Il presente protocollo descrive la procedura per ottenere la trombosi venosa utilizzando un modello di stasi. Inoltre, stiamo utilizzando un metodo non invasivo per misurare la formazione dell'embolo e risoluzione nel tempo.
Articolo metodologico
Il presente protocollo descrive la procedura per ottenere la trombosi venosa utilizzando un modello di stasi. Inoltre, stiamo utilizzando un metodo non invasivo per misurare la formazione dell'embolo e risoluzione nel tempo.
La trombosi venosa è una condizione comune che colpisce 1-2% della popolazione, con un'incidenza annuale di 1 su 500. Trombosi venosa profonda può condurre alla morte attraverso l'embolia polmonare o risultati nella sindrome post-trombotica, caratterizzata da dolore cronico alla gamba, il gonfiamento e l'ulcerazione, o nell'ipertensione polmonare cronica conseguente significativo cronica delle vie respiratorie compromesso. Questa è la più comune malattia cardiovascolare dopo infarto miocardico e ictus ischemico ed è una sfida clinica per tutte le discipline mediche, come può complicare il corso di altre malattie come il cancro, la malattia sistematica, chirurgia e trauma principale.
Modelli sperimentali sono necessari per lo studio di questi meccanismi. Il modello di stasi induce embolo coerente dimensione e una quantità quantificabile dell'embolo. Tuttavia, è necessario sistematicamente lega i rami laterali della vena cava inferiore per evitare la variabilità nelle dimensioni dell'embolo e qualsiasi interpretazione di dati errati. Abbiamo sviluppato una tecnica non invasiva per misurare la dimensione dell'embolo usando l'ecografia. Utilizzando questa tecnica, che possiamo valutare lo sviluppo dell'embolo e risoluzione nel tempo dello stesso animale. Questo approccio limita il numero di topi necessaria per la quantificazione di coerenza con il principio di sostituzione, riduzione e perfezionamento degli animali nella ricerca di trombosi venosa. Abbiamo dimostrato che il peso dell'embolo e l'analisi istologica di embolo dimensione correlano con la misura ottenuta con l'ecografia. Pertanto, lo studio corrente descrive come indurre trombosi profonda della vena in topi utilizzando il modello di stasi della vena cava inferiore e come monitorare utilizzando ultrasuoni ad alta frequenza.
Tromboembolismo venoso (TEV), che è composto di trombosi venosa profonda (TVP) ed embolia polmonare, è la terza causa di morte cardiovascolare dopo infarto miocardico e ictus. È una condizione comune che colpisce 1-2% della popolazione, con un'incidenza annuale di 1 su 5001. VTE può portare a: 1) morte attraverso embolia polmonare; 2) post-trombotica sindrome, caratterizzata da dolore cronico alla gamba, il gonfiamento e l'ulcerazione; o 3) ipertensione polmonare cronica conseguente compromesso respiratorio cronico significativo. TEV è una malattia multi-fattoriale e può derivare da stasi del flusso sanguigno, danni alle pareti del vaso, e/o st....
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Tutte le procedure sono state approvate dal istituzionale animale cura Comitato della McGill University Montreal, QC, Canada. Tutte le attrezzature necessarie sono elencata nella tabella I.
1. murino (C57BL/6J) IVC stasi protocollo
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Modello di trombosi venosa stasi
Nel modello di stasi, topi sono anestetizzati e un'incisione è fatta per esporre la vena cava inferiore (IVC). L'incisione è fatta sul lato sinistro o destro del mouse invece di una laparotomia mediana in un modo che non avrebbe interferito con la sonda di ultrasuono. I muscoli addominali e la pelle si piega indietro per esporre il IVC (Figura 1). In.......
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Ci sono diversi passaggi critici per la formazione del trombo venoso successo utilizzando il modello di stasi. Induzione di trombosi della vena è più impegnativo in vecchi topi dovuta all'accumulo di grasso che circonda la vena cava inferiore e l'aorta. Idealmente, i topi sottoposti a questa procedura dovrebbero essere 8 - 10 settimane fa. Dovrebbe prestare molta attenzione a non indurre danno endoteliale nell'IVC durante la dissezione smussa e la legatura. Inoltre, è fondamentale per mantenere l'animale in un'incubatric.......
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Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Questo lavoro è stato supportato da una sovvenzione dal cuore e Stroke Foundation of Canada e da The Morris e Bella Fainman Family Foundation. Gli autori vorrei ringraziare Veronique Michaud per il suo aiuto tecnico con il sistema di imaging ad ultrasuoni VEVO770.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 6-0 sutura di seta a mano permanente | Ethicon | 706G | |
| forbici chirurgiche | strumenti di scienze fini | 20830-00 | |
| pinza per legatura di sutura | strumenti di scienze fini | 20830-00 | |
| pinza smussata (diritta e curva) | strumenti di scienze fini | 20830-00 | |
| cacciavite per aghi | strumenti di scienze fini | 13002-10 | |
| Moria Forbici a molla | Strumenti per la scienza fine | 15396-00 | |
| Siringhe da 1 ml BD | Biosciences | ||
| 26G aghi | Becton Dickinson & Co. | ||
| VEVO 770 Sistema di imaging ad alta risoluzione | Visualsonics | Non più venduto | |
| SR Buprenorfina | ZooPharm | Donato a LDI da Veterinaria | |
| Chirurgia Microscopia | Leica | Leica M651 | |
| Systan unguento per gli occhi | Alcon | 288/28062-0 | |
| 2x2 garza sterile | CDMV | #104148 | |
| punta di cotone Applicatori | da JGH | ||
| Transpore nastro chirurgico ipoallergenico | CDMV | #7411 | |
| Gel per ultrasuoni (Aquasonic-100) | Dufort & Lavigne | #AKEN4061 | |
| Incubatore | da JGH | ||
| Isoflurano | Dispomed | ||
| Camera anestetica, tubi flessibili e attrezzature per l'amministrazione | Dispomed | ||
| Hair Remover | Nair | ||
| Cuscinetto duro riscaldato ad acqua | Braintree Scientific, Inc. | #HHP-2 | |
| Pompa dell'acqua di riscaldamento Gaymar TP500 | MATVET Inc. | #R-500305 | |
| Lampada riscaldante a infrarossi | electrimat inc. | #1R175R-PAR | |
| Temperatura rettale di topo prope | emkaTECHNOLOGIES | ||
| Acqua | da JGH |
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