Analisi della concentrazione del cortisolo capelli fornisce un'alternativa alle tradizionali misure di cortisolo; Tuttavia, per raccogliere campioni di capelli da afro-americani, gli scienziati hanno bisogno di essere culturalmente informato e competente. Lo scopo del presente protocollo è quello di illustrare una tecnica culturalmente informata per raccogliere campioni di capelli per l'analisi di cortisolo da afro-americani.
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Articolo metodologico
Raccolta dei campioni di capelli per capelli cortisolo analisi negli afro-americani
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il cortisolo, l'ormone è in genere valutato in saliva, siero o campioni di urina. Più recentemente, il cortisolo è stato estratto correttamente dai capelli, compreso gli esseri umani. Il vantaggio della concentrazione del cortisolo di capelli è che essa riflette una retrospettiva rappresentazione della funzione di asse ipotalamo-ipofisi-surrene (HPA), nel tempo, tanto come l'emoglobina A1C rappresenta il controllo glycemic. Tuttavia, come ottenere campioni di capelli può essere difficile, a causa delle credenze culturali e pratiche di cura di capelli dei partecipanti di minoranza. Ad esempio, gli afro-americani possono essere riluttanti a fornire campioni. Inoltre, alcuni ricercatori sono addestrati a raccogliere campioni di capelli da afro-americani. Lo scopo di questa carta è di presentare un protocollo culturalmente informato per aiutare i ricercatori ad ottenere campioni di capelli da afro-americani. Per illustrare i risultati rappresentativi di questa implementazione del protocollo, sono forniti i dati da afro-americani che hanno partecipato a uno studio comunitario sullo stress cronico. Preferenze di pratica di capelli sono valutate. I partecipanti sono reso confortevoli mostrando immagini di campioni di capelli prima del taglio dei loro capelli. Il singolo ceppo torsione e delicatamente metodo pull è utilizzato per raccogliere circa 30-50 ciocche di capelli da regione di vertice posteriore del cuoio capelluto. Questo protocollo migliorerà significativamente la raccolta di campioni di capelli di afro-americani.
Introduzione
Raccolta dei campioni di saliva, sangue o urina per l'analisi del cortisolo ha sfide uniche procedurale e maggiore onere partecipante, come la procedura richiede più campioni di saliva, campioni di prelievo o raccolta delle urine delle 24 ore. L'ottenimento di cortisolo da campioni di capelli è un'alternativa semplice e accettabile per utilizzando campioni di saliva, siero o urina1,2. Cortisolo capelli fornisce una rappresentazione retrospettiva della funzione di asse ipotalamo-ipofisi-surrene (HPA) nel corso del tempo. Circa 3 cm di capelli raccolti dal cuoio capelluto è uguale alla media rilascio di cortisolo negli ultimi 3 mesi1. Tuttavia, i ricercatori incontrano sfide uniche quando si tenta di raccogliere campioni di capelli attraverso diverse popolazioni. Tali sfide comprendono le convinzioni religiose o spirituali, tra cui esporre i capelli (ad esempio, le donne musulmane), capelli come sacro (gruppi di indiani d'America), o norme culturali che collegano capelli agli standard di bellezza e immagine di sé.
Nella cultura afro-americana, specialmente fra le donne, i capelli del cuoio capelluto sono un aspetto molto personale e importante della loro immagine corporea3,4. Esperienze più ulteriormente, storiche (ad es., gli esperimenti di Tuskegee) continuano a promuovere la sfiducia nel processo ricerca5. Alcuni folklore afroamericano e credenze culturali suggeriscono anche che il campione di capelli potrebbe essere utilizzato nei rituali che potrebbero causare danno6,7. I ricercatori dovrebbero essere informati delle sfide potenziali che possono affrontare negli studi quando afroamericano ai partecipanti viene chiesto di fornire campioni di capelli.
