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Articolo metodologico

Un modello di osteogenesi di distrazione del topo

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DOI:

10.3791/57925

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14 novembre 2018

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In questo articolo

Sommario

Vi presentiamo un modello di osteogenesi di distrazione tibial del topo sviluppato utilizzando un distrattore su misura. L'uso di un mouse come un obiettivo di analisi è vantaggioso per far progredire la ricerca.

Abstract

L'osteogenesi di distrazione (DO) è una procedura chirurgica che comporta la rigenerazione del tessuto scheletrico senza trapianto di cellule. Un modello si compone dei seguenti tre fasi: la fase di latenza dopo osteotomia e posizionamento del distrattore esterno; la fase di distrazione, in cui l'estremità dell'osso separati sono gradualmente e continuamente distratto; e la fase di consolidamento. Questo distrattore su misura utilizzato per è composto da due anelli di resina acrilica incompleto e un tassello ad espansione. Il processo è stato avviato facendo uno stampo con il materiale da impronta in silicone e quindi creando il distrattore su misura. Resina dentale è stata versata nella cassaforma fatta di materiale da impronta in silicone, ed è stato permesso di polimerizzare per creare anelli incompleti resina necessari per il distrattore su misura. Questi anelli sono stati fissati con una vite di espansione utilizzando resina trasparente. Il distrattore su misura creato tramite questo approccio è stato fissato alla tibia di topi. La tibia è stata fissata al dispositivo utilizzando una coppia di aghi 25g prossimalmente, una coppia di aghi 27 G distalmente e resina acrilica. Dopo un periodo di latenza di 5 giorni, la distrazione è stata avviata a una velocità di 0,2 mm/12 h. L'allungamento è stato continuato per 8 giorni, risultando in uno spazio totale di 3,2 mm. I topi sono stati sacrificati 4 settimane dopo la distrazione. Formazione dell'osso nello spacco di distrazione è stata confermata usando sia la radiografia e l'istologia.

Introduzione

L'osteogenesi di distrazione (DO) è un metodo di trattamento stabilito per una varietà di disturbi scheletrici, quali discrepanze di lunghezza degli arti, difetti dell'osso e di deformità degli arti1. Questa strategia di trattamento unico si basa sul "principio di tensione-stress" proposta da Ilizarov. Il metodo richiede diversi giorni per latenza, diverse settimane per attiva di distrazione e diversi mesi per il consolidamento, fino a quando l'osso maturo è formata2.

Le condizioni di ipossia locale a causa del blocco del sangue flusso3,4

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Protocollo

Tutti gli esperimenti sono stati effettuati secondo protocolli approvati dal comitato di uso della nostra istituzione e cura degli animali. Sterilizzare tutti gli strumenti prima della procedura.

1. preparazione di uno stampo per creare il distrattore su misura

  1. Fanno due squilli incomplete (diametro esterno, 20 mm; diametro interno, 10 mm), che sono una parte del distrattore, con un unico foglio di cera di paraffina (145 mm x 74 mm) utilizzando un intagliatore di cera di Evans.
    1. Fare 4 dei pezzi stessi. Utilizzare una spatola cera riscaldata con un bruciatore a gas. Impilare i quattro anelli per uno spessore di 5 mm. fornir....

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Risultati

Figure 1A e 1B presentano anelli incompleti (esterno diametro, 20 mm interno diametro, 10 mm; spessore 5 mm) con cera di paraffina. Due modelli in cera sono stati incorporati nel materiale da impronta in silicone, e uno stampo per gli anelli di resina (Figura 1C) è stato formato. Resina polimerizzata immediatamente è stata versata in questo stampo, e anelli di resina sono stati ottenuti (.......

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Discussione

Quando un animale di grandi dimensioni viene utilizzato come modello sperimentale, può essere utilizzato un dispositivo di estensione già pronti, ed è facile da ottenere buon fissaggio e valutare l'operazione di estensione stessa e la quantità di estensione. Tuttavia, quando il mouse è utilizzato come modello sperimentale, è necessario sviluppare alcune o tutte le attrezzature. Isefuku et al. e Tay et al ha fatto il dispositivo e creato un mouse modello7,

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori ringraziano la signora Makiko Kato per fornire incoraggiamento per completare questo studio. Ringraziamo anche la divisione di animali da esperimento e Medical Research Engineering, Nagoya University Graduate School of Medicine, per l'alloggiamento dei topi.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Cera di paraffinaYAMAHACHI DENTAL MFG. CO.-Per la preparazione di uno stampo per anelli in resina
Labocone puttyGCCorporation-Perla preparazione di uno stampo per anelli in resina
Cera di utilitàGCCorporation-Perla preparazione di uno stampo per anelli in resina
Vite ad espansioneOrtho Dentaurum600-301-30Componente di distrattore su misura
Unifast IIIGC Corporation-Resina a polimerizzazione immediata Componente del distrattore su misura
Ortho CrystalNISSIN-Resinatrasparente Componente del distrattore su misura
Ago da 25 GTERUMONN-2516RPer distrattore su misura
Ago da 27 GTERUMONN-2719SPer distrattore su misura
Mouse ICRChubu Kagaku ShizaiCorporation-Experimental animale
SomnopentylKyoritsusale sodico
IsofluranoFUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation099-06571Soluzione per inalazione di isoflurano
Seiyaku-Pentobarbital

Riferimenti

  1. Watson, J. T. Distraction osteogenesis. The Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 14, 168-174 (2006).
  2. Ilizarov, G. A. The tension-stress effect on the genesis and growth of tissues: Part II. The influence of the rate and frequency of distraction.<....

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Ristampe e permessi

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