Utilizzo di sistemi robotici per elaborare e incorporare colici murini campioni per le analisi istologiche

Fulvia Milena Cribiù; Claudia Burrello; Roberta Tacchi; Francesca Boggio; Dario Ricca; Flavio Caprioli; Stefano Ferrero; Federica Facciotti

doi:10.3791/58654

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Articolo metodologico

Utilizzo di sistemi robotici per elaborare e incorporare colici murini campioni per le analisi istologiche

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DOI:

10.3791/58654

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7 gennaio 2019

Fulvia Milena Cribiù^*¹ , Claudia Burrello^*² , Roberta Tacchi¹ , Francesca Boggio¹ , Dario Ricca¹ , Flavio Caprioli³^,⁴ , Stefano Ferrero¹ , Federica Facciotti²

¹Pathology Unit, Fondazione IRCCS Cà Granda, Ospedale Maggiore Policlinico, ²Department of Experimental Oncology, European Institute of Oncology, ³Gastroenterology and Endoscopy Unit, Fondazione IRCCS Cà Granda, Ospedale Maggiore Policlinico, ⁴Department of Pathophysiology and Transplantation, Università degli Studi di Milano

^* These authors contributed equally

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Sommario

Mancanza di standardizzazione per la processazione dei tessuti murini riduce la qualità delle analisi istopatologica murino rispetto agli esemplari umani. Qui, presentiamo un protocollo per eseguire l'esame istopatologico di murini tessuti infiammati e uninflamed colici a dimostrare la fattibilità di sistemi robotici abitualmente utilizzati per l'elaborazione e l'incorporamento di campioni umani.

Abstract

La comprensione delle malattie umane è stata notevolmente ampliata grazie allo studio di modelli animali. Tuttavia, la valutazione istopatologica di modelli sperimentali deve essere così rigorosa come quella applicata per i campioni umani. Infatti, trarre conclusioni affidabili e accurate criticamente è influenzato dalla qualità della preparazione della sezione di tessuto. Qui, descriviamo un protocollo per l'analisi istopatologica dei tessuti murini che implementa diversi passaggi automatizzati durante la procedura, dalla preparazione iniziale per l'inclusione in paraffina dei campioni murini. La riduzione delle variabili metodologiche attraverso la standardizzazione del protocollo rigoroso da procedure automatizzate contribuisce alla maggiore affidabilità delle analisi patologica murino. In particolare, questo protocollo viene descritto l'utilizzo di trattamento automatizzato e l'incorporamento di sistemi robotici, abitualmente utilizzati per la lavorazione di tessuti e inclusione in paraffina di campioni umani, per elaborare murini esemplari di infiammazione intestinale. Concludiamo che l'affidabilità dell'esame istopatologico dei tessuti murini è aumentato significativamente dopo l'introduzione di tecniche standardizzate e automatizzate.

Introduzione

Negli ultimi decenni, sono stati sviluppati diversi modelli sperimentali per sezionare i meccanismi patogenetici che portano a malattie umane¹^,². Al fine di valutare la gravità di una malattia, i ricercatori devono valutare l'effetto di un trattamento e studiare le variazioni architettoniche citologiche ed istologiche o la quantità di infiammazione³. Per eseguire su tali modelli sperimentali, dettagliate analisi istopatologiche sono necessari, spesso confrontando campioni murine ed umane⁴^,⁵.

Inoltre, ....