Oltre alle questioni che circondano l'immagine del corpo, le specifiche tecniche per la raccolta e manipolazione dei campioni di capelli da afro-americani potrebbero differire da quello di americani europei6,7. Ad esempio, gli afro-americani possono avere dritto, sottili, Ricci, kinky, grossolana, o una combinazione di questi tipi di capelli, ognuno dei quali richiede tecniche diverse per raccogliere e garantire adeguato capelli campioni per l'elaborazione. Recenti studi su campioni di ragazzi africani americani8, nonché campioni multietnica9, ha indicato che la raccolta di capelli per la misura di livello di cortisolo era accettabile tra i partecipanti afroamericani. Allo stato attuale, esistono procedure training visivo progettate per fornire ai ricercatori con l'abilità e la conoscenza culturale per raccogliere campioni di capelli negli afro-americani. Lo scopo di questa carta è di presentare un protocollo culturalmente informato per aiutare i ricercatori ad ottenere campioni di capelli adeguato da partecipanti afroamericani. Questo metodo è stato sviluppato con un attento esame delle caratteristiche fisiche, psicosociali e culturale pertinenti alla raccolta di campioni di capelli da adulti afro-americani. Ad oggi, non esistono metodi visual di raccolta di questi campioni, e questo protocollo sarà il primo guida la raccolta del campione adeguata dei capelli dettagli da adulti afro-americani. Per illustrare i risultati rappresentativi di implementazione del protocollo, i dati sono presentati da afro-americani che hanno partecipato a uno studio comunitario sullo stress cronico che sono stati invecchiati 65 e più vecchio. Entrambi gli assistenti di ricerca maschio e femmina da una varietà di ambiti di provenienza razziali contattato potenziali partecipanti da un elenco di clinica generato e volantini. Il ricercatore primario, che è una donna afro-americana, ha parlato a centri comunitari e appartamenti alloggiamento sovvenzionati senior agli afroamericani in adulti più anziani circa lo studio, compresa una descrizione dei metodi di raccolta di capelli.
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Protocollo
Lo studio è approvato dall'Università ospedali Cleveland Medical Center istituzionale Review Board, e il protocollo segue le linee guida del partecipante protezione e sicurezza dei dati, come indicato dal comitato di revisione.
1. preparare il partecipante per il campione di capelli e capelli campione raccolta domande
- Spiegare al partecipante che il campione di capelli raccolto è meno capelli rispetto che si perde normalmente nella spazzolatura ogni giorno dalla parte posteriore della testa (vertice posteriore). Raccontare il partecipante che il sito per il campione di capelli è nascosta dai capelli circostanti e, pertanto, non è visibile dopo la raccolta. Informare il partecipante per misurare un ormone chiamato cortisolo presente nei capelli10,11verrà utilizzato nell'esempio.
- Eliminare l'immagine di esempio e mostrare il partecipante la quantità di capelli che saranno raccolti (30-50 capi).
Nota: Vedere la Figura 1 per la foto di un campione di capelli. - Chiedere il partecipante il capelli cura pratica12 domande elencate nella tabella 1.
2. raccogliere il campione di capelli
- Raccontare il partecipante che il campione è raccolto in una zona privata dietro un portatile partizione, tenda o porta chiusa. Assicurare i partecipanti che, se indossano una parrucca o parrucchino, i capelli non sono tagliato in una zona dove gli altri possono vedere. Misurare la lunghezza dei capelli dal cuoio capelluto alla fine tirando i capelli delicatamente e teso.
- Se il pelo è corto (meno di 3 cm), seguire il protocollo di capelli corti nel passaggio 3 (anche se se i capelli sono meno di 1 cm di lunghezza, il campione non può essere raccolto e, idealmente, i capelli devono essere almeno 3 cm di lunghezza). Per capelli più lunghi di 6 cm, seguire il protocollo di capelli lunghi nel passaggio 4. In caso contrario, continuare con il passaggio successivo.
- Verificare che i materiali siano pronti inserendo i rifornimenti di taglio di capelli (un foglio di stagnola, busta di affari, salone grado forbici, pettine a denti piccoli e grandi divisione, preps alcol, nastro pittori, pennarello indelebile, guanti non in lattice [opzionale] e capelli clip)10 su una superficie accanto al partecipante. Pulire le forbici e pettine con il tampone imbevuto di alcool preparazione prima di prelevare il campione. Tagliare un 8 x 10" foglio di alluminio da utilizzare per il campione.
- Indossare guanti non in lattice. Prendere il pettine e parte i capelli orizzontalmente lungo il vertice posteriore del cuoio capelluto tra le punte delle orecchie.
