Method Article

Frattura apparato Design e ottimizzazione dei protocolli per le fratture chiuse-stabilizzato in roditori

DOI:

10.3791/58186

⸱

August 14th, 2018

 ,  ,  , 
1College of Osteopathic Medicine, Michigan State University, 2Department of Orthopaedic Surgery, University of Michigan Medical School, 3Lymann Briggs College, Michigan State University, 4College of Engineering, Michigan State University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L'obiettivo del protocollo è quello di ottimizzare i parametri di generazione di frattura per produrre fratture coerente. Questo protocollo rappresenta le variazioni in osso, dimensioni e morfologia che può esistere tra gli animali. Inoltre, è descritto un apparato di frattura conveniente, regolabile.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La generazione affidabile delle fratture coerente stabilizzate in modelli animali è essenziale per la comprensione della biologia di rigenerazione ossea e lo sviluppo di terapie e dispositivi. Tuttavia, modelli di lesione disponibili sono afflitti da incoerenza conseguente spreco animali e risorse e imperfetta dei dati. Per risolvere questo problema di eterogeneità di frattura, lo scopo del metodo descritto nel presente documento è quello di ottimizzare frattura generazione parametri specifici per ogni animale e resa una frattura coerente posizione e modello. Questo protocollo rappresenta variazioni dimensionali dell'osso e morfologia che può esistere tra ceppi murini e può essere adattato per generare fratture coerente in altre specie, come il ratto. Inoltre, è descritto un apparato di frattura conveniente, regolabile. Rispetto alle attuali tecniche di frattura stabilizzato, il protocollo di ottimizzazione e un nuovo apparato di frattura dimostra una maggiore coerenza nei modelli di frattura stabilizzato e posizioni. Utilizzo ottimizzato i parametri specifici per il tipo di campione, il protocollo descritto aumenta la precisione dei traumi indotti, riducendo al minimo l'eterogeneità di frattura osservata tipicamente nelle procedure di generazione di frattura chiusa.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ricerca sulla guarigione di frattura è necessario affrontare un grande problema clinico ed economico. Ogni anno oltre 12 milioni di fratture sono trattate in Stati Uniti d'America1, costano $ 80 miliardi per l'anno2. La probabilità di un maschio o femmina che soffrono una frattura nel corso della loro vita è 25% e 44%, rispettivamente3. Problemi connessi con la guarigione della frattura si pensano che aumentino con maggiore comorbidità come la popolazione invecchia. Per studiare e risolvere questo problema, sono necessari modelli robusti della generazione di frattura e stabilizzazione. Modelli del roditore sono ideali per questo scopo. Forniscono la rilevanza clinica e può essere modificati alle condizioni specifiche di indirizzo (cioè, più lesioni, fratture aperte, chiuse, ischemiche e infettate). Oltre a replicare scenari clinici, modelli animali frattura sono importante per capire la biologia dell'osso e sviluppo terapeutica e dispositivi. Tuttavia, i tentativi di studiare le differenze tra gli interventi possono essere complicati dalla variabilità introdotta da generazione di frattura incoerente. Quindi, generando fratture riproducibile e costantemente chiuse in modelli animali è essenziale per il campo di ricerca osteomuscolare.

Nonostante correttamente controllando per eterogeneità di potenziale soggetto garantendo il background genetico appropriato, sesso, età e condizioni ambientali, la produzione di lesioni ossee coerente clinicamente rilevanti è una variabile significativa che interessano riproducibilità che deve essere controllato. I confronti statistici utilizzando incoerente fratture sono afflitti con rumore sperimentale e un'alta variabilità4; Inoltre, variabilità di frattura può portare alla morte degli animali inutili a causa della necessità di aumentare la dimensione del campione o la necessità di eutanasia animali con fratture comminute o malpositioned. Lo scopo del metodo descritto nel presente documento è quello di ottimizzare i parametri di generazione di frattura che sono specifici per tipo di campione e resa una frattura coerente posizione e modello.

