È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Un modello del ratto dell'ipoperfusione lieve intrauterina con stenosi Microcoil

10.4K visualizzazioni

⸱

DOI:

10.3791/56723

⸱

7 gennaio 2018

 ,  ,  ,  , 

In questo articolo

Sommario

Lieve ipoperfusione intrauterino è stato prodotto da stenosi dell'arteria con i microcoils metallici avvolti intorno le arterie uterine ed ovariche in ratti al giorno embrionale 17. Questa procedura ha prodotto prenatale ipoperfusione e restrizione della crescita intrauterina.

Abstract

Ipoperfusione/ischemia intrauterina è una delle principali cause di restrizione della crescita intrauterina/fetale, parto prematuro e basso peso alla nascita. Maggior parte degli studi di questo fenomeno sono stata effettuata in entrambi modelli con ischemia intrauterina severa o con grado di pendenza dell'ipoperfusione intrauterina. Nessuno studio è stato condotto in un modello su uniforme lieve ipoperfusione intrauterina (MIUH). Due modelli sono stati utilizzati per gli studi di MIUH: un modello basato sulla legatura del suturare di entrambi i lati del porticato arterioso formata con le arterie uterine ed ovariche, e un modello transitorio basato sul ritaglio l'arterie ovariche bilaterali e l'aorta con l'evidenza. Quei due modelli del roditore di MIUH hanno alcune limitazioni, ad esempio, non tutti i feti sono sottoposti a MIUH, a seconda della loro posizione nel corno uterino. Nel nostro modello MIUH, tutti i feti sono sottoposti ad un livello paragonabile di ipoperfusione intrauterina. MIUH è stato realizzato da stenosi delicata di tutte le quattro arterie d'alimentazione dell'utero, cioè, arterie uterine ed ovariche bilaterali.

Stenosi arteriosa è stata indotta da metallo microcoils avvolto intorno le arterie d'alimentazione. Produzione di stenosi arteriosa con i microcoils ci ha permessi di controllare, ottimizzare e riprodurre la diminuzione del flusso sanguigno con pochissima variabilità e un tasso di mortalità basso, consentendo in tal modo una valutazione accurata. Quando si usavano i microcoils con un diametro interno di 0,24 mm, il flusso di sangue nella placenta e feto era leggermente diminuita (circa 30% dal livello pre-stenosi nella placenta). La prole del nostro modello MIUH dimostra chiaramente di lunga durata alterazioni nei risultati del test neurologici, neuroanatomical e comportamentali.

Introduzione

Gli infanti con restrizione della crescita intrauterina (IUGR) (noto anche come ritardo di crescita intrauterino) (peso nascita < 10th percentile per l'età gestazionale), nascita pretermine (Nato a < 37 settimane di gestazione), e/o bassa nascita conto peso (< 2500 g) per quasi il 10% di tutti i neonati 2,3. Molti di questi infanti presentano problemi neurologici quali paralisi cerebrale e disturbi dello sviluppo (ad es., attention-deficit/hyperactivity disorder (ADHD) e disturbi dell'apprendimento) 3,4,5. ....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

Tutti gli esperimenti sono stati eseguiti secondo protocolli approvati dal comitato di uso della nazionale cerebrale e centro cardiovascolare, Suita, Giappone e cura degli animali sperimentali.

1. preparare i seguenti animali e materiali per la chirurgia MIUH

  1. Preparare temporizzati ratti Sprague-Dawley incinti al giorno gestazionale 17, vale a dire, embrionale giorno 17 (E17). Medio peso corporei del dams sono ± 307.0 40,7 g (media ± DS, n = 9).
  2. Preparare i microcoils metallici; diametro interno 0,24 mm, in acciaio rivestito in oro.
  3. Preparare tutti i materiali secondo la tabella dei materiali.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

Dopo aver applicato i microcoils a tutti delle arterie che alimentano l'utero, vale a dire, le arterie uterine ed ovariche bilaterali, tutti i feti sono sottoposti a livelli comparabili di ipoperfusione. L'applicazione di microcoils con un diametro interno di 0,24 mm provoca lieve stenosi di quelle arterie, causando così una lieve diminuzione nel flusso di sangue alla placenta e feti (Figura 3; circa il 30% dal livello pre-stenosi nella placenta, vedere rifer.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

Microcoil stenosi delle arterie sia ovariche che uterine in entrambi i corni uterini produce ipoperfusione intrauterina coerente e riproducibile in tutte le placente e feti. Il livello dell'ipoperfusione può essere modificato utilizzando i microcoils con diversi diametri interni. Cuccioli del ratto, nati da una diga su cui è stata eseguita la stenosi dell'arteria con i microcoils 0,24 mm di diametro interno dimostrano IUGR e parto prematuro (Vedi riferimento 1 per i dettagli). I cuccioli presentano alterazioni neuroanato.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato supportato dal programma di scambio FY 2013 ricerca tra JSP e CNRS, JSP KAKENHI Grant numero 26860858 e la Narishige Neuroscience Research Foundation. Ringraziamo la d. ssa Mariko Harada-Shiba e Kyoko Shioya per utili discussioni. Ringraziamo Mari Furuta, Mutsumi Sakamoto, Ritsuko Maki e Dr. Emi Tanaka per l'eccellente assistenza tecnica.

....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Stereomicroscopio
Macchina
Scatola
Termoforo
Pannolino 30x40 cm
Schiuma depilatoria o rasoio
Soluzione disinfettanteallo iodio
Garza 10x20 cm 
Telo chirurgico 45x45 cm con apertura rotonda di 5 cm di diametro
Flacone spray con etanolo per la disinfezione
Cotton fioc
Pinze con punte
Pinze con punte
Forbici
Bisturi chirurgico, la dimensione della lama è lunga 27 mm (n.10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Giappone)
Ago
Microbobine metalliche; diametro interno 0,24 mm, in acciaio rivestito d'oro (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Giappone)
Sutura di seta 4-0
Soluzione salina sterile (0,9% cloruro di sodio)
Siringhe
plastica (50 ml) e aghi (18 G)
per anestesia isofluranodi induzione per anestesiagrandi smussatesottili angolateda sutura chirurgico in

Riferimenti

  1. Ohshima, M., et al. Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity. Sci Rep. 6, 39377(2016).
  2. Specified Report on Vital Statistics in FY2010, Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan. , Available from: http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Esplora altri articoli

Arterie uterinee e ovarichestenosi arteriosariduzione del flusso sanguignorestrizione della crescita fetaleintervento chirurgicoflusso sanguigno placentarerestrizione della crescita intrauterina