Questo protocollo descrive la labyrinthectomy chirurgica di un topo, che è un metodo utile per lo studio del sistema vestibolare.
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Articolo metodologico
Labyrinthectomy chirurgica del ratto per studiare il sistema vestibolare
In questo articolo
Sommario
Abstract
Per studiare il sistema vestibolare o il processo di compensazione vestibolare, un numero di metodi è stato sviluppato per causare danno vestibolare, tra cui labyrinthectomy chirurgica o chimica e neurectomia vestibolare. Labyrinthectomy chirurgica è un metodo relativamente semplice, affidabile e rapido. Qui, descriviamo la tecnica chirurgica per ratto labyrinthectomy. Un'incisione postauricular fatta in anestesia generale per esporre il canale uditivo esterno e la membrana timpanica, dopo di che la membrana timpanica e gli ossicini vengono rimossi senza stapes. L'arteria dello stapes, che si trova tra la staffa e la finestra ovale, è una struttura vulnerabile e dovrà essere conservato per ottenere un campo chiaro chirurgico. Un buco a fenestrate il vestibolo è realizzato con una fresa trapano 2,1 mm superiore a stapes. Poi, 100% etanolo è iniettato attraverso questo foro e aspirato più volte. Dissezione meticolosa sotto un microscopio e un attento controllo del sanguinamento sono essenziali per ottenere risultati affidabili. Sintomi di perdita vestibolare, quali nistagmo, inclinazione testa e un movimento di rotolamento, sono visibili immediatamente dopo la chirurgia. Il test di sedia rotarod o rotazione può essere utilizzato per oggettivamente e quantitativamente valutare la funzione vestibolare.
Introduzione
L'organo vestibolare è essenziale per il controllo di equilibrio e con gli occhi. Una normale funzione vestibolare dipende simmetrici segnali afferenti dagli organi vestibolari nei due orecchi interni. Ipofunzione vestibolare o perdita induce vertigini, nistagmo e squilibrio posturale. Dopo danno acuto, la funzione vestibolare recupera spontaneamente entro alcuni giorni, un processo conosciuto come il compenso vestibolare1,2. Il compenso vestibolare dei deficit statico è un processo di recupero legata allo squilibrio dell'attività spontanea che riposa fra i nuclei vestibolari ipsilaterale e controlaterali. Il ....
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Protocollo
Questo studio è stato svolto in conformità delle istituzionali Animal Care e uso Comitato di Seoul National University Hospital (14-0148-C1A1), che è accreditato dall'associazione per la valutazione e l'accreditamento di laboratorio Animal Care Internazionale.
Nota: Gli esperimenti sono stati condotti su ratti maschi Sprague-Dawley (deviazione standard) del 7-8 settimane di età (200/250 g). Ogni animale è stati acclimatati alle condizioni di laboratorio per 1 settimana prima dell'inizio dell'esperimento. Gli animali sono stati alloggiati in una camera a temperatura e umidità controllata con una costante 12-h:12-h chiaro: scuro ciclo con lib....
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Risultati
Il successo della chirurgia è stato convalidato da test comportamentali. Tutti gli animali hanno esibito il comportamento tipico di una perdita della funzione vestibolare unilaterale. Barile-rotolamento spontaneo era evidente subito dopo della chirurgia, essere evocato da un soffio di aria sopra la testa o un tocco leggero al corpo nella fase iniziale di recupero (Video 1). 3 d dopo la chirurgia, gli animali spostati sporgendosi verso il lato leso con occasionali cade sul.......
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Discussione
Questa tecnica è un metodo utile per la creazione di perdita di funzione vestibolare improvvisa, permanente e completa. Questo potrebbe essere utilizzato per lo studio di patologie vestibolari, come neurite vestibolare, un tumore acustico e la malattia di Meniere. Molti studi hanno utilizzato questa tecnica per studiare la plasticità neuronale dei nuclei vestibolari o il relativo processo centrale5,17,18,
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Questa ricerca è stata sostenuta da una sovvenzione dalla Corea Health Technology R & D Project attraverso Corea salute industria Development Institute (KHIDI), finanziato dal Ministero della salute & benessere, Repubblica di Corea (concessione numero: HI15C2651).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| ASPIRATORE KB-012 | KOH BONG & CO., LTD. | KB-012 | Aspiratore medico |
| Lama: #15 | Fine Science Tools | #10015-00 | Lame per #7 manici per bisturi, #15 |
| Frese in acciaio al carbonio Fine | Science Tools | #19007-05 | diametro dell'albero: 2,3 mm, lunghezza: 44 mm, confezione da 10 frese |
| Carl Zeiss Surgical GmbH | Carl Zeiss | #6627100863 | Microscopio operatorio |
| Dumont #3c | Fine Science Tools | #11231-20 | Punta standard 0,17 x 0,10 mm, 11 cm |
| Dumont #5SF | Fine Science Tools | #11252-00 | |
| Dumont #7B | Fine Science Tools | #11270-20 | Seghettato 0,17 x 0,10 mm, 11 cm |
| Extra Fine Bonn: dritto | Fine Science Tools | #14084-08 | Forbici per iris, più adatte per la microdissezione ad alto ingrandimento |
| Forbici per iride fini: dritte | Fine Science Strumenti | #14094-11 | Realizzato in acciaio inossidabile martensitico, combinato con molibdeno e vanadio |
| Finger Loop Ear Punch | Fine Science Tools | #24212-01 | 1 mm. Fornisce stabilità e controllo ai ricercatori che utilizzano il sistema di numerazione |
| Hartman | Fine Science Tools | #13002-10 | Larghezza della punta: 1 cm, seghettata, 10 cm |
| Manico corto per bisturi #7 Solid | Fine Science Tools | #10003-12 | Cauterizzatore corto da 12 cm |
| piccoli vasi | Strumenti per la scienza | #18000-03 | Punta di ricambio, coltello dritto, mantiene il sanguinamento al minimo e quindi fornisce un campo chirurgico libero da morsetti ed emostatici |
| Forte 207S | SAESHIN | 207S | Coppia potente a bassa velocità, disponibile con regolatore di velocità o on/off a pedale |
| Tubi di aspirazione | JEUNGDO B& P CO., LTD. | H-1927-8 | Frazier, 18 cm |
| VICRYL | ETHICON | W9570T | Sutura chirurgica sterile sintetica assorbibile |
| Weitlaner-Locktite | Fine Science Tools | #17012-13 | Diffusione massima: 4,5 cm, 2 x 3 denti smussati, 11 cm |
| Zoletil | Virbac, Francia | Tiletamine-zolazepam | |
| Rompun | Bayer | Xylazine | |
| Rimadyl | Pfizer | Carprofene | |
| Septra | Pfizer | Trimetoprim-sulfonamide |
Riferimenti
- Curthoys, I. S., Halmagyi, G. M. Vestibular compensation: a review of the oculomotor, neural, and clinical consequences of unilateral vestibular loss. Journal of Vestibular Research. 5 (2), 67-107 (1995).
- Smith, P. F., Curthoys, I. S.
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Ristampe e permessi
