Qui dimostriamo un protocollo per standardizzare le procedure di campionamento di un modello porcino stabilito di infarto miocardico acuto al fine di aumentarne il valore traslazionale nella comprensione della patofisiologia della lesione del miocardio di ischemia/riperfusione e per testare nuovi farmaci candidati.
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Articolo metodologico
Miglioramento di un modello di infarto miocardico porcina cassa chiusa tramite la normalizzazione del tessuto e le procedure di campionamento di sangue
In questo articolo
Sommario
Abstract
Ischemia del miocardio riperfusione (I / R) lesioni contribuiscono per quasi la metà della zona necrotica dopo infarto miocardico. Fino ad oggi non c'è nessun farmaco approvato per prevenire o ridurre del miocardio mi / lesioni R. Lo studio e la comprensione dei meccanismi fisiopatologici del miocardio I / R la ferita è essenziale sviluppare trattamenti efficaci. Grandi esperimenti sugli animali sono un passo importante in metodi traslazionale. Il modello porcino di infarto miocardico acuto è stato stabilito e descritto da noi stessi e gli altri. Abbiamo mirato a migliorare ulteriormente il valore del modello concentrandosi in particolare sulle tecniche di campionamento per l'utilizzo in futuri esperimenti. Inoltre, diamo risalto a passi piccoli ma importanti che possono influenzare la qualità dei risultati finali. Per simulare la situazione clinica di infarto mi / lesioni R, un catetere di intervento coronarico percutaneo (PCI) è stata inserita l'arteria coronaria discendente anteriore sinistra (ragazzo) di un maiale anestetizzato. ° ° ° Questo modello imita infarto miocardico acuto e trattamento di PCI in esseri umani con la possibilità di determinare con precisione la zona a rischio come pure il necrotico- e tessuto ischemico vitale. Qui il modello è stato usato per studiare l'effetto di un inibitore di peptide biciclico del FXIIa. Il modello può anche essere modificato per consentire tempi di riperfusione studiare gli effetti successivi di infarto miocardico.
Introduzione
Cardiopatia ischemica, in particolare infarto miocardico (MI), è la principale causa di morte nei paesi sviluppati 1. Oggi, il trattamento standard di MI è intervento coronarico percutaneo (PCI), il trattamento del catetere a palloncino. Uno dei fattori critici che influisce sulla qualità della vita e la prognosi dei pazienti dopo il MI acuto trattati con PCI è la dimensione di infarto. La riduzione delle dimensioni può avere un grande impatto sulla sopravvivenza e prognosi paziente 2. Ischemia/riperfusione miocardica (io / R) lesione ha una notevole influenza sulla dimensione di infarto così uno degli obiettivi principa....
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Protocollo
1. gli animali:
Tutti gli animali sono stati trattati secondo le linee guida delle leggi nazionali svizzere. Lo studio è stato approvato dal comitato locale di sperimentazione animale del Cantone di Berna (autorizzazione no. ESSERE 25/16).
Utilizzare grandi maiali bianchi di entrambi i sessi (~ 30 ± 5 kg). Dividere gli animali ciecamente in due gruppi, un gruppo che riceve un inibitore (80 kDa proteasi) biciclico del FXIIa o il trattamento di scelta e l'altro un controllo inattivo.
2. intervento chirurgico (Figura 1)
- Anestesia e preparazion....
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Risultati
Un animale morto prematuramente prima della somministrazione di FXIIa peptide inibitore o di un controllo a causa di un errore tecnico (improvviso calo della pressione sanguigna durante il tempo di ischemia, prima dell'aggiunta della sostanza in esame). Un animale è stato escluso dal gruppo di inibitore di FXIIa perché non di ischemia/riperfusione è stato osservato dovuto l'anatomia anormale dell'arteria discendente anteriore sinistra (ragazzo). Una grande parte del ventricolo sinistro, t.......
