Formazione immagine di ultrasuono ad alta frequenza del mouse fetale ha migliorato imaging ad alta risoluzione e può fornire precisa caratterizzazione non invasiva di sviluppo cardiaco e difetti strutturali. Il protocollo descritto nel presente documento è stato progettato per eseguire ecocardiografia fetale in tempo reale di topi in vivo.
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Articolo metodologico
Fetali del Mouse cardiovascolari Imaging mediante un sistema a ultrasuoni ad alta frequenza (30 / 45MHZ)
In questo articolo
Sommario
Abstract
Difetti congeniti del cuore (CHDs) sono la causa più comune di infanzia morbilità e mortalità precoce. Rilevazione prenatale i meccanismi molecolari di CHDs è cruciale per inventare nuove strategie preventive e terapeutiche. Modelli di topo mutante sono strumenti potenti per scoprire nuovi meccanismi e modificatori di stress ambientale che guidano lo sviluppo cardiaco e loro potenziale alterazione in CHDs. Tuttavia, gli sforzi per stabilire la causalità di questi presunti collaboratori sono stati limitati a studi istologici e molecolari negli esperimenti sugli animali non-sopravvivenza, nel quale monitoraggio di parametri fisiologici ed emodinamici chiave sono spesso assenti. Tecnologia di imaging dal vivo è diventata uno strumento essenziale per stabilire l'eziologia di CHDs. In particolare, l'imaging ad ultrasuoni può essere utilizzato prenatally senza esporre chirurgicamente i feti, che permette di mantenere la loro fisiologia di base durante il monitoraggio dell'impatto dello stress ambientale sugli aspetti strutturali ed emodinamici della camera cardiaca sviluppo. Nel presente documento, utilizziamo il sistema a ultrasuoni ad alta frequenza (30/45) per esaminare il sistema cardiovascolare in topi fetali al E18.5 nell'utero alla linea di base ed in risposta all'esposizione prenatale ipossia. Dimostriamo la fattibilità del sistema per misurare dimensioni camera cardiaca, morfologia, funzione ventricolare, frequenza cardiaca fetale e indici di flusso dell'arteria ombelicale e loro alterazioni fetali topi esposti ad ipossia cronica sistemica nell'utero in tempo reale tempo.
Introduzione
Malformazioni congenite del cuore sono eterogenei difetti strutturali che si verificano durante lo sviluppo cardiaco iniziale. Gli avanzamenti tecnici correnti delle procedure operative hanno condotto ai miglioramenti significativi nei tassi di sopravvivenza dei neonati con CHDs1,2. Tuttavia, la qualità della vita è spesso compromessa secondaria alle esigenze e l'ospedalizzazione prolungata per in scena riparazione chirurgica procedure1,2,3,4,5. Ril....
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Protocollo
La University of California, Los Angeles, cura degli animali e uso Comitato ha approvato tutte le procedure illustrate nel presente protocollo. Gli esperimenti sono stati condotti nell'ambito di uno studio continuo sotto protocolli animale attivi approvato dalla istituzionale Animal Care and uso Comitato della University of California, Los Angeles, California, USA. Cura e manipolazione degli animali seguiti gli standard della Guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio.
1. preparazione del sistema di Imaging a ultrasuoni ad alta frequenza
- Accendere il sistema di imaging ad ultrasuoni e l'unità di controllo di fisiologia.
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Risultati
Analisi statistiche degli indici cardiaci ed emodinamici sono state eseguite non in linea. I mezzi di 5 misurazioni consecutive in 3 immagini ottimali sono stati calcolati. I dati sono stati espressi come media ± SEM. dello studente t-test è stato utilizzato per dedurre i confronti intergruppo. Un valore P ≤ 0.05 è stato considerato statisticamente significativo.
A seguito del protocollo di cui sopra, abbiamo c.......
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Discussione
Malattie e malformazioni cardiovascolari sono sostanzialmente influenzati da fattori genetici e ambientali elementi19. Precedentemente abbiamo dimostrato un impatto significativo della restrizione calorica materna, avviata durante il secondo trimestre, il flusso circolatorio feto-placentare e funzione cardiaca fetale9.
L'ipossia prenatale è un altro fattore di stress comuni durante lo sviluppo fetale che può influenzare enormemente la fisiologia .......
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Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamenti
Ringraziamo il nucleo di fisiologia animale, divisione di medicina molecolare presso la UCLA per fornire supporto tecnico e accesso aperto al sistema Vevo 2100 ultrasuono biomicroscopy (UBM). Questo studio è stato sostenuto dal centro di ricerca di salute di NIH/bambino (5K12HD034610/K12), UCLA-bambini Discovery Institute e fondo di oggi e di domani di bambini e David Geffen School of medicina ricerca Innovation award per M. Touma.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Vevo 2100 | VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada | N/A | Biomicroscopia ad ultrasuoni ad alta libertà. La configurazione è disponibile presso la struttura di base di fisiologia animale, divisione di medicina molecolare, UCLA. Topi |
| consanguinei USA (c57/BL6) | Charles River Laboratories | N/A | Ceppo di topo selvatico Inbread |
Riferimenti
- Touma, M., Reemtsen, B., Halnon, N., Alejos, J., Finn, J. P., Nelson, S. F., Wang, Y. A Path to Implement Precision Child Health Cardiovascular Medicine. Front Cardiovasc Med. 4, 36(2017).
- Triedman, J. K., Newburger, J. W. Trends in Congenital Heart Disease. The Next Decade. Circulati....
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Ristampe e permessi