Modelli correnti della generazione di frattura rientrano in due grandi categorie, ognuna con i propri punti di forza e di debolezza. Modelli di Apri-frattura (osteotomia) sottoporsi ad intervento chirurgico per esporre l'osso, dopo che una frattura è indotta da taglio dell'osso o indebolirlo e poi manualmente romperlo5,6,7,8. I vantaggi di questo metodo sono la visualizzazione diretta del luogo di frattura e una posizione più coerente di frattura e modello. Tuttavia, la rilevanza fisiologica e clinica dell'approccio e il meccanismo della ferita è limitati. Inoltre, metodi di generazione di frattura aperto richiedono un approccio chirurgico e chiusura con periodi prolungati durante i quali i roditori sono esposti ad un aumentato rischio di contaminazione.

Chiusi tecniche rispondono a molte delle limitazioni di tecnica aperta. Chiuse le tecniche producono fratture utilizzando un contundente applicati esternamente, che induce la lesione per l'osso e i tessuti circostanti, più simili a quelli osservati nelle lesioni cliniche umane. Il metodo più comune è stata descritta da Bonnarens ed Einhorn nel 19849. Hanno descritto una ghigliottina ponderata viene utilizzata per impartire il trauma smussato per rompere l'osso senza causare le ferite della pelle esterna. Questo metodo è stato ampiamente adottato per studiare l'effetto di genetica10,11, terapia farmacologica12,13,14,15, meccanica16, 17e fisiologia18,19,20 sull'osso guarigione nei topi e nei ratti. Mentre il beneficio di metodi chiusi è fisiologicamente rilevanti fratture, rigore e riproducibilità sperimentale sono limitati dalla eterogeneità di frattura. La generazione di frattura incoerente si traduce in una differenziazione fra-gruppo limitata, esemplari persi e un aumento in animali necessari per raggiungere il significato statistico.

Controllare la variabilità nella generazione di frattura e la stabilizzazione è essenziale per produrre risultati significativi. Al fine di correttamente studiare la biologia della riparazione di frattura, è necessario un modello di frattura semplice ma affidabile. Il modello dovrebbe essere traducibile specie di roditori, tipi di osso (femore o della tibia, per esempio) e da altra parte di ambiti di provenienza genetici del mouse variabile e mutazioni indotte. Inoltre, la procedura ideale dovrebbe essere tecnicamente semplice e produrre risultati coerenti. Un'eterogeneità di frattura di indirizzo, il metodo qui descritto è la costruzione di un dispositivo di frattura ben controllato che quindi può essere utilizzato per ottimizzare i parametri e generare fratture costantemente chiuse indipendentemente da età, sesso o genotipo.

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Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Questo protocollo è stato sviluppato per garantire che gli animali non vengono utilizzati inutilmente e sono risparmiati tutti inutile dolore e afflizione; aderisce a tutte le leggi federali, statali, locali e istituzionali e orientamenti in materia di ricerca sugli animali. Il protocollo è stato sviluppato sotto la Guida di un laboratorio di Università-larghi animale medicina programma diretto da veterinari specializzato in medicina degli animali di laboratorio. Il protocollo è stato esaminato e approvato dal istituzionale Animal Care ed uso Committee (IACUC).

1. costruzione della Torre frattura

Nota: Tutte le parti sono elencati nella sezione materiali (Tabella materiali). Disegni tecnici dettagliati sono forniti per le parti lavorate e 3D-stampato in figure complementari da 1-12. I disegni tecnici di sottoassieme includono dettagli di fissaggio per tutte le parti montate (complementare nelle figure 1, 2, 7 e 9).

  1. Supporto sottoassieme
    Nota: Per un disegno tecnico del sottoassieme supporto, vedere complementare figura 1.
    1. Fissare il Supporto trave--mascella sezione al punto centrale del Fascio supporto--sezione orizzontale.
    2. Fissare il Supporto trave--1 verticale sulla superficie superiore del Supporto di larghezza--mascella sezione, 2 dal Supporto trave--sezione orizzontale.
    3. Fissare il Supporto trave--2 verticale sulla superficie superiore del Supporto di larghezza--sezione orizzontale a metà (7 a partire dalla fine).
    4. Fissare il fascio, supporto--piastra di montaggio all'estremità di Supporto trave--1 verticale e di Supporto trave--verticale 2. Alla fine del supporto piastra deve essere allineata con la parte posteriore del Fascio di sostegno..--verticale 2.
  2. Sottoassieme RAM
    Nota: Per un disegno tecnico del sottoassieme ram, vedere complementare nella figura 2.
    1. Macchina del blocco interrompere e la Guida del blocco (complementare figura 3); la Ram Rod (complementare figura 4); l' allineamento di vite (complementare figura 5); e la piastra di montaggio (complementare figura 6).
    2. Fissare la Piastra di montaggio per il Fascio di sostegno - piastra di montaggio del supporto sottoassieme.
    3. Nel seguente ordine, far scorrere il primo Cuscinetto lineare della manica; la Guida del blocco; il secondo Cuscinetto lineare della manica; e il blocco di fermare sulla Ram Rod. Fissare le guide e i blocchi per la Piastra di montaggio.
    4. Collegare tre ⅜-in dadi per la porzione filettata della Ram Rod. Uno dovrebbe essere a filo con l'estremità dell'asta di impegnarsi con l'elettromagnete. Gli altri 2 serviranno per regolare la profondità di frattura.
    5. Allineare il boschetto nella Ram Rod rivolto in avanti e inserire la Vite di allineamento nel foro filettato della Guida del blocco.
  3. Sottoassieme magnete
    Nota: Per un disegno tecnico del sottoassieme magnete, vedere complementare nella figura 7.
    1. L' elettromagnete conduce al filo di saldatura (la polarità non è un fattore per l'operazione di elettromagnete). Consentire una lunghezza sufficiente raggiungere il piano, dove sarà posizionato il dispositivo di frattura. Fascette di utilizzo o un'altra forma di attaccamento allo stress alleviare il filo.
    2. Togliere l' Alimentazione elettricadi fine e collegarlo al Pedale. Infine, collegare il filo al Pedale in una configurazione di "off" (normalmente aperto). Testare il circuito per garantire che l' elettromagnete è quando non si preme l' Interruttore a pedale . Questo si reggerà la ram prima della frattura.
    3. Stampare il Mount Magnet (complementare figure 8A e 8B) utilizzando un dispositivo di produzione additiva, o la parte da alluminio della macchina.
    4. Allegare l' elettromagnete al Mount Magnet.
    5. Collegare 2 staffe angolari per il supporto di larghezza--magnete.
    6. Nel seguente ordine, infilare il Cilindro magnetico attraverso il superiore Staffa di angolo e aggiungere un dado ¼-in; il Monte Calamita; due i dadi di ¼; e la parte inferiore Staffa angolare. Fissare il gruppo con due dadi di ¼-in su ciascuna estremità.
  4. Montaggio completo
    Nota: Per un disegno tecnico dell'Assemblea completa, vedere complementare nella figura 9.
    1. Fissare il Magnete sottoassieme sulla superficie superiore della trave, supporto--piastra di montaggio.
    2. Regolare l'allineamento del Fascio supporto--magnete in modo che il magnete si impegna con l' asta, Ram.
      Nota: Se l'asta non viene rilasciata quando il pedale è premuto, è possibile ridurre l'area di contatto fra l'elettromagnete e l'asta spostando il Supporto trave--magnete.
    3. Macchina le staffe gamba mascella (complementare figura 10).
    4. Fissare le due Staffe gamba mascella al Supporto trave--mascella sezione. Quando è sceso, la punta della ram dovrebbe essere ad una distanza uguale da ogni mascella.
    5. Posizionare la Piattaforma frattura (figure complementari 11A e 11B) sopra le ganasce.
    6. Stampare la Dima di posizionamento frattura (figure complementari 12A e 12B) e il Jig Pin Gauge (figure complementari 13A e 13B) utilizzando un dispositivo di produzione additiva, o macchina la parti in alluminio.
      Nota: Le dimensioni dei Jigs saranno calcolate nelle operazioni di ottimizzazione descritte nel passaggio 2.
    7. Fissare la dima di posizionamento frattura alla piattaforma frattura.
    8. Confermare che la profondità dell'impatto può essere regolata utilizzando i dadi di due stop sulla Ram Rod.
    9. Confermare che la velocità d'impatto può essere regolata spostando su e giù il Mount Magnet .
    10. Confermare che la larghezza della frattura può essere regolata spostando le Staffe gamba mascella più vicino o più lontano la Ram Rod.

