In questo studio, modifichiamo un metodo sperimentale esistente per ottenere più risultati riproducibili, stabilendo un modello murino di occlusione (MCAO) dell'arteria cerebrale media. La somministrazione orale di Glycyrrhizae Radix et Estratto del metanolo di Rizoma (GR) (GRex), dopo induzione di colpo, diminuito significativamente il volume di infarto totale rispetto al gruppo di controllo non trattato.
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Articolo metodologico
Valutare gli effetti Neuroprotective di Glycyrrhizae Radix et Rhizoma estrarre utilizzando un modello murino di occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Ischemia seguita da riperfusione di flusso sanguigno cerebrale dopo un ictus conduce alla morte delle cellule nervose e perdita di tessuto cerebrale. Il modello animale più comunemente usato per lo studio di colpo è il modello di occlusione (MCAO) dell'arteria cerebrale media. Precedenti studi di ricerca sono riportati dimensioni differenti infarto anche quando la stessa specie animale sperimentale è stato usato in condizioni simili di MCAO. Di conseguenza, abbiamo sviluppato un metodo sperimentale migliore per affrontare questa discrepanza. Topi sono stati sottoposti a MCAO utilizzando un filamento di come il materiale di occlusione per simulare condizioni di colpo umano e lo spessore del filamento è stato ottimizzato per stabilire più volume di infarto riproducibile. Topi trattati con un metanolo Estratto di Glycyrrhizae Radix et Rizoma (GRex) dopo induzione di colpo ha mostrato un volume di infarto totale significativamente in diminuzione e aumento del numero di sopravvivere cellule riguardante il gruppo di controllo non trattato. Questo modificato protocollo sperimentale con successo e riproducibile ha dimostrato l'effetto benefico di GRex il colpo ischemico.
Introduzione
Danni al cervello causati da ischemia e riperfusione di flusso sanguigno cerebrale conduce alla morte delle cellule nervose e perdita di tessuto cerebrale. Questo tipo di danno cerebrale continua ad aumentare con la crescente prevalenza di malattie cerebrovascolari a causa della diffusione di malattie metaboliche come l'obesità, ipertensione e diabete mellito1,2. Il numero assoluto di pazienti anziani con ictus è aumentato drammaticamente in tutto il mondo, e il costo delle cure mediche per questi pazienti, che spesso sono lasciati con disabilità a lungo termine, è un grave onere della società. Di conseguenza,....
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Protocollo
Tutte le procedure che coinvolgono gli animali sono state approvate dal comitato etico dell'Università nazionale di Pusan (numero di omologazione, PNU-2016-1087). Una panoramica grafica di questo studio è illustrata nella Figura 1.
1. preparazione e somministrazione di GRex
Nota: Il GR utilizzato in questo studio è stato acquistato da una società farmaceutica commerciale.
- Mettere 200 g di GR in 2.000 mL di metanolo e incubare a temperatura ambiente (25 ° C) per 5 giorni.
- Filtrare la miscela utilizzando carta da filtro con spessore di 0,26 mm e porosità di 5 µm e q....
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Risultati
Nel gruppo normale di falsità-azionati, nessun infarto cerebrale si osserva mentre nel gruppo di controllo, si osserva una gamma piuttosto ampia di aree danneggiate. Nei topi GRex amministrato 300 mg/kg nel gruppo modello MCAO, una riduzione statisticamente significativa nella zona danneggiata è osservato (Figura 2).
I cambiamenti istologici sono studiati dalla macchiatura sezioni di cervello ischem.......