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Discussione
Del miocardio mi / R la ferita ha un effetto significativo sulla dimensione finale di infarto che si traduce direttamente in prognosi dei pazienti dopo infarto miocardico acuto3. Comprensione della patofisiologia del miocardio mi / R ferita è il primo passo per ridurre o prevenire che. Del miocardio mi / R ferita è una condizione acuta che si verifica subito dopo riperfusione dei vasi occlusi. Io / lesioni R conduce all'attivazione della risposta immunitaria innata e danno cellulare si verifica ne.......
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Dichiarazioni
Gli autori non dichiarano alcun conflitto di interessi.
Ringraziamenti
Gli autori desiderano riconoscere Professor Christian Heinis per fornire l'inibitore di FXIIa e del rispettivo controllo. Riconosciamo anche con gratitudine Olgica Beslac, Dr. Daniel Mettler e Kay Nettelbeck dall'unità di chirurgia sperimentale, Dipartimento per la ricerca biomedica, Università di Berna per il supporto tecnico. Celine Guillod e Matthias Rausch dal reparto per diagnostica, interventistica e radiologia pediatrica, ospedale universitario di Berna, Inselspital fornito supporto con le apparecchiature a raggi x e le tecniche. Questo progetto è stato finanziato dalla Swiss National Science Foundation, progetto n. 320030_156193. Vorremmo anche ringraziare il ....
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| ABL 90 Flex, analizzatore di gas ematici | Radiometro-Analisi | dei gas ematici (BGA) | |
| ACT Plus | Medtronic-Tempo | di coagulazione attivato | |
| Atropin | Sintetica-Atropinum | Sulfas, 0,5mg/ml | |
| Bilancia (20-500 Kg) | NAGATA Scale, Tiwan | HTB/HTR | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Bilancia (21-4200 g) | Mettler toledo, Svizzera | MS4002SDR | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Provette per la raccolta del sangue: EDTA, citrato e siero | S-Monovette, Nuembrecht, Germania | 05.1167.001, 05.1071.001 e 05.1557.001 Possono | essere utilizzati prodotti alternativi |
| BV Pulsera mobile | Philips-È | possibile utilizzare prodotti alternativi | |
| Centrifuge | Labcare, Regno Unito | ALC PK120R | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Defibrillatore Lifepak 12 | Medtronic-I | prodotti alternativi possono essere utilizzati | |
| Destrano da Leuconostoc mesenteroides | Sigma-Aldrich, Germania | D3759 | Media M.wt 48000-90000 |
| Fotocamera reflex digitale a obiettivo singolo | Sony, Thailandia | DSLR-A500/A550 | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Pinze da dissezione | È possibile utilizzare prodotti alternativi | ||
| Catetere per dilatazione EMPIRA RX PCI Cordis | , Johnson& Johnson, USA | 85R15300S | Diametro 3 mm, lunghezza 15 mm, È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Catetere per dilatazione EMPIRA RX PCI | Cordis, Johnson& Johnson, USA | 85R15350S | Diametro 3,5 mm, lunghezza 15 mm, È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Evans Blue | Sigma-Aldrich, Germania | E2129 | Respiratore |
| premium tossico Fabius GS | Drä ger, Lü beck, | Germania-Stazione | di lavoro per anestesia, È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Fentanyl | Inselspital ISPI-Fentanyl | 2500mcg/50ml | |
| Formaldehyde | Pathology Institute, Università di Berna | SI148701 | Possono essere utilizzati prodotti alternativi |
| Inibitore FXIIa | Fornito dal laboratorio del Prof. Christian Heinis nell'EPFL | Nuovo peptide biciclico | |
| Galeo, filo guida coronarico | Biotronik, Germania | 125497 | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Catetere di guida | Boston Scientific, Florida, USA | 34356-06 | 6F (100 cm, EB3.75). Prodotti alternativi possono essere utilizzati |
