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Articolo metodologico

PET e MRI guidate irradiazione di un modello del ratto di Glioblastoma utilizzando un Micro-irradiatore

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DOI:

10.3791/56601

28 dicembre 2017

In questo articolo

Sommario

In passato, piccolo animale irradiazione solitamente è stato effettuato senza la possibilità di indirizzare un volume del tumore ben delineati. L'obiettivo era quello di imitare il trattamento del glioblastoma umano in ratti. Utilizza una piattaforma piccola irradiazione degli animali, abbiamo effettuato MRI-guida 3D conformal irradiazione con PET-base sub-volume d'amplificazione in un ambiente preclinico.

Abstract

Per decenni, ricerca di piccolo animale radiazione principalmente è stato effettuato usando abbastanza grezzi messe a punto sperimentali applicando semplici tecniche di una trave senza la possibilità di indirizzare un volume del tumore specifico o ben delineati. La consegna di radiazione è stata realizzata utilizzando sorgenti di radiazioni fisso o acceleratori lineari, producendo raggi x megavoltage (MV). Questi dispositivi sono in grado di raggiungere sub-millimetrica precisione richiesta per piccoli animali. Inoltre, le dosi elevate consegnato alla valutazione della risposta sana circostante tessuto ceste. Per aumentare la traduzione tra piccoli studi sugli animali e gli esseri umani, il nostro obiettivo era quello di imitare il trattamento del glioblastoma umano in un modello del ratto. Per attivare un'irradiazione più accurata in un ambiente preclinico, recentemente, piattaforme di ricerca guidata da immagini piccolo animale radiazione di precisione sono stati sviluppati. Simile a umani sistemi di pianificazione, pianificazione su queste micro-irradiatori del trattamento si basa su tomografia computata (CT). Tuttavia, basso contrasto dei tessuti molli sul CT rende molto difficile da localizzare bersagli in alcuni tessuti, come il cervello. Di conseguenza, incorporando la risonanza magnetica (MRI), che ha un eccellente contrasto di molli rispetto al CT, consentirebbe una delineazione più precisa dell'obiettivo per irradiazione. Nelle ultime tecniche decennio di imaging anche biologici, come la tomografia a emissione di positroni (PET) ha riscosso interesse orientativa trattamento terapia di radiazioni. PET consente la visualizzazione di ad es., consumo del glucosio, trasporto dell'amminoacido o ipossia, presente nel tumore. Targeting quelle parti altamente proliferative o radio-resistente del tumore con una dose più elevata potrebbe dare un vantaggio di sopravvivenza. Questa ipotesi ha condotto all'introduzione del volume del tumore biologico (BTV), oltre il volume di destinazione lordo convenzionale (GTV), volume bersaglio clinico (CTV) e volume bersaglio pianificato (PTV).

Presso il laboratorio di imaging preclinico dell'Università di Gand, un micro-irradiatore, un piccolo animale PET e un animale di piccola T 7 MRI sono disponibili. L'obiettivo era di incorporare irradiazione MRI-guidato e animale-guida sub-volume d'amplificazione in un modello del ratto di glioblastoma.

Introduzione

Glioma di alto grado è il tumore cerebrale maligno più comune e più aggressivo in adulti con una sopravvivenza mediana di 1 anno nonostante le modalità correnti di trattamento. Lo standard di cura comprende maximal resezione chirurgica seguita da radioterapia esterna del fascio combinato (RT) e temozolomide (TMZ), seguita da manutenzione TMZ1,2,3. Sin dall'introduzione di TMZ ora più di 15 anni fa, non sono stati apportati miglioramenti significativi nel trattamento di questi tumori. Di conseguenza, l'implementazione di nuove strategie terapeutiche è urgente ma dovrebbe esser....

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Protocollo

Lo studio è stato approvato dal comitato etico per gli esperimenti sugli animali (ECD 09/23 ed ECD 12/28). Tutti i dettagli commerciali possono essere trovati nella Tabella materiali.

1. F98 GB ratto modello cellulare

  1. Le cellule di F98 GB, ottenute da ATCC, negli strati monomolecolari utilizzando di Dulbecco modificato Eagle Medium, siero del vitello di 10%, 1%, penicillina, streptomicina 1%, 1% L-Glutammina e 0,1% amfotericina b, della cultura e posto in un'incubatrice di CO2 (5% CO2 e 37 ° C).
  2. Inoculare le cellule di glioma nel cervello di ratti femminili di F344 Fischer (170 g ....

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Risultati

Per simulare la metodologia di trattamento umano per l'irradiazione del glioblastoma in un modello preclinico, l'inclusione della radioterapia MRI-guida era necessario. Utilizzando il PCTPS e l'interfaccia di micro-irradiatore siamo stati in grado di irradiare F98 glioblastoma in ratti con molteplici archi non complanari conformi targeting per regione contrapporre-aumentata su T1-weighted MRI17. Trasformazioni del rigido-corpo in combinazione con un letto di multim.......

