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Articolo metodologico

Meso-scala Particle Image Velocimetry studi di Neurovascular scorre In Vitro

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DOI:

10.3791/58902

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3 dicembre 2018

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* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Qui presentiamo metodi semplificati per fabbricare trasparente neurovascular fantasmi e caratterizzare il flusso in esso. Evidenziamo alcuni parametri importanti e dimostrare la loro relazione con la precisione del campo.

Abstract

Particle image velocimetry (PIV) viene utilizzato in un'ampia varietà di campi, a causa della opportunità che fornisce per appunto visualizzare e quantificare i flussi attraverso una vasta gamma di spazio-temporale. Tuttavia, la sua attuazione richiede in genere l'uso di strumentazione costosa e specializzata, che limita la sua utilità più ampio. Inoltre, all'interno del campo della bioingegneria, studi di visualizzazione del flusso in vitro anche spesso sono ulteriormente limitata dal costo elevato dei fantasmi di tessuto commercialmente provenienza che ricapitolano desiderati strutture anatomiche, in particolare per coloro che estendono il regime di mesoscala (cioè, submillimeter a scale di lunghezza di millimetro). Qui, presentiamo un protocollo semplificato sperimentale sviluppato per risolvere queste limitazioni, i cui elementi chiavi includono 1) un metodo relativamente a basso costo per la realizzazione di mesoscala fantasmi di tessuto mediante colata di silicone e stampa 3-d e 2) un quadro di analisi ed elaborazione immagine open source che riduce la domanda degli strumenti per la misurazione di flussi di mesoscala (cioè, velocità fino a decine di millimetri/secondo). Collettivamente, questo abbassa la barriera all'ingresso per nonexperts, sfruttando le risorse già a disposizione di molti ricercatori di bioingegneria. Abbiamo dimostrare applicabilità del presente protocollo nell'ambito della caratterizzazione di flusso neurovascular; Tuttavia, si prevede per essere rilevante per una vasta gamma di applicazioni di mesoscala in Bioingegneria e oltre.

Introduzione

PIV è ampiamente usato in meccanica dei fluidi sperimentale per la visualizzazione del flusso e le indagini quantitative di movimento fluido che variano nella scala di lunghezza da atmosferico a flussi microcircolatoria1,2,3. Mentre le specifiche della sua attuazione possono variare ampiamente quanto le sue applicazioni, un aspetto comune a quasi tutti gli studi PIV è l'uso di formazione immagine dei video del tracciante particelle seminato all'interno del fluido di lavoro, seguito da un'analisi pairwise di fotogrammi consecutivi per estrarre le caratteristiche di portata des....

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Protocollo

1. ABS-base sacrificale muffa fabbricazione

  1. Progettare un modello inverso del fantasma del tessuto desiderato utilizzando software CAD.
  2. Stampare il modello utilizzando una stampante 3D con ABS come il materiale da costruzione.

2. PDMS-base vascolare fantasma Fabrication

  1. Miscelazione
    1. Mescolare la base prepolimero PDMS e agente indurente in un rapporto di 10:1 (in peso); una miscela di 66 g fornisce sufficiente materiale per la fabbricazione di fantasmi con volumi fino a 50 cm3.
    2. Mettere il composto in un essiccatore sotto vuoto per 60 min a degas e ridurre a....

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Risultati

La figura 2 illustra il processo di fabbricazione fantasma del tessuto PDMS. I fantasmi progettati nel presente documento sono destinati per lo studio del flusso in idealizzato aneurismi intracranici, saccular, collo largo, come pure le arterie perforator ramificazione prossimali. Progettazione di ulteriori importanti caratteristiche includono 1) un serbatoio comune che alimentano tutti i pescherecci, per garantire uscita fluido non gravata dal fantasma - alt.......

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Discussione

Il protocollo descritto nel presente documento delinea un metodo semplificato per l'esecuzione di studi PIV per visualizzare neurovascular scorre fisiologicamente rilevanti dimensioni e flusso condizioni in vitro. In tal modo, serve a integrare protocolli riferiti da altri che si sono concentrati anche sulla semplificazione la quantificazione di campi vettoriali, ma all'interno di contesti molto diversi che richiedono che la considerazione di gran lunga più grande lunghezza scale25 o flus.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

Ringraziamenti

Gli autori riconoscono supporto parziale per questo progetto fornito da una sovvenzione seme collaborativo l'ufficio di ricerca e sviluppo economico presso UC Riverside.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Solidworks 2015DassaultSystems N/ASoftware CAD 
Dow Corning Sylgard 184 KitEllsworth Adesivo184 SIL ELAST KIT 3.9KGPDMS Kit
Stratasys Dimension EliteStratasys9180-00105Stampante 3D
P430 Modello Materiale CartucciaStratasys340-21202Materiale di costruzione ABS 
Cartuccia del materiale di supporto solubile P400 SRStratasys340-30200Materiale di supporto
CleanStation DT3PM3 Technologies00-00300RBagno di base
Lindberg Blue M LGO Box Furnace Thermo Scientific LB305745MForno
21G BD Precision Glide AgoