Qui presentiamo un protocollo che descrive la tecnica di ossigenazione extracorporea veno-venoso della membrana (ECMO) in un non intubati, spontaneamente la respirazione mouse. Questo modello murino di ECMO può essere efficacemente attuato in studi sperimentali di acuto e malattie polmonare di stadio finale.
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Articolo metodologico
Ossigenazione extracorporea veno-venoso in un Mouse
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'uso dell'ossigenazione extracorporea della membrana (ECMO) è aumentato sostanzialmente negli ultimi anni. ECMO è diventata una terapia efficace ed affidabile per acuto così come malattie polmonare di stadio finale. Con l'aumento della domanda clinica e l'uso prolungato di ECMO, ottimizzazione procedurale e la prevenzione del danno multi-d'organo sono di importanza critica. L'obiettivo di questo protocollo è di presentare una tecnica dettagliata di ECMO veno-venoso in un non intubati, respirazione spontanea del mouse. Questo protocollo viene illustrato il progetto tecnico del ECMO e la procedura chirurgica. Questo modello murino di ECMO faciliterà lo studio della fisiopatologia legata alla ECMO (ad es., infiammazione, eventi tromboembolici e sanguinamenti). A causa dell'abbondanza di topi geneticamente modificati, i meccanismi molecolari coinvolti in complicanze correlate alla ECMO possono anche essere sezionati.
Introduzione
Ossigenazione extracorporea della membrana (ECMO) è un sistema di supporto di vita temporanea che assume le funzioni dei polmoni e del cuore per consentire di aspersione e lo scambio di gas adeguata. Collina et al.1 descritto il primo uso di ECMO in pazienti nel 1972; Tuttavia, esso solo è diventato ampiamente usato dopo la sua applicazione successo durante la pandemia di H1N1 nel 20092. Oggi, ECMO è usato ordinariamente come una procedura salvavita in stadio finale cuore e polmone malattie3. ECMO veno-venoso è sempre più impiegato come alternativa alla ventilazione meccanica invasiva nel sveglio,....
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Protocollo
Gli esperimenti sono stati effettuati su topi C57BL/6 maschi, 12 settimane di età. Questo studio è stato condotto nel rispetto delle linee guida della legge animale tedesca sotto protocollo TSA 16/2250.
1. i materiali preparazione
Nota: Tutti i passaggi vengono eseguiti in condizioni non sterili, pulite. Condizioni di sterilità sarebbe necessarie se l'animale è di essere sopravvissuto postoperatorio.
- Introdurre 3 fenestrazioni in un tubo in poliuretano 2-Fr utilizzando una lama chirurgica sotto un microscopio con ingrandimento X 16.
Nota: Tutte le fenestrazioni devono trovarsi nel terzo distale della....
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Risultati
Questo protocollo descrive il metodo di ECMO veno-venoso in un mouse. Questo modello è affidabile e riproducibile e rispetto al nostro modello precedentemente descritto del CPB con arresto respiratorio e circolatorio12,13, è tecnicamente meno esigente stabilire.
Flusso ECMO nel sistema venoso è stata mantenuta tra 1,5 e 5 mL/min. La pressione arteriosa media è stata mant.......
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Discussione
In precedenza, abbiamo descritto un modello di successo di CPB in un mouse12,13. Per implementare tale modello per acuto o disordini del polmone stadio finale abbiamo sviluppato un circuito ECMO veno-venoso easy-to-use per i topi. Diversi al modello CPB, veno-venoso ECMO non richiede complicate procedure chirurgiche quali sternotomy e la pressione dell'aorta, riducendo così il rischio di ferita sanguinante in un animale completamente eparinizzato. Per evitare il .......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Questo progetto è stato sostenuto da KFO 311 sovvenzione Deutsche Forschungsgemeinschaft.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | in 1:1 con Tetraspan |
| Tetraspan 6% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | in 1:1 con Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2,5 UI per ml di soluzione di primer |
| NaHCO3 8,4% | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% in soluzione di primer |
| Carprofen | Zoetis Inc., USA | PZN:00289615 | 5mg/kg/BW |
| Catetere PU da 1 Fr | Instechlabs INC., USA | Arteria carotidica | C10PU-MCA1301 |
| Catetere PU da 2 Fr | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | vena giugulare |
| 8-0 Sutura di seta intrecciata | Ashaway Line & Twine Co., USA | 75290 | legatura |
| Isoflurane | Piramal Critical Care GmbH | PZN:9714675 | narcosi |
| Forbici a molla - Lame da 6 mm | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | strumenti |
| Forbici a molla - Lame da 2 mm | Fine Science Tools GmbH | 15000-03 | strumenti |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | strumenti |
| Dumont #55 Pinze | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | strumenti |
| Castroviejo Micro Needle Holder - 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | strumenti |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | strumenti |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | strumenti |
| Isoflurano Vaporizzatore Dräger 19.1 | Dott. gerwerk AG & Co. KGaA | anestesia 1,3 -2,5% | |
| Dispositivo multicanale per l'acquisizione dei dati con software ISOHEART | Hugo Sachs Elektronik GmbH, Germania | pressione invasiva, ECG, t ° Dispositivo | |
| portatile C i-STAT | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA | analisi dei gas ematici | |
| cartucce i-STAT CG4+ e CG8+ | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA | analisi dei gas ematici | |
| C57Bl/6 topi, maschio, 30 g, 14 settimane | di età Charles River Laboratories | alloggiato 1 settimana prima |
Riferimenti
- Hill, J. D., et al. Prolonged Extracorporeal Oxygenation for Acute Post-Traumatic Respiratory Failure (Shock-Lung Syndrome). New England Journal of Medicine. 286 (12), 629-634 (1972).
- Noah, M. A., et al.
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Ristampe e permessi