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Discussione

Per raggiungere irradiazione accurata del bersaglio del tumore glioblastoma nel cervello del ratto, Consiglio di CT di micro-irradiatore a bordo non era sufficiente. I tumori cerebrali sono difficilmente visibili a causa di contrasto insufficiente dei tessuti molli, anche se l'aumento di contrasto sarebbe stato utilizzato. Come tale, MRI deve essere incluso per consentire l'irradiazione più precisa. Utilizzando un'acquisizione di MR sequenziale su un sistema di T 7 e un'acquisizione di CT su micro-irradiatore di che siam.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno conflitti di interesse di divulgare

Ringraziamenti

Gli autori vorrei ringraziare Stichting Luka Hemelaere e Soroptimist International per sostenere questo lavoro.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
GB RAT model
F98 Linea cellulare di glioblastomaATCCCRL-2397
Fischer F344/Ico crl RattiCharles RiverN/Ahttp://www.criver.com/products-services/basic-research/find-a-model/fischer-344-rat
Sistema di micropompaWorld PrecisionInstruments UMP3Micro 4: https://www.wpiinc.com/products/top-products/make-selection-ump3-ultramicropump/#tabs-1
Telaio stereotassicoKopf902Modello 902 Dual Small Animal Telaio stereotassico
trapano diamanteVellemanVTHD02https://www.velleman.eu/products/view/?id=370450
Cera d'ossoAesculap1029754https://www.aesculapusa.com/products/wound-closure/hemostatic-bone-wax
Siringa per insulina MicrofineBeckton-Dickinson3209241 mL, 29G
Lampada IR InfraPhilPhilipsHP3616/01
EthilonEthicon662G/662HFS-2, 4-0, 3/8, 19 mm
Nome>Azienda Numero di catalogoComments
Coltura cellulare
DMEMInvitrogen14040-091
Penicillina-streptomicinaInvitrogen15140-148
L-glutamminaInvitrogen25030-032
FungizoneInvitrogen15290-018
Trypsin-EDTAInvitrogen25300-062
PBSInvitrogen14040-224
FalconsThermo Scientific178883175 cm2 superficie del nunclon, monouso per colture cellulari con tappi filtranti
Mezzo di congelamento cellulareSigma-aldrichC6164Cell Freezing Medium-DMSO, filtrato sterile, adatto per coltura cellulare, testato per endotossine
NomeAziendaNumero di catalogoComments
Irradiazione animale
Micro-irradiatoreX-strahlSoftware SARRP
per irradiazioneX-strahlSistemapianificazione preclinica del trattamento (PCTPS) MuriPlan, versione 2.0.5.
NameAziendaNumero di catalogoComments
Small animal PET
microPET possibilità di sistema 1MolecubesB-Cubehttp://www.molecubes.com/b-cube/
possibilità di sistema microPET 2TriFoil Imaging, traccianti PET Northridge CAFLEX Triumph IIhttp://www.trifoilimaging.com
internamente18F-FDG, 18F-FET, 18F-FAZA, 18F-Choline
NomeCompanyNumero di catalogoComments
Small animal MRI
sistema microMRIBruker BiospinPharmascan 70/16 https://www.bruker.com/products/mr/preclinical-mri/pharmascan/overview.html
DotaremGuerbetMRI Bobina trasmettitore Dotarem 0,5 mmol/ml
tutto il corpo di rattoRapid BiomedicalV-HLS-070
bobina per superficie cerebrale di rattoRapid BiomedicalP-H02LE-070
Unità di riscaldamento a base d'acquaBruker BiospinMT0125
30 G Ago per iniezione IVBeckton-Dickinson30512830 G
Tubo PE 10 (60 cm/iniezione)Instech laboratories, IncBTPE-10BTPE-10, tubo in polietilene 0,011 x 0,024 pollici (0,28 x 60 mm), non sterile, bobina da 30 m (98 piedi), Instech laboratories, Inc Plymouth meeting PA USA- (800) 443-4227- http://www.instechlabs.com
capillari per microematocrito non eparinizzatiGMBH7493 21questi capillari vengono riempiti d'acqua per creare marcatori visibili su risonanza magnetica e TC
strong>NomeAziendaNumero di catalogoComments
>Consumables
isoflurano: IsofloZoetisB506Anestesia
ketamina: KetamidorEcupharAnestesia
xilazina: SedaxylCodifar NV
CatetereTerumoVersatus-W26G
TemozolomideSigma-aldrichT2577-100MGchemioterapia
DMSOSigma-aldrich276855-100ML
Siringa da insulina MicrofineBeckton-Dickinson3209241 mL, 29G
NameCompanyNumero di catalogoComments
Analisi dell'immagine
Software PMODTecnologie PMOD LLCPFUS (strumento di fusione)software di quantificazione di immagini biomediche (BIQS), versione 3.405, https://www.pmod.com/web/?portfolio=22-image-processing-pfus
NameCompanyNumero di catalogoComments
>Apparecchiature per anestesia
Unità di movimento anesteticoASA LTDASA 0039ASA LTD, 5 valley road, Keighley, BD21 4LZ
Generatoredi ossigeno Tecniche veterinarie Int.7F-3BDO-Medipass, Ijmuiden
di Prodotto mezzo di contrasto per < per anestesia

Riferimenti

  1. Stupp, R., et al. Promising survival for patients with newly diagnosed glioblastoma multiforme treated with concomitant radiation plus temozolomide followed by adjuvant temozolomide. J Clin Oncol. 20 (5), 1375-1382 (2002).
  2. Dhermain, F.

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Ristampe e permessi

Tag

Irradiazione guidata da immaginifusione PET MRIiniezione stereotassicaMRI con mezzo di contrastoCT per la pianificazione del trattamentovolume bersaglio biologicoistogramma dose volumeimaging multimodale