- Prendere una clip e spostare i capelli dalla parte superiore della parte, poi posto un'altra clip nella parte inferiore per esporre un rettangolo di 5 x 10 cm tra i due clip di capelli sciolti (circa le dimensioni di un mazzo di carte da gioco).
- Chiedere il partecipante se preferiscono utilizzare un largo dente o un pettine a denti stretti attraverso il rettangolo di 2-3" di capelli. Chiedere il partecipante come lei o lui piacerebbe avere i capelli rimanenti nel pettine scartato. Dare ai capelli nel pettine al partecipante, o, se (e solo se) il partecipante afferma che va bene eliminare i capelli sciolti, scartare i capelli rimanenti dal pettine in un cestino.
- Circa il 30-50 ciocche di capelli a destra del rettangolo 2-3" di afferrare e tirare delicatamente e torcere i capelli dal cuoio capelluto in un movimento di rotolamento tra le dita.
- Garantire che il campione è raccolto più vicino il cuoio capelluto come possibile, ma non si tagliare il cuoio capelluto. Usare le forbici parrucchiere-grado e fare un taglio pulito dritto.
- Afferrare il campione di capelli e garantire che il fine principale è allineato con cura lungo il taglio.
- Fissare i capelli al foglio di carta stagnola da taping con nastro pittore. Non coprire l'estremità del cuoio capelluto e non utilizzare nastro pittore sui capelli che è uguale o inferiore a 3 cm. posto piede libero ritagliare i capelli al centro della lamina e piega in un quadrato, assicurando che i capelli non cadono fuori la pellicola.
- Prendere il marcatore e assegnare un'etichetta alla fine di cuoio capelluto sulla lamina di alluminio. Utilizzare etichette con codice a barre premade per allegare alla lamina e busta.
- Piegare il foglio di alluminio senza piegare i capelli all'estremità del cuoio capelluto per prevenire la testata del letto (spiegazzato e piegate i capelli), inserirlo nella busta in formato commerciale e sigillare.
- Etichetta all'esterno della busta con numero di identificazione unico studio del partecipante, data e il nome del ricercatore principale, o se disponibile, utilizzare un'etichetta di codice a barre.
- Conservare il campione in un luogo asciutto a temperatura ambiente.
3. campionario per capelli corti (1-3 cm)
- Seguire i passaggi 2.3 e 2.4.
- Dopo la divisione, chiedere al partecipante di tenere i capelli parted vicino al cuoio capelluto. Tagliare i capelli lungo la parte, tenendo i capelli strettamente con il dito indice e pollice10.
- Posizionare i capelli sciolti in un foglio e piegarlo in modo sicuro. Nastro non i capelli all'estruso.
- Seguire i passaggi 2.11 attraverso 2.14.
4. campionario per capelli lunghi (più di 6 cm)
- Parte i capelli da sinistra a destra al vertice posteriore.
- Utilizzare la clip di capelli per tenere indietro i capelli supplementari.
- Creare un tocco di capelli e tenere saldamente con il dito indice e il pollice per non far cadere il campione10.
- Fare un taglio pulito dritto come vicino al cuoio capelluto come possibile. Raccogliere 30-50 ciocche di capelli.
- Se il partecipante ha capelli sottili, poi tagliare 2-3 piccole aree (1 cm di distanza) attraverso il vertice posteriore per nascondere il sito del taglio.
- Seguire i passaggi 2.10 attraverso 2.14.
5. trattamento del campione
- Memorizzare i pacchetti di stagnola contenente il campione di capelli a temperatura ambiente a tempo indeterminato fino all'analisi.
Nota: Capelli cortisolo è estremamente stabile in capelli e possa essere conservato per anni. Infatti, il cortisolo è stato misurato nei campioni di capelli dai resti mummificati11. - Analizzare il cortisolo capelli come precedentemente pubblicati12. I campioni possono essere spediti durante la notte a temperatura ambiente.
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Risultati
Nel nostro studio, ventuno afroamericani (età media = 75; SD = 6,9; 85% femmine) ha acconsentito a partecipare. Quattro partecipanti (19%) ha rifiutato di fornire un campione di capelli e due (9,5%) non ha potuto fornire un campione perché i capelli è stato troppo brevi. Un totale di 15 campioni di capelli sono stati ottenuti ed elaborati (tabella 2). La lunghezza dei campioni dei capelli che sono stati elaborati hanno variato da 1 cm a 4,8 cm. problemi tecnici, compresi ...