2. frattura ottimizzazione

  1. Posizione di frattura
    1. Ottenere le radiografie dell'arto (femore o tibia) per essere fratturato in un campione rappresentativo di 5 animali eutanasizzati.
      Nota: Il campione dovrebbe essere abbinato agli esemplari, che saranno utilizzati nel protocollo sperimentale basato su età, genotipo e sesso. Anche se il protocollo finale richiede un solo arto fratturato, entrambi gli arti di esempio verranno utilizzati.
    2. Posizionare l'arto tangente al fascio di raggi x per acquisire viste true-laterale e anteriore/posteriore fino all'osso. Inserire un oggetto di dimensione noto sul piano della formazione immagine per fornire una scala per l'analisi.
    3. Nota: Se imaging femori, garantire che l'arto è in piena estensione, dove il femore è nello stesso aereo assiale della tibia.
    4. Contrassegnare la desiderata posizione della frattura sulla radiografia dell'arto per essere fratturato (Figura 1A - linea tratteggiata). Misurare dal giunto calcaneal-tibiale al livello della frattura profonda (Figura 1A). Calcolare la lunghezza media di frattura (FL) per tutti i campioni di prova. Misurare da tacca intercondylar per fratture di femore.
  2. Frattura-posizionamento jig
    1. Misurare la distanza tra la superficie esterna del un supporto incudine al centro dell'impatto ghigliottina (CGI) (Figura 2). Sottrarre il CGI da FL, descritto al punto 2.1.4, per calcolare la profondità di posizionamento frattura jig (JD). Macchina o 3D-stampa un canale a forma di U con un'altezza e una larghezza uguale a incudine e una profondità pari a JD (Figura 3A). Un disegno tecnico del campione e file CAD sono inclusi figure complementari 12A e 12B.
      Nota: Quando l'arto viene posizionato nell'attrezzatura, il dorsum del piede dovrebbe trovarsi contro la superficie più lontane l'impatto di ghigliottina. Modificare il canale a forma di U se è richiesto per l'arto gioco aggiuntivo.
    2. Posizionare il preparato nell'apparato di frattura in posizione prona per fratture di femore o in posizione supina per fratture della tibia (Figura 4). Premere il dorsum del piede contro la fine del jig frattura-posizionamento. Premere manualmente la ghigliottina fino le fratture degli arti. Ottenere una radiografia dell'arto fratturato per confermare la posizione di dimensione e frattura del jig (Figura 2B).
    3. Aumentare JD se la posizione di frattura è troppo distale sull'osso, o diminuire JD se la posizione di frattura è troppo prossimale sull'osso.
  3. Stabilizzazione dei parametri pin
    1. Lunghezza pin: Usando le radiografie ottenute nel passaggio 2.1, misurare la lunghezza degli arti (LL) dal plateau tibia al livello del malleolo posteriore per fratture della tibia, o tacca intercondylar per il grande trocantere per fratture di femore. Moltiplicare la lunghezza dell'osso per 0,9 per calcolare la lunghezza del pin (PL) (figure 1A e 3B).
    2. Perno Larghezza: Usando le radiografie ottenute nel passaggio 2.1, misurare il diametro minimo di midollare (MD) dell'arto fratturato (Figura 1A). Selezionare un ago con un calibro approssimativamente equivalente alla midollare di diametro e una lunghezza di più di 1,5 x PL.
      Nota: Una dimensione approssimativa pin per un mouse C57BL/6J 14-settimana-vecchio è 22 G, 1½ a e 27 G, 1¼ in per femore e tibia, rispettivamente.
  4. Indicatore di taglio di pin
    1. 2.4.1. macchina o 3D-stampa un manometro con una lunghezza pari alla PL meno la lunghezza dell'ago (CGL) (Figura 3B; Complementare figure 13A e 13B). Un'estremità dovrebbe avere una sporgenza a riposo contro il mozzo dell'ago e l'altro dovrebbe indicare dove deve essere tagliato il pin. Un disegno tecnico del campione e file CAD sono inclusi figure complementari 13A e 13B.
  5. Stabilizzazione di frattura perno intramidollare
    1. Usando i campioni di prova non-fratturato dal punto 2.1, per eliminare i peli con un clipper elettrico o la crema depilatoria da metà tibia a metà femore, esponendo l'articolazione del ginocchio.
    2. Aggiunta di tibia: inserire l'ago in modo percutaneo laterale al legamento patellar. Ritrarre il legamento patellar mediale e allineare la punta dell'ago all'asse della tibia. Delicatamente con un movimento di alesatura, violazione del plateau tibiale e guidare l'ago verso il basso la cavità midollare.
