luogo, si dovrebbe prestare attenzione più al sanguinamento durante la misurazione utilizzando apparecchiature Doppler laser, poic.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori non hanno nessun ringraziamenti.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Laser Doppler Line ScannerMoor InstrumentsmoorLDLS2
Laser Doppler MonitorMoor InstrumentsmoorVMS-LDF
Sonda per monitorMoor InstrumentsVP3Sonda di erogazione dell'estremità dell'ago smussato
ImpactorPrecision Systems and InstrumentationIH-0400
Fenobarbital sodicoSigma-AldrichP3761
BuprenorfinaSigma-AldrichB-908
SiringaBecton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd300841
Aghi per sutura chirurgica con filoShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd18T0329 (numero di lotto) /4-0
Fabbrica di strumenti per l'operazione del bisturi di Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.J11030 4 #
Lama BisturiStrumento di Funzionamento fabbrica di Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.J12130 20 #
Pinza oftalmicaStrumento operativo fabbrica di Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.JD1040
Pinze emostaticheFabbrica di strumenti operativi di Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.J31050
Benzyl penicilllina sodiumNorth China Pharmaceutical Co., LtdF6072116 (numero di lotto)
75% di alcolDezhou Anjie Gaoke prodotti per la disinfezione Co., Ltd150421R (numero di lotto)
IodineShandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd20170102 (numero di lotto)
RatLaboratory Animal Center, The Academy of Millitery Medical SciencesSprague-Dawly (ceppo di ratto)

Riferimenti

  1. Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Meliorating microcirculatory with melatonin in rat model of spinal cord injury using laser Doppler flowmetry. Neuroreport. 27 (17), 1248-1255 (2016).
  2. Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H.

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Ristampe e permessi

Tag

Misurazione del flusso sanguignomonitoraggio della saturazione di ossigenomodello di lesione del midollo spinaleprocedura chirurgica su rattoanalisi dell'imaging di perfusioneflusso sanguigno non invasivovalutazione della microcircolazionetecnica di flussometria Doppler