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Discussione
Passi fondamentali nel protocollo di raccolta di capelli comprende fornendo un esempio di quanti capelli saranno prese, mostrando il sito di esempio (posteriore vortice), utilizzare della torsione singolo ceppo e tirare delicatamente il metodo e la protezione del campione con nastro pittore lontano dal fine del cuoio capelluto. Delicatamente ruotando e tirando il campione, i capelli ricci sono allungato e l'allineamento di fine del cuoio capelluto è mantenuto. Questo riduce il tempo di laboratorio necessario per allinear...
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Dichiarazioni
Il laboratorio di endocrinologia e immunologia comportamentale è designato come un laboratorio di eccellenza di Salimetrics, LLC.
Ringraziamenti
Questa pubblicazione è stata resa possibile dalla clinica e traslazionale Science Collaborative di Cleveland; KL2TR000440 dal centro nazionale per la componente traslazionale avanzando di Scienze (NCATS) dei National Institutes of Health; e NIH Roadmap per la ricerca medica. Lavoro di Dr. Jodi Ford in quest'area è stato finanziato dall'Istituto nazionale di istituti di salute nazionali sull'abuso di droga (1R21DA034960) e l'Ohio State University Institute per le sementi di ricerca della popolazione concedere finanziamenti dal National Institute of Child Health e Sviluppo (2P2CHD058484). Il contenuto è di esclusiva responsabilità degli autori e non rappresentano necessariamente il punto di vista ufficiale del National Institutes of Health. Lavoro di Dr. Laudenslager in quest'area è stato finanziato da un contratto da Istituto di ricerca dei risultati Patient-Centered (CE-1304-6208), una sovvenzione da parte dell'amministrazione per bambini e famiglie (90 YR 0058) e una sovvenzione da psicobiologia dello sviluppo Fondo di dotazione del gruppo di ricerca del dipartimento di psichiatria, Università del Colorado Denver Anschutz Medical Campus.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Forbici da salone | Cricket | S-3 550 | Forbici per capelli professionali cardate, |
| pettine a denti grandi | Goody | Nessun catalogo number__Goody Stylista Rake Comb | Link al sito dell'azienda http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 |
| Pettine a denti piccoli | Goody | No catalogo number_ Goody Start.Style.Finish. Link al sito web dell'azienda http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| Preparazioni per alcolici | Kendall Webcol Preparazioni per alcolici | Nessun numero di catalogo. Kendall Webcol Alcohol Preps | https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps |
| Nastro da pittore | 3M Scotch | ScotchBlue ORIGINALE Pittore' s Tape | https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/ |
| Pennarello indelebile | Sharpie | Nero Sharpie Fine Point | http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html |
| Guanti non in lattice Prot | é gé | 93997 | Protetto® Guanti da esplorazione senza polvere di nitrile http://aureliagloves.com/product/protege/ |
| fermagli per capelli | Goody | Goody Start.Style.Finish. Curl Clips | http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips |
| Busta | Ufficio Depo | 330808 | Ufficio Depot® Marca Chiusura Buste, 9 "x 12", Marrone, Scatola Da 100 |
| fogli di alluminio | Scelta | 1229105 | Scatola da 500 fogli Fogli di alluminio pop-up interfogliati per servizi di ristorazione |
| Crioviale pre-pesato da 2 ml | Wheaton, Millville, NJ, USA | W985902 | |
| 100% isopropanolo | Spettro | I1275 | 67-63-0 | |
| Azoto liquido | Magazzino per bombole di gas | dei | negozi dell'Università dello Stato dell'Ohio |
| cuscinetto a sfere in acciaio inossidabile | McMasterCarr | 9291K42 | https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0 |
| Cassette in alluminio appositamente fresate | FisherScientific | Retsch 20.745.0001 | |
| Metanolo di grado HPLC | FisherScientific | A452N1-19 | https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129 |
| Provetta per microcentrifuga | Eppendorf North America | 22363352 | https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212 |
| Kit ELISA per cortisolo | Salimetrics LLC, State College, PA, USA | 1-3002 (5PK 1-3002-5) | https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit |
| Centtrifugo per la provetta per micorcentrifuga | Beckman Coulter | Microfuge serie 20 | http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge |
Riferimenti
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