Qui descriviamo un protocollo dettagliato per misurazioni invasive dei parametri emodinamici, compreso pressione portale, flusso sanguigno intestinale ed emodinamica sistemica al fine di caratterizzare la sindrome iperteso in ratti.
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Articolo metodologico
Emodinamico invasivo caratterizzazione della sindrome Portal-ipertesi in ratti cirrotici
In questo articolo
Sommario
Abstract
Si tratta di un protocollo dettagliato che descrive invasive misure emodinamiche in ratti cirrotici per la caratterizzazione della sindrome ipertensiva portale. Ipertensione portale (PHT) a causa di cirrosi è responsabile per le complicanze più gravi in pazienti con l'affezione epatica. Il quadro completo della sindrome ipertensiva portale è caratterizzato da aumento della pressione portale (PP) dovuto l'aumento della resistenza vascolare intraepatico (IHVR), circolazione hyperdynamic, flusso sanguigno intestinale aumentata. Vasodilatazione arteriosa splancnica progressiva e arterioso aumentato con elevata frequenza cardiaca (HR), ma bassa pressione arteriosa caratterizza la sindrome di iperteso.
Nuove terapie sono in fase di sviluppo che mirano a diminuire PP da entrambi IHVR targeting o aumentato flusso sanguigno intestinale — ma possono verificarsi effetti collaterali sull'emodinamica sistemica. Così, una dettagliata caratterizzazione del portale venosa, splancnica e parametri emodinamici sistemici, compreso la misura di PP, flusso sanguigno venoso portale (PVBF), flusso sanguigno arterioso mesenterico, pressione arteriosa media (MAP) e HR è necessaria per preclinici valutazione dell'efficacia di nuovi trattamenti per PHT. Il nostro video articolo fornisce al lettore con un protocollo strutturato per l'esecuzione di misurazioni emodinamiche invasive in ratti cirrotici. In particolare, descriviamo la cateterizzazione dell'arteria femorale e vena portale tramite una vena ileocolic e la misurazione del portale venosa e flusso sanguigno intestinale tramite sonde di flusso di Doppler-ultrasuono perivascolare. Sono mostrati risultati rappresentativi dei modelli differenti del ratto di PHT.
Introduzione
PHT è definito come patologico aumento della pressione sanguigna nel sistema venoso portale che può causare le complicazioni severe in pazienti con cirrosi come spurgo variceal e ascite1. Pre-epatico (ad es., trombosi della vena portale) e post-epatica (ad es., sindrome di Budd-Chiari), mentre PHT sono rare, intraepatica PHT a causa di cirrosi epatica rappresenta la causa più comune di PHT2.
Nella cirrosi epatica, PP principalmente è aumentato in conseguenza di elevati IHVR3. Nelle fasi avanzate, PHT è aggravato dal PVBF aumentato a causa di una maggio....
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Protocollo
Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal comitato etico dell'Università di medicina di Vienna e il Ministero austriaco della scienza, ricerca ed economia (BMWFW). Le procedure devono essere eseguite in condizioni asettiche in una sala operatoria o simili pulire l'area di lavoro poiché le misure emodinamiche rappresentano gli interventi chirurgici. Generalmente, lavorando in condizioni di sterilità è raccomandato. Quando si utilizza un'anestesia per inalazione, considerare un'adeguata ventilazione della sala operatoria per sicurezza sul lavoro. Un periodo di tempo di 40 – 50 min/animale deve essere considerato nel caso tutte le letture emodinamiche present....
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Risultati
A seconda del modello animale e la severità dell'affezione epatica, il grado di PHT e la severità della sindrome ipertensiva portale è diverso (Figura 7).
Il modello BDL provoca cirrosi biliare dovuto colestasi. Di conseguenza, PP aumenta nel tempo e un hyperdynamic circolazione si sviluppa, come visto da un aumento di HR e diminuzione della mappa. Negli animali cirrotici, SMABF, PVBF e IHVR anche a.......