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Discussione
Con la crescente prevalenza di malattie metaboliche come l'ipertensione cronica, diabete ed iperlipidemia, che sono i principali fattori di rischio per l'ictus, il trattamento e la prevenzione del colpo sono diventati un'importante area di ricerca medica12, 13. i deficit nel linguaggio e movimento dopo un ictus sono fortemente correlati con il grado di danneggiamento del tessuto14 del cervello e provocare una scarsa qualità di vita per i p.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Non applicabile.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Korea | Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | |
| Carta da filtro qualitativa | Advantec | Carta da filtro n. 2 | Carta da filtro qualitativa |
| Dimetil solfossido (DMSO) | Sigma | D8418-250ML | Dimetil solfossido (DMSO) |
| Filtro per siringa (0,45 &; m) | Sigma | CLS431220 | Filtro per siringa (0,45 &; micro; m) |
| Stereomicroscopio Stereomicroscopio | Leica | M50 | |
| Stereomicroscopio | Nikon | SMZ745 | Stereomicroscopio |
| Laser Doppler | Moor Strumento | moorVMS-LDF | Laser Doppler |
| Anestesia Staffa da tavolo con N2O & Sistema di flussimetro O2 | Harvard Appratus | 34-1352 | Staffa da tavolo per anestesia con N2O& Sistema di flussimetro O2 Sistema |
| monitoraggio omeoretermico | Harvard Appratus | 55-7020 | Sistema di monitoraggio omeoreo |
| Fotocamera digitale | Canon | Eos-M2 | Fotocamera digitale |
| Criostato | Leica | CM3050S | Microscopio Criostato |
| Carl Zeiss | Zeiss Axio | ||
| Analisi dei dati | Systat Software Inc. | SigmaPlot versione 12 | Analisi dei |
| dati Analisi dei dati | NIH Image | ImageJ | Analisi dei dati |
| Dieta del topo | Doo Yeol Biotech Standard | roditore chow | Dieta del topo |
| Isoflurano | JOONGWAE | A02104781 | Isoflurano |
| Isoflurano | TROIKAA ISOTROY | 100 | Isoflurano |
| Sutura di seta (4-0 Seta nera) | AILEE | SK47510 | Sutura di seta (4-0 Seta nera) |
| Sutura di seta (3-0 Seta bianca) | Baekjae | 57 | Sutura di seta (3-0 Seta bianca) |
| Sutura in nylon (monofilamento 8-0) | AILEE | NB825 | Sutura in nylon (monofilamento 8-0) |
| 2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro (TTC) | Sigma | T8877-25G | 2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro (TTC) |
| Formalina (soluzione di formaldeide) | JUNSEI | 69360-1263 20KG | Formalina (soluzione di formaldeide) |
| Ematossilina (Harris Hematoxylin) | YD Diagnostics | EasyStain | Ematossilina (Harris Hematoxylin) |
| Eosina (1% Eosina Y soluzione) | MUTO PURE CHEMICALS | 3200-2 | eosina (soluzione di eosina y all'1%) |
| Cresil viola (acetato) | Sigma | C5042-10G | Cresil viola (acetato) |
| Paraformaldeide | Sigma-Aldrich | P6148-1KG | Paraformaldeide |
| Saccarosio | JUNSEI | 31365-0350 1KG | Saccarosio |
| Temperatura di taglio ottimale (OCT) composto | Scigen | 4583 | Temperatura di taglio ottimale (OCT) |
| composto Coltello da sezione | Fine Science Tools | 10055-12 | Coltello da sezionamento |
| #4 Forcipe | Fine Science Tools | 11241-30 | #4 Forcipe |
| 5 Forcipe | Fine Science Tools | 11254-20 | #5 Forcipe |
| # 6 Forcipe | Fine Science Tools | 11260-20 | # 6 Forcipe |
| # 7 Fine Forcep | Fine Science Tools | 11274-20 | # 7 |
| Forbici chirurgiche | Fine Science Tools | 14001-12 | Forbici chirurgiche |
| Extra Fine Bonn Forbici Fine Science | Tools | 14084-08 | Extra Fine Bonn Forbici |
| Moria Pascheff-Wolff Spring Forbici | Fine Science Tools | 15371-92 | Moria Pascheff-Wolff Forbici a molla |
| Vessel Dilating Forcep | Fine Science Tools | 18153-11 | Vessel Dilating Forcep |
Riferimenti
- Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered. Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).
- Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R.
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Ristampe e permessi