    3. Femore pinning: inserire l'ago in modo percutaneo laterale al legamento patellar. Ritrarre il legamento patellar mediale e allineare la punta dell'ago per l'asse del femore nella gola intercondiloidea. Delicatamente con un movimento di alesatura, violare la superficie articolare del tacca intercondylar e guidare l'ago verso il basso la cavità midollare.
    4. Usando l'indicatore di fabbricati nel passaggio 2.4, ream fino a quando l'ago esposto è uguale alla lunghezza di calibro. Ritirare l'ago per fornire abbastanza spazio (~ 3 mm) per tagliare l'ago al livello indicato dal misuratore.
      Nota: Assicurarsi di tenere l'estremità prossimale (plastica) dell'ago durante il taglio, quindi non si trasforma in un proiettile pericoloso.
    5. A crimpare 0,3 mm dell'estremità distale del perno utilizzando una fresa di perno e poi tagliare il pin al livello del misuratore. Affondare il pin alla superficie articolare utilizzando una canna con un diametro di 1.5 x più grande del diametro dell'ago.
      Nota: Crimpatura impedisce la rotazione dell'ago e migrazione aumentando il contatto dell'ago-osso.
    6. Ottenere le radiografie per confermare l'ago si estende la lunghezza del canale midollare dell'arto e non sporgono dall'estremità prossimale o distale (Figura 1C).
  6. Profondità di impatto
    1. Usando le radiografie ottenute nel passaggio 2.1, misurare il diametro della corteccia a livello della frattura desiderato (Figura 1A). Calcolare il diametro medio corticale (CD) per tutti i campioni di prova.
    2. Posizionare un esemplare di prova bloccato dal passo 2.5 nel dispositivo di frattura con la dima di posizionamento frattura fabbricata nel passaggio 2.2. Riposare la ram di impatto sull'arto illeso.
      Nota: Non consentono la ram a goccia; l'osso dovrebbe rimanere intatto durante questa fase di ottimizzazione.
    3. Applicare forza abbastanza verso la RAM a comprimere i tessuti molli, ma non di frattura dell'osso. Regolare la profondità di impatto (ID) di 0,75 x CD (Figura 2).
      Nota: La profondità di impatto ideale è 0,5 x CD quando la frattura di un osso senza qualsiasi tessuto molle. Utilizzando 0,75 conti per l'ulteriore compressione dei tessuti molli.
  7. Larghezza di incudine
    1. Impostare la larghezza di incudine (AW) a 0,4 cm per mouse tibia o del femore (Figura 2).
      Nota: Una larghezza maggiore è consigliata per gli esemplari più grandi come i ratti.
  8. Peso di RAM
    1. Un peso minimo di 250 g è consigliato per gli esemplari murini.
      Nota: Il peso supplementare possa essere filettato alla ram per gli esemplari più grandi (Figura 2).
  9. Velocità d'impatto
    1. Impostare l'altezza di caduta (DH) a 2 cm (Figura 2). Posizionare la ram in posizione iniziale, collegandolo all'elettromagnete attivato.
    2. Posizionare un arto prova nell'apparato di frattura. Premere il dorsum del piede contro la dima di posizionamento frattura fabbricato nel passaggio 2.2. Premere brevemente l'interruttore a pedale per liberare la ram e quindi reimpostarla nella sua posizione iniziale.
    3. Radiografia dell'arto prova incastrato. Analizzare l'arto per qualsiasi prova di una frattura (Figura 1D).
      Nota: Questo può essere sottile quando si utilizza basse velocità con una profondità di impatto controllato.
    4. Se nessuna frattura viene generata, ripetere i passaggi 2.9.1 - 2.9.3 e aumentare l'altezza di caduta cm 2.
    5. Se una frattura è generata, registrare l'altezza di caduta e moltiplicarlo per 1.1. Questa è la nuova DH.
    6. Utilizzando il DH dal passaggio 2.9.5, frattura dell'arto prova successiva.
    7. Se nessuna frattura viene generata, ripetere i passaggi 2.9.1 - 2.9.6 e aumentare l'altezza di caduta cm 2.
    8. Se una frattura è generati, ripetere i passaggi 2.9.6 - 2.9.7 fino a quando tutti i campioni di test vengono utilizzati. Registrare la finale DH e tutti i parametri (FL, CGI, JD, PL, MD, PS, CGL, CD, ID, AWe RW) dall'ottimizzazione. Registrare degli esemplari di prova età, sesso, genotipo e peso.

