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Articolo metodologico

Un modello del ratto di orthotopic del trapianto del fegato usando una tecnica novella dell'anastomosi magnetico per la ricostruzione della Vena Cava Suprahepatic

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DOI:

10.3791/56933

19 marzo 2018

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

La ricostruzione della vena cava suprahepatic (SHVC) rimane un passo difficile nel trapianto orthotopic del fegato del ratto. In questo articolo, vi mostriamo un protocollo passo-passo per la ricostruzione di SHVC in ratti facendo uso di una tecnica di anastomosi magnetico romanzo.

Abstract

Modello del ratto di trapianto orthotopic del fegato (OLT) è essenziale per la ricerca di trapianto. È un modello animale molto sofisticato e richiede una curva di apprendimento ripida. L'introduzione della tecnica polsino per anastomosi della vena portale (PV) e infrahepatic della vena cava (IHVC) ha notevolmente semplificato la procedura di trapianto in ratti. Tuttavia, a causa della breve parete anteriore della vena cava (SHVC) per i destinatari suprahepatic, la tecnica di polsino è molto difficile da utilizzare per la ricostruzione della SHVC. Maggior parte dei ricercatori in questo campo ancora utilizza la tecnica di sutura a mano per ricostruzione SHVC, che lo rende il passo di collo di bottiglia nel trapianto orthotopic del fegato del ratto. La tecnica di anastomosi magnetico (cioè, magnamosis) è un metodo di connessione due pescherecci che utilizzano la forza di attrazione tra due magneti. Il nostro studio recente ha dimostrato che la tecnica di anastomosi magnetico è superiore per la tecnica di sutura a mano per la ricostruzione di SHVC in ratti. In questo articolo, vi mostriamo un protocollo passo-passo per la ricostruzione di SHVC in ratti utilizzando la tecnica di anastomosi magnetico romanzo. In questo modello, la ricostruzione del PV e IHVC è stata effettuata con la tecnica del bracciale standard, mentre la ricostruzione del dotto biliare (BD) è stata effettuata mediante una tecnica di stent. Il re-arterialization epatico non è stato eseguito. La tecnica di anastomosi magnetico ha reso più facile ricostruzione SHVC e accorciata significativamente la fase di anphepatic. Dopo una curva di apprendimento ragionevole, anche ricercatori senza competenze avanzate di microsurgical possono produrre risultati affidabili e riproducibili utilizzando questo modello del ratto di OLT.

Introduzione

Modello del ratto di trapianto orthotopic del fegato (OLT) è essenziale per trapianto ricerca1,2. Il primo ratto OLT è stato descritto da Lee et al. 1973,3. In tale modello, tutte le navi sono state ricostruite mediante la tecnica di sutura a mano. La tecnica di sutura a mano richiede competenze avanzate microsurgical, che limita notevolmente la sua utilizzazione. Da allora, varie modifiche al protocollo originale del ratto OLT sono state segnalate. Fra loro, la tecnica di polsino per anastomosi della vena portale (PV) e infrahepatic della vena cava (IHVC) segnalato da Kamada <....

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Protocollo

Il protocollo è stato effettuato in conformità con le linee guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio ed è stato approvato dal Comitato per l'etica di esperimenti di animale di Xi ' an Jiaotong University, Xi ' an, provincia dello Shaanxi, Cina.

Nota: Nessuna delle procedure in questo protocollo è stata effettuata sotto un microscopio chirurgico.

1. preparazione preoperatoria

  1. Il Design e la forma degli anelli magnetici (Figura 1)
    1. Assemblare il dispositivo magnetico anastomosi abbinando un paio di anelli magnetici al neodimio-ferro-boro.
    2. Progetta....

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Risultati

Dopo circa 10 tentativi, la tecnica di anastomosi magnetico per SHVC ricostruzione è stata masterizzata correttamente da un ricercatore che non aveva alcuna preparazione preventiva microsurgical. La ricostruzione della SHVC ha preso meno di 2 min. La fase anhepatic per i ratti destinatari era circa 10 min. Nessuna trombosi, sanguinamento o angiostegnosis è stata osservata al sito anastomotic SHVC 1, 5 e 30 giorni dopo riperfusione. La cavografia della vena inferiore è stato effettuato a 2.......

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Discussione

Molti clinici progredisce nel trapianto del fegato possono essere attribuiti a studi sugli animali. Ratto OLT è un modello ampiamente usato e ben accettato nella ricerca di conservazione di organi, immunologia del trapianto, fisiologia e patologia. Tuttavia, è anche una procedura molto complicata e richiede abilità avanzate di microsurgical. Nonostante molti miglioramenti nella procedura di ratto OLT, l'anastomosi SHVC rimase un passo impegnativo. In questo articolo, descriviamo una tecnica novella anastomosi magnetico p.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto da sovvenzioni dal Ministero dell'educazione innovazione Team sviluppo programma della Cina (No. IRT16R57), Fondazione nazionale di scienze naturali della Cina (No. 81470896) e una ricerca di fondi per giovani talenti reclutamento piani di Xi ' an Jiaotong University (RW).

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Macchina per anestesiaHarvard  da tavoloanestesia animale
PLX7000B sistema digitale mobile con arco a CPerlong MedicalPLX7000BViene utilizzato principalmente per l'angiografia e la fotografia di varie operazioni
Pompa a siringaMindrayBeneFusion SP5per infusione endovenosa
IsofluranoRWD life Science Co.anestetico: per l'induzione e il mantenimento dell'anestesia
iohexolShanghai General Pharmaceutical Co  mezzi di contrasto intravascolare   
iniezione di eparina sodicaSPH No.1 Biochemical & Farmaceutico Co., LTD   prevenire la formazione di trombosi 
cefuroxima Glaxo Operations UK Limitedun antibiotico
buprenorfina TIPR Pharmaceutical Responsible Co., Ltdun analgesico
curvo microforcipeShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.W40350per strumenti chirurgici
(diritta)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J31010per strumenti chirurgici
(curva)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Strumento chirurgicoJ31020
Morsetto SatinskyShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.XEC050
porta-aghiShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J32010strumento chirurgico
porta microaghiShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.WBA040per strumenti chirurgici
Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J42010pinza per tessuti per strumenti chirurgici
(con gancio)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.J41010strumento chirurgico
forbice tissutaleShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Y00040strumento chirurgico
forbici chirurgicheShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Y00030strumento chirurgico
micro forbiciShanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.per microvasi per strumenti chirurgiciMR-S121T
Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.Strumento chirurgicoXEC240
micropinze diritte (lega di titanio)Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.WCC010strumento chirurgico
micropinze curve  (lega di titanio)Shanghai Medical Instruments (Gruppo) Ltd., Corp.Strumento chirurgicoWCC020
per ad alta frequenza pinza emostatica pinza emostatica per strumenti chirurgici pinza dentata Clip

Riferimenti

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al.

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Ristampe e permessi

Tag

Tecnica a cuffiastent del dotto biliareriarterializzazione epaticafase anepaticaabilit microchirurgichesopravvivenza postoperatoria