Lo scopo di questo lavoro è di descrivere un protocollo per la creazione di un pratico grasso-acqua fantasma che possa essere personalizzato per produrre fantasmi con percentuali variabili di grasso e volumi.
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Articolo metodologico
Fantasmi di grasso-acqua per la convalida di risonanza magnetica: un protocollo flessibile e scalabile
In questo articolo
Sommario
Abstract
Mentre al tessuto adiposo immagine vengono sviluppate nuove tecniche, metodi per convalidare tali protocolli stanno diventando sempre più importante. Fantasmi, repliche sperimentali di un tessuto o organo di interesse, fornire una soluzione a basso costo, flessibile. Tuttavia, senza accesso ad attrezzature costose e specializzate, costruzione stabili fantasmi con alte frazioni di grasso (ad es., > livelli 50% frazione grassa come quelli visti in tessuto adiposo marrone) può essere difficile dovuto la natura idrofobica dei lipidi. Questo lavoro presenta un protocollo dettagliato, a basso costo per la creazione di fantasmi di 5 x 100 mL con grasse frazioni di 0%, 25%, 50%, 75% e 100% utilizzando componenti facilmente accessibili (acqua distillata, agar, solubile in acqua e forniture di base del laboratorio (piastra, bicchieri, ecc.) tensioattivo, benzoato di sodio, agente di contrasto gadolinio-diethylenetriaminepentacetate (DTPA), olio di arachidi e tensioattivo solubile nell'olio). Il protocollo è stato progettato per essere flessibile; può essere utilizzato per creare fantasmi con diverse frazioni di grasso e una vasta gamma di volumi. Fantasmi creati con questa tecnica sono stati valutati nello studio di fattibilità che rispetto i valori di frazione grassa da imaging a risonanza magnetica di grasso-acqua per i valori di destinazione nei fantasmi costruiti. Questo studio ha prodotto un coefficiente di correlazione concordanza di 0,998 (intervallo di confidenza 95%: 0,972-1.00). In sintesi, questi studi dimostrano l'utilità dei fantasmi di grasso per la convalida di tessuto adiposo, tecniche di imaging in tutta una gamma di organi e tessuti clinicamente rilevanti.
Introduzione
Interesse nella quantificazione del tessuto adiposo e trigliceridi contenuti utilizzando modalità di imaging, come la formazione immagine a risonanza magnetica (MRI), si estende in molti campi. Aree di ricerca includono l'indagine dei depositi di tessuto adiposo bianco e Bruno e deposito ectopico del lipido in organi e tessuti quali il fegato1, pancreas2e muscolo scheletrico3. Queste nuove tecniche per la quantificazione adiposi sono sviluppati, i metodi sono necessari per confermare che parametri di imaging sono validi per la ricerca e applicazioni cliniche.
Fantasmi, ....
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Protocollo
1. preparare le Workstation e i materiali
- Rispettare tutte le regole di sicurezza di laboratorio. Indossare guanti e occhiali di protezione. Leggi il foglio di dati materiale di sicurezza per ciascuno dei reagenti utilizzati e prendere le opportune precauzioni. Esaminare i materiali ed elenco delle attrezzature, procedure di manipolazione di prodotti chimici e cristalleria precauzioni.
Attenzione: Questo protocollo richiede l'uso di una piastra riscaldante a temperature elevate. Usare cautela e indossare guanti resistenti al calore quando interagendo con contenitori a caldo e non toccare la superficie della piastra riscaldante. - Cancellare l'area....
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Risultati
Se la soluzione dell'acqua è stata preparata correttamente, una piccola quantità della soluzione dovrebbe congelare rapidamente in una fiala di test (Figura 1, sinistra). Se la soluzione separa (Figura 1, destra), la soluzione deve essere preparata nuovamente (come indicato nel passaggio 3.8 del protocollo). Se l'emulsione separa (esempi in Figura 2, sinistra.......