3. chiuso-stabilizzato frattura generazione

  1. Set-up
    1. Sterilizzare tutte le attrezzature e strumenti tramite autoclave, tallone caldo ad immersione o loro equivalenti.
    2. Inserire un elemento di riscaldamento sul tavolo operatorio e impostarlo alla temperatura ottimale. Coprire l'elemento con un telo chirurgico. Preparare 3 x 3 in2 di telo chirurgico con un cerchio di 0,75-in tagliato nel mezzo.
    3. Confermare la regolazione della Torre frattura prima di ogni prova (Figura 2). Impostare l'ID, AW, RWe DH per i valori derivati dal protocollo di ottimizzazione specifico per il sesso, l'età e genotipo dei campioni da studiare.
    4. Pesare e registrare il peso dell'animale.
  2. Chirurgia
    1. Adeguatamente sedare il mouse utilizzando anestetici inalatori (isoflurano: 4-5% per induzione; 1-2% per manutenzione) o un altro stabilito il protocollo di anestesia di laboratorio. La frequenza respiratoria dovrebbe essere 55-100 respiri/min. L'animale non deve essere reattivo a un pizzico di punta dell'arto posteriore.
    2. Somministrare la prima dose di buprenorfina l'analgesia postoperatoria (0,1 mg/kg per via sottocutanea).
    3. Applicare lubrificazione oculare per prevenire la secchezza della cornea.
    4. Eliminare i peli dell'animale con un tagliatore elettrico da metà tibia a metà femore, esponendo l'articolazione del ginocchio. Pulire il sito di peli in eccesso utilizzando nastro non reattivo. Preparare il sito di blocco con un tampone bagnato inumidito con 70% EtOH. Ripetere se necessario, per rimuovere tutti i capelli dalla zona di incisione.
    5. Preparare e pulire l'area blocco con tamponi alternativi di povidone-iodio e 70% EtOH. Utilizzare due sequenze di tampone alternativi per garantire la sterilità.
    6. Un drappo viene poi collocato attorno al sito chirurgico dopo che la pelle è stato opportunamente disinfettata.
    7. Perno dell'arto per essere fratturato mediante il protocollo descritto al punto 2.5. Acquisire le radiografie per confermare il pin estende la lunghezza del canale midollare ma non sporge dall'estremità prossimale o distale.
    8. Accendere l'elettromagnete e collegare la ram di impatto per collocarlo nella posizione di partenza.
    9. Posizionare il preparato nell'apparato di frattura collocandolo in posizione prona per fratture di femore o in posizione supina per fratture della tibia. L'arto bloccato deve essere posizionato tra le incudini e nell'attrezzatura frattura-posizionamento con il dorsum del piede premuto contro l'esterno del jig.
    10. Mentre premendo il piede con una mano e garantire che solo l'arto è nell'impatto ram area di destinazione, premere brevemente il pedale per liberare la ram. Sostituire la ram nella posizione di partenza.
    11. Acquisire le radiografie e confermare la posizione di frattura e il tipo.
  3. Gestione postoperatoria
    1. Monitorare l'animale ogni 15 minuti durante il suo recupero dall'anestesia fino a quando l'animale è cosciente, può mantenere decubito sternale ed è ambulatoriale. Confermare che l'animale è in grado di deambulare per un periodo di 72 h.
    2. Casa l'animale individualmente fino a che completamente ha recuperato.
    3. Mantenere l'analgesia per un periodo di 48 h con buprenorfina (0,1 mg/kg per via sottocutanea) somministrato ogni 12 h.
    4. Monitorare e registrare lo stato di salute dell'animale al giorno per 7-10 d o fino a quando l'eutanasia.
  4. Analisi post-rottura
    1. Misura FL, PL, CD, MD e del modello di frattura. Registrare le misurazioni in un file di dati master.