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Discussione
PP è il parametro principale di risultato per la valutazione della sindrome iperteso e riflette la gravità della cirrosi sottostante. Sia la deposizione di matrice (cioè, fibrosi) e vasocostrizione sinusoidale (causa di aumentata espressione epatica di vasocostrittori e risposta ai vasodilatatori in diminuzione) causare aumento IHVR. L'importanza di PP e il suo impatto sull'affezione epatica cronica è stato dimostrato in più preclinici11,12,
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Ringraziamo i veterinari, infermieri e detentori di animali presso il centro di ricerca biomedica per il continuo supporto durante i nostri progetti di ricerca. Gli autori riconoscono l'importante contributo di tutti gli ospiti del presente protocollo. Alcune delle ricerche è stato finanziato dal "Young Science Award" della società austriaca di gastroenterologia ed epatologia (ÖGGH) per PS e il premio"Skoda" della società austriaca di medicina interna a TR.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Instruments | |||
| LabChart 7 Pro software | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA& | nbsp;- | Software |
| ML870 PowerLab 8/30 | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA& | nbsp;- | Electronic multichannel recorder |
| >MLT0380/D | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Trasduttore di pressione (x2: per Portal Pressure e Pressione arteriosa) |
| ML112 Amplificatore a ponte quadruplo | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Amplificatore a ponte |
| TS420 | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | > | |
| Ricerca biologica Apparecchio 7025 | UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italia& | nbsp;- | Ventilatore |
| Vapor 2000 | Drä ger Medical AG & Co. KG, Lü beck, Germania | - | Vaporizzatore isofluran |
| Sonde perivascolari (ratto) per sistemi transonici (arteria mesenterica superiore) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | Sonda di flusso ultrasonica (1mm) | |
| Sonde perivascolari (ratto) per sistemi transonici (vena portale) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | Sonda di flusso ultrasonica ( 2mm) | |
| 1° per l'intubazione & 2° per incisioni cutanee pulite | - | - | Forbice Mayo [x2] |
| Forbice Metzenbaum | - - | - | |
| Forbice cuticola | - - | ;- - | |
| ad es. Pinza | per tessuti Adson Brown- | Pinze per tessuti | |
| Pinza a punta larga ad alta precisione con angolo di 45 gradi [x2] | - | - | |
| Emostatico [x4] | - | - | -ad |
| es. Morsetto peritoneale Mikulicz | -& | nbsp;- | Morsetto curvo |
| . morsetto Dieffenbach | - | - | Micro morsetto |
| es. micro spatola con estremità piatte, larghezza 4 mm, | - | < | em>Micro spatola metallica |
| per sutura transbuccale durante l'intubazione | - | - | Porta ago |
| >Impugnatura bisturi | - | - | |
| autocostruito | - | < | em>Banco per intubazione |
| blut, flessibile e con un diametro adatto per cannula arteriosa e venflow | - | - | Blunt filo d'acciaio |
| linea arteriosa modificata 20G con Flowstich | Becton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK | #682245 | Linea arteriosa |
| Pad riscaldante | - - | ||
| Sonda di temeratura rettale | - - | ||
| Riscaldatore salino | - | ||
| Laringoscopio (specifico per animali di taglia, ad es. ratto) | - | -& | nbsp;- |
| Inductionbox per anestesia per inalazione | - - | ||
| Scala (in grado di misurare mg) | - | ||
| Tagliacapelli | - | - - | - |
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Comments |
| Materiali di consumo | |||
| ad es. modificato BD Venflon Pro Safety 14GA | Becton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Svezia | #393230 | Catetere venoso periferico (14G) |
| Tubo in polietilene a foro fine, ID 0,58 mm, OD 0,96 mm, Portex,Smiths | Medical International Ltd., Kent, Regno Unito# | 800/100/200 | Tubo per catetere (PE-50) |
| ad es. Omnifix-F Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germania#9161406V | Siringa 1mL | |
| es. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germania | #4606051V | Siringa 5mL |
| . Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germania | #4606205V | Siringa 20mL |
| . BD Microlance 3, 18G - 1 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spagna | #304622 | Cannula (18G) |
| p.e. BD Microlance 3, 23G - 1" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spagna | #300800 | Cannula (23G) |
| es. BD Microlance 3, 30G - 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spagna | #304000 | Cannula (30G) |
| . Leukoplast S | BSN medical GmbH, Amburgo, Germania | #47619-00 | Nastro adesivo |
| es. Gazin RK Mullkompressen (18x8cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10972 | Impacco di garza (piccolo) |
| es. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10961 | Impacco di garza (grande) |
| Seta intrecciata nero, USP 4/0, EP 1.5 | SMI AG, St. Vith, Belgio | #2021-04 | Suture (Seta 4/0, EP 1.5) |
| es. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 Prime | Johnson & Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Germania | #EH7552 | Sutura transbuccale |
| es. Cotton buds (2,2 mm, 15 cm) | Paul Hartmann AG, Heidenheim, Germania | #967936 | Cotton fiocs |
| es. Vue Ultrasoundgel | Optimum Medical Limited, UK | #1157 | Gel per ultrasuoni |
| es. Glubran 2 | Gem srl, Viareggio, Italia | #G-NB2-50 | Colla per tessuti |
| es. Coltello per bisturi chirurgico Nr. 10 - acciaio al carbonio | Swann-Morton, Inghilterra, B.S. | #202 | Bisturi Knife |
| Heparin, 5000 i.E./mL (Natriumheparin) | Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mü rztal, Austria | - | Eparina |
| Florane | Aesica Queenborough Ltd., Queenborough, Regno Unito& | nbsp;- | Isoflurane |
| OeloVital (5g) | Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria | - | Eye gel |
| Ketasol | aniMedica GmbH, Senden-Bö sensell, Germania | - | Ketamina |
| Rompun | Bayer Austria Ges.m.b.H., Vienna, Austria& | nbsp;- | xilazina |
| xilocaina 10% pumpspray | astraZeneca ö sterreich GmbH, Vienna, Austria | - | Pompa per lidocaina spray |
| Dipidolor | Jansen-Cilag Pharma GmbH, Vienna, Austria | - | Piritramide |
| NaCl 0,9% Fresenius, 1L | Fresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Austria | #13LIP132 | Soluzione salina fisiologica |
Riferimenti
- Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).
- Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H.
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Ristampe e permessi
