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Articolo metodologico

Un modello Versatile di infestazione del battito duro sui conigli di laboratorio

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DOI:

10.3791/57994

6 ottobre 2018

In questo articolo

Sommario

Abbiamo sviluppato un sistema semplice e versatile per zecche dure si nutrono di conigli di laboratorio. Il nostro protocollo non laborioso utilizza materiali facilmente accessibile e può essere regolata a seconda delle esigenze delle varie impostazioni sperimentali. Il metodo consente monitoraggio confortevole e/o campionamento di zecche durante l'intero periodo d'alimentazione.

Abstract

L'uso di animali vivi nella ricerca di segni di graduazione è cruciale per una varietà di scopi sperimentali, compreso il mantenimento di colonie di zecca Dura in laboratorio. In segni di graduazione, tutti gli stadi di sviluppo (ad eccezione di uovo) sono ematofagi e acquisire un pasto di sangue quando collegato ai loro ospiti vertebrati è essenziale per il completamento del loro ciclo di vita. Qui dimostriamo un metodo semplice che utilizza capsule facilmente apribile per l'alimentazione delle zecche dure sui conigli. I vantaggi del metodo proposto sono la sua semplicità, la breve durata e la regolazione soprattutto versatile per le esigenze delle specifiche esigenze sperimentali. Il metodo rende possibile l'uso di camere multiple (di varie dimensioni) sull'animale stesso, che consente l'alimentazione di più fasi o differenti gruppi sperimentali riducendo il requisito generale degli animali. I materiali non-irritante e facilmente accessibili utilizzati riduce al minimo disagio agli animali, che può essere facilmente recuperato da un esperimento e offerto per adozione o riutilizzati se il protocollo etico lo consente.

Introduzione

Le zecche dure (Ixodidae) sono ben note come artropodi alimentazione lente e possono essere fissate su un host per diversi giorni, o settimane, a seconda della specie e dello sviluppo della fase1. Questi artropodi ematofagi obbligatoria sono vettori di un'ampia varietà di agenti infettivi, quali batteri, protozoi e virus e quindi presentano un rischio significativo per gli esseri umani e di salute degli animali1. Quando studiando biologia tick o valutare nuovi metodi di controllo, l'istituzione di una zecca efficace sistema di alimentazione è fondamentale per progettare esperimenti efficacemente e di realizzare l'obietti....

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Protocollo

Nota: In questo studio, i conigli sono stati mantenuti in gabbie standard con cibo e acqua offerti ad libitum presso l'Agenzia francese per il cibo, Environmental and Occupational Health & sicurezza (ANSES) accreditati strutture per animali a Maisons-Alfort, France. Gli animali sono stati controllati due volte al giorno da due tecnici esperti per eventuali reazioni anomale della pelle, problemi di salute o complicazioni. La camera sperimentale era garantita da inquadrare all'interno della porta con nastro biadesivo per evitare la fuga accidentale di segni di graduazione. Il metodo funziona meglio se due persone lavorano come una squadra, ma è possibile comple....

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Risultati

Qui vi proponiamo per la prima volta un metodo dettagliate passo a passo di zecca Dura alimentazione in schiuma EVA capsule applicati alla parte posteriore di un coniglio rasato, coperto da una giacca (Figura 1 e Figura 2). Questo protocollo è adatto per vari tipi di esperimenti, quando gruppi di zecche diverse sullo stesso host sono necessari e possono essere utilizzati anche per l'allevamento di massa di zecche.......

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Discussione

Il passo più importante in questo intero protocollo è quello di incollare la capsula con fermezza alla pelle rasata. Per questo motivo, una pressione costante per almeno 3 minuti è critica, specialmente agli angoli. Quando inoculare le zecche nella capsula, è importante applicare loro in profondità l'angolo opposto da quello aperto per evitare la fuga di graduazione durante la sigillatura. Quando si pianificano gli esperimenti, assicurarsi che tutte le capsule sono coperto dalla giacca per evitare danni da masticare o gr.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

Riconosciamo l'assistenza tecnica di Evelyne Le Naour, Istituto nazionale francese di ricerca agronomica (INRA), Alain Bernier (INRA) e Océane Le Bidel (ANSES). Consuelo Almazán è stato sostenuto da una borsa di studio dal laboratorio di eccellenza, integrativa biologia of Emerging Infectious Diseases (LabEx IBEID), Istituto Pasteur. I conigli e le pecore sono state acquistate dall'ANSES. Parte di questo lavoro è stato finanziato dagli istituti nazionali di sovvenzione di salute RO1AI090062 a Y. Park. Dr. Jeffrey L. Blair è riconosciuto per la revisione del manoscritto.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Conigli della Nuova Zelanda (2,5-3,5 kg)Charles River Codice ceppo 571
Pecora RambouilletFornitore locale-fattoria senza zeccheFemmina di 6 mesi schiuma
EVA di 5 mm di spessore Cosplay ShopEVA-PE451kg (950mm x 450mm)10 mm PE45 kg schiuma dal Cosplay Shop può essere utilizzato per le grandi specie di zecche adulte
Foglio di schiuma 9 "X 12" 6 mm-BiancoAmazonFOAMSHT6-206 mm-EVA schiuma ca può essere ordinato tramite Amazon come alternativa alla schiuma da Cosplay Shop
Giacche di coniglio a figura intera Apparato di Harvard, Inc.620077- medio, 6270078 - grande 
Colla al lattice atossicaRiparatore di lacrime Tessuto & Calza
in pelle BSN Medical9076 (12-15 cm di larghezza)
Rete antizanzare Loisirs CreatifsTessuto a rete in nylon filtrante molto fineQualsiasi rete per zanzare o materiale per tende con la dimensione della maglia inferiore a 50 μ m è adatto.
LeucoplastoBSN medical S.A.SLF 72361-02
Nastro adesivo a strappoAIEX store AIEX AIEX39.37 piedi/12 m Rotolo di nastro autoadesivo a strappo, larghezza 20 mm, colore biancoFullfiled by Amazon
Colla ad asciugatura rapida  Fixtout Supercolla
ortopedica tubolare in cotone adesiva

Riferimenti

  1. Sonenshine, D. E., Roe, M. Ticks, People and Animals. Biology of Ticks, Vol I. , Oxford University Press. (2014).
  2. Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
  3. Bonnet, S., Jouglin, M., Malandrin, L., Becker, C., Agoulon, A., L'hostis, M., Chauvin, A.

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Ristampe e permessi

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Capsula in schiuma EVAmetodo di alimentazione delle zeccheinterazione ospite-vettoreciclo vitale delle zeccheprotocollo di recupero degli animalisistema a camere multipletecnica di fissaggio della capsulametodo di raccolta delle zecche