| Eparina Sodica | Drossapharm, Basilea, | Svizzera-Liquemin, 25000 U.I./5 ml | |
| Elettrochirurgia di fascia alta | BOWA, Germania | ARC 400 | Fonte elettrica per l'aspirazione del sangue. È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Filtro respiratorio Hydro-Guardmini | Intersurgical, Lituania | 1745000 | Filtri |
| Immagine J | National Institute of Health, USA | 1.47v | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Dispositivo di gonfiaggio, Atrion QL2530 | Atrion medical product, Alabama, USA | 96402 | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| IntelliVue MP 70 | Philips, Boeblingen, | Germany-Monitor | (ECG, frequenza cardiaca, pressione sanguigna e temperatura corporea). Possono essere utilizzati prodotti alternativi |
| KCl | Sintetica SA-Cloruro | di potassio 15% | |
| ketamina | vetoquinol-narketan | , 1 ml/100 mg | |
| LR-ACT | Medtronic | 402-01 | ACT siringhe speciali |
| Midazolam | Roche-Dormicum | , 5 mg/ml | |
| Bisturi | È possibile utilizzare prodotti alternativi | ||
| È | possibile utilizzare prodotti alternativi | ||
| Fotocamera ad alta risoluzione, supporto per imaging macro PathStand per l'imaging grossolano | , risoluzione HD 1080 | p. USA. È possibile utilizzare prodotti alternativi | |
| PBS | Preparazione | interna-È | possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Cannula venosa periferica, 18 G | È possibile utilizzare prodotti alternativi | ||
| Sistema di acquisizione dati PowerLab 4/35 | Adinstruments, Spechbach, | ||
| Heidolph, Germania | 544-41200-00 | Shaker. L'alternativa può essere utilizzata | |
| Rü schelit-Super Safety Clear Tube | Teleflex, Dublino, Irlanda | 112480 | Tubo per vie aeree, è possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Siringhe aspiratore Pico sicure | Radiometro | 956-622 | Siringhe speciali BGA |
| Saline | Sintetica Bioren-NaCl | 0,9%. Prodotti alternativi possono essere utilizzati | |
| Sevorane 1,5% | AbbVie | AG-Sevorane 250ml 100% | |
| Guaina | Cordis, Johnson& Johnson, USA | 504-607 A | AVANTI + / 7 F, È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Pompa di infusione spaziale | B.Braun Medical AG, | Germania-Per | l'infusione di fentanil. È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| SPR-350 (catetere Millar) | Adinstruments, Texas, USA | 840-8166 | MIKRO-TIP, 5F, 120 cm |
| Sega | È possibile utilizzare prodotti alternativi | ||
| Suture | ETHICON, Johnson& Johnson, USA | Y3110H | Monocryl 3-0 SH-1 Plus. È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Siringhe (20, 10 e 5 mL) | CODAN,Baar, Svizzera | 62.7602, 62.6616, 62.5607 rispettivamente | Utilizzato per iniettare materiali anestetici per via intramuscolare o direttamente nella linea venosa centrale. Anche per iniettare eparina o FXIIa o il rispettivo controllo. È possibile utilizzare prodotti alternativi |
| Divaricatore | È possibile utilizzare prodotti alternativi | ||
| Tissue-tek | SAKURA, Paesi Bassi | 4583 | Composto O.C.T. Pinze |
| vascolari | È possibile utilizzare prodotti alternativi | ||
| Xenetix 300 mezzi di contrasto | Guerbet, Zü ricco, | Svizzera-Lobitridol, 300 mg di ioduro/ml | |
| Xilazina | Vetoquinolo-Xilapan | , 20mg/1 ml | |
| 2,3,5-Trifeniltetrazolio coruro | Sigma-Aldrich, Austria | T8877 | |
| 500 μ Tubi L (eppendorf) | Trefflab, Svizzera | 96.08185.9.03 | È possibile utilizzare prodotti alternativi |
Riferimenti
- Mozaffarian, D., et al. Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update. Circulation. 133, e338-e360 (2016).
- Miller, T. D., et al. Infarct size after acute myocardial infarction measured by quantitative tomographic 99....
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