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Articolo metodologico

Trattamento con vancomicina caricato di solfato di calcio e dell'osso autogeno in un modello di coniglio migliorata dell'infezione dell'osso

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DOI:

10.3791/57294

14 marzo 2019

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Questo studio presenta un coniglio migliorato modello infettato da Staphylococcus aureus bloccando la stessa quantità di batteri nel midollo osseo. Vancomicina caricato di solfato di calcio e dell'osso autogeno sono utilizzati per il trattamento di riparazione dell'osso e antibiotico. Il protocollo potrebbe essere utile per studiare l'infezione dell'osso e la rigenerazione.

Abstract

Risultati di infezione dell'osso dall'invasione batterica, che è estremamente difficile da trattare in chirurgia clinica, ortopedica e traumatica. L'infezione ossea può provocare l'infiammazione continua, osteomielite ed eventuale osso non-Unione. Istituzione di un modello animale fattibile, riproducibile è importante alle ossa ricerca di infezione e di trattamento antibiotico. Come un modello in vivo, il modello di coniglio è ampiamente usato nella ricerca di infezione dell'osso. Tuttavia, gli studi precedenti sul coniglio dell'osso ha mostrati che lo stato di infezione era incoerente, così come la quantità di batteri variabile di modelli di infezione. Questo studio presenta un metodo chirurgico migliore per indurre l'infezione dell'osso su un coniglio, bloccando i batteri nel midollo osseo. Quindi, valutazioni multi-livelli possono essere effettuate per verificare il metodo di modellazione.

In generale, sbrigliamento del tessuto necrotico e l'impianto di solfato di calcio di vancomicina-caricato (VCS) sono predominanti nel trattamento antibiotico. Sebbene il solfato di calcio in VCS benefici Osteocita strisciando e nuova crescita ossea, voluminosa dell'osso difetti si verificano dopo rimuovere il tessuto morto. L'osso autogeno (AB) è una strategia interessante per superare i difetti dell'osso per il trattamento di difetti ossei massiccia dopo rimuovere il tessuto morto osso necrotico.

In questo studio, abbiamo usato l'osso della coda come un osso autologo impiantato nel difetto osseo. Riparazione ossea è stata misurata utilizzando micro-computare-tomografia (micro-CT) e l'analisi istologica dopo sacrificio animale. Di conseguenza, nel gruppo VCS, non-Unione dell'osso è stata ottenuta costantemente. Al contrario, le zone di difetto dell'osso nel gruppo VCS-AB sono state diminuite significativamente. Il presente metodo di modellazione descritto un metodo riproducibile, fattibile, stabile per preparare un modello di infezione dell'osso. Il trattamento di VCS-AB è provocato da tassi più bassi di pseudoartrosi dell'osso dopo il trattamento antibiotico. Il modello di infezione migliore dell'osso e il trattamento di combinazione di VCS e osso autogeno potrebbe essere utile per studiare i meccanismi di fondo nella rigenerazione ossea dell'osso e infezione pertinente per applicazioni ortopediche di traumatologia.

Introduzione

L'infezione dell'osso provoca solitamente da batteri o altri invasione microorganismo dopo traumi, fratture ossee o altre malattie di osso1. L'infezione dell'osso può indurre un alto livello di distruzione del tessuto dell'osso e l'infiammazione. Nella clinica, lo Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) è l'agente causativo predominante di osso infezione2,3. L'infezione dell'osso è doloroso e debilitante e spesso assume un decorso cronico che è estremamente difficile da trattare4. Allo stato attuale, lo sbrigliamento del tessuto necrotico ....

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Protocollo

I conigli utilizzati nel presente studio sono stati trattati in conformità con la guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio. Tutte le procedure sperimentali sono state seguite dalle regole di bioetica Comitato di Zhejiang Accademia di medicina tradizionale cinese.

1. preparazione della sospensione batterica

  1. Sciogliere 0,5 mg di S. aureus liofilizzazione polvere (ATCC 6538) con 0,3 mL di terreno di coltura di Luria-Bertani. Mescolare la sospensione completamente.
  2. Inoculare la sospensione di batteri su piastre di agar soia triptico ed incubare le colonie batteriche a 37 ° C per 16 h.
  3. Selezionar....

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Risultati

Valutazione del modello di infezione dell'osso
Dopo l'infezione con S. aureus, le manifestazioni patologiche dei conigli erano simili al sintomo rappresentativo di osteomielite cronica nella clinica. Nel nostro studio, 30 conigli sono stati infettati e sottomesso come un gruppo di modello, e 10 conigli sono stati sottoposti come animali di controllo. Tutti i conigli di modello hanno infettato i seni del sito locale di tibia, con pus bianco e giallo sul flusso .......

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Discussione

Negli studi precedenti, sono stati costruiti vari tipi di modelli animali per studiare sia l'infezione acuta e cronica dell'osso; Tuttavia, la ricerca per il modello ideale persiste ancora17,18. Inoltre, il modello di infezione ossea ideale è previsto per simulare le caratteristiche patologiche di infezione ossea in ambiente clinico, mentre i periodi di modellazione, rimanere basso costo e facile da realizzare. Finora, il modello di infezione dell'osso di conigli.......

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Dichiarazioni

Gli autori non segnalano conflitti di interesse in questo lavoro.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato supportato dal National Foundation Natural Science of China (81803808, 81873062), Zhejiang Provincial Medical Health Science e Technology Fund (2017KY271) e scienza e tecnologia progetto della provincia del Zhejiang (2017 37181).

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
sutura chirurgica riassorbibileJinghuan18S0604A
iniettore di asepsiJinglongcera ossea 20170501
ETHICONJH5CQLM
Telecamera CCD VasoOlympusDP72
EDTA-K2XINGE20170802
Unità di perforazione ossea elettricaBao KangBKZ-1
Rasoio elettricoCodos3800
stampo flessibile in gel di silice WRIGHT1527745
Kit di colorazione per ematossilina ed eosinaBeyotime20170523
terreno di coltura Luria-BertaniBaisi Biothchnology20170306
Solfato di calcio per uso medicoWRIGHT1527745
tomografia microcomputerizzata (micro-CT)BrukerSkyScan 1172 
MicroscopioOlympusCX41
Conigli bianchi della Nuova ZelandaZhejiang Experimental Animal Center SCXK 2014-0047
n. 11 bisturiYuanlikang20170604
soluzione salina normaleMingsheng20170903
PBSTBD (Jingyi)20170703-0592
pentobarbital sodicoMerk2070124
soluzione di iodio povidoneLierkang20170114
S. aureus< / em> polvere liofilizzataCina General Microbiological Centro di raccolta della colturaATCC 6538
agar sangue di pecoraHuanKai Microbial3103210
piastre di agar di soia tripticaHuanKai Microbial3105697
tubi di brodo di soia tripticoHuanKai Microbial3104260
VancomicinaLillyC599180
sanguigno anticoagulante

Riferimenti

  1. Malizos, K. N. Global Forum: The Burden of Bone and Joint Infection: A Growing Demand for More Resources. Journal of Bone and Joint Surgery-American Volume. 99, 20(2017).
  2. Peeters, O.

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Ristampe e permessi

Tag

Modello di infezione osseaimpianto di osso autologoinfezione della tibia di coniglioanalisi Micro CTanalisi istologicavalutazione della rigenerazione osseasospensione di Staphylococcus aureusbloccaggio con cera osseatrapianto osseo caudale