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La ghigliottina precedentemente utilizzata nel nostro laboratorio è stata sviluppata nel 2004 e si basava su modelli pubblicati da Einhorn21. Il design non ha consentito di regolazioni per adeguatamente tenere conto di eventuali differenze nella morfologia ossea e non ha permesso un posizionamento riproducibile dell'arto. Inoltre, l'apparato precedente necessarie due persone per farlo funzionare. Pertanto, abbiamo progettato, ingegnerizzato e costruito un nuovo app...

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Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Questo protocollo di generazione e l'ottimizzazione di frattura fornisce ai ricercatori un metodo efficiente per derivare i parametri di frattura ed eseguire una procedura minimamente invasiva, che produce le fratture trasversale, precise e ripetibile. Inoltre, questo protocollo costituisce un insieme comune di parametri di generazione di frattura, che favorisce la coerenza di metodo tra i ricercatori. Questi parametri consentirà la creazione di un database comune di frattura per stabilire standard di frattura basati su ...

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La ricerca riportata in questa pubblicazione è stata sostenuta dall'Istituto nazionale dell'artrite e patologie del sistema muscoloscheletrico e malattie della pelle dei National Institutes of Health, sotto Premio numero F30AR071201 e R01AR066028.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Support SubassemblySupplementary Figure 1
Beam, Support--Jaw Section 80/201003 x 9.00con #7042 a A, C, in trave terminale sinistra
, supporto - Sezione orizzontale80/201002 x 14.00
Trave, supporto - Verticale 180/201050 x 10.50  con #7042 in A all'estremità sinistra e in A all'estremità destra
Trave, supporto--Verticale 280/201010 x 10,50 con #7042 all'estremità D, B all'estremità sinistra e all'estremità A all'estremità destra
Trave, supporto - Montaggio su piastra80/201030 x 8.00 con #7036 all'estremità sinistra
Trave, supporto--Magnete80/201010 x 13.50 con #7042 in A, C, all'estremità destra
Ancoraggi (3)80/203392
Ancoraggio doppio (3)80/203091
Gruppo bullone (6)80/2033861/4-20 x 3/8"
Vite a testa bombata a testa bombata (6)80/2036041/4-20 x 3/4"
Ram SubassemblySupplementary Figura 2
Blocco, arrestoFigura 3
, guidasupplementarepersonalizzata
Asta, pistoneSupplementare personalizzato Figura 4
Figura 5
Piatto, montaggioCuscinetto a manicotto lineare personalizzato supplementare Figura 6
(2)McMaster-Carr8649T2
Dado esagonale (3)McMaster-Carr92673A1253/8-16 UNC
Vite a brugola (8)McMaster-Carr92196A1084/40 x 3/8"
Vite a brugola (6)McMaster-Carr92196A0324/40 x 1 1/8"
Vite a brugola (1)McMaster-Carr92196A267 10/32 3/8"
Sottogruppo magneteSupplementare Figura 7
Montatura, MagnetepersonalizzatoFigura 8
AlimentatoreMcMaster-Carr70235K23
Interruttore a pedaleMcMaster-Carr7376k2
ElettromagneteMcMaster-Carr5698k111
Filo - 10 piediMcMaster-Carr9936k12
Asta, magneteMcMaster-Carr95412A5661/4" asta filettata x 7"
staffa angolare (6)80/204108
vite a brugola (1)McMaster-Carr92196A70510/32 1 1/4"
dado esagonale (4)McMaster-Carr92673A1131/4-20 UNC
Assemblaggio completoSupplementare Figura 9
Staffa, ganascia gamba (2)personalizzataFigura 10
, FratturapersonalizzataFigura 11
Dima, Posizionamento-FratturapersonalizzataFigura 12
Altro
Tronchese per perniForniture e attrezzature medicheAghi 150S
SigmaZ192430, Z192376 23 g x 1,5" - femore di topo, 27 g x 1,25" - tibia di topo
Blocco supplementare personalizzato Figura 3Vite di allineamento Supplementare personalizzato Supplementare Piattaforma supplementare Supplementare Supplementare

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
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