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Discussione
Descriviamo un metodo affidabile per creare fantasmi acqua grasso adatto per convalidare le tecniche di imaging mediche utilizzate per quantificare il contenuto del trigliceride e del tessuto adiposo in vivo. Creando due serbatoi (uno per la soluzione di olio) e uno per la soluzione di acqua, fantasmi stabili con una varietà di valori FF – compresi i valori superiori al 50% – sono stati costruiti senza bisogno di costose attrezzature. Fantasmi di FF alti (> 50%) forniscono l'utilità affinché le tecniche di imagi.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano che la ricerca è stata condotta in assenza di qualsiasi rapporto commerciale o finanziario che potrebbe essere interpretato come un potenziale conflitto di interessi.
Ringraziamenti
Sostegno finanziario per questa ricerca è stata fornita il National Institutes of Health (NIH) e Istituto nazionale di diabete e digestivo e malattie renali (NIDDK) / NIH R01-DK-105371. Grazie Dr. Houchun (Harry) Hu per consigli e suggerimenti su creazione fantasma acqua grassa.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Acqua distillata | Amazon | B000P9BY38 | Soluzione a base acquosa |
| Agar | Sigma Aldrich Incorporated | A1296-100G | Gelificante |
| Tensioattivo solubile in acqua | Sigma Aldrich Incorporated | P1379-500ML | Tensioattivo/emulsionante |
| Gadolinio-DTPA Agente di contrasto | Bayer Healthcare | 50419-0188-01 | Risonanza magnetica Agente di contrasto. |
| Benzoato di sodio | Sigma Aldrich Incorporated | 71300-250G | Conservante |
| Olio di arachidi | Amazon | 54782-LOU | Soluzione a base di olio |
| Tensioattivo solubile in olio | Sigma Aldrich Incorporated | S6760-250ML | Tensioattivo/emulsionante |
| Piastra riscaldante con agitatore | Fisher Scientific | 07-770-152 | |
| Barre di agitazione (a forma di uovo) | Sigma Aldrich Incorporated | Z127116-1EA | |
| Bicchiere da 400 mL | Sigma Aldrich Incorporated | CLS1003400-48EA | |
| Pallone di Erlenmeyer da 250 mL | Sigma Aldrich Incorporated | CLS4450250-6EA | |
| Pipetta volumetrica in vetro da 25 mL | Fisher Scientific | 13-650-2P | Quantità = 2 |
| Pipetta volumetrica in vetro da 50 mL | Fisher Scientific | 13-650-2S | Quantità = 2 |
| Pipetta volumetrica in vetro da 75 mL | Fisher Scientific | 13-650-2T | Quantità = 2 |
| Siringhe da 3,0 mL | Sigma Aldrich Incorporated | Z248002-1PAK | |
| Siringa da 1,0 mL | Sigma Aldrich Incorporated | Z230723-1PAK | |
| Spatola | Sigma Aldrich Incorporated | S3897-1EA | |
| Bilancia (risoluzione 100 g x 0,01 g) | Amazon | AWS-100-BLK | |
| Pesare Barche | Sigma Aldrich Incorporated | Z740499-500EA | |
| Barattoli di vetro da 120 ml McMaster | Carr Supply Co | 3801T73 | |
| Guanti resistenti al calore (coppia) | Amazon | B075GX43MN | |
| Aghi per siringhe | Sigma Aldrich Incorporated | Z192341-100EA | |
| 18" barra di agitazione retriver | Fisher Scientific | 14-513-70 | |
| Fiala in vetro trasparente 1 Dram | Fisher Scientific | 03-339-25B |
Riferimenti
- Franz, D., et al. Association of proton density fat fraction in adipose tissue with imaging-based and anthropometric obesity markers in adults. Int J Obes. , 1-8 (2017).
- Chai, J., et al.
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Ristampe e permessi
Tag
Validazione della frazione di grassoemulsione a base di agarsoluzione di olio di arachidicontrasto Gadopentetato dimeglumine (Gd-DTPA)tecnica della pipetta volumetricamiscelazione su piastra riscaldantevalutazione dell'omogeneità del phantomfrazione del segnale del grasso in risonanza magnetica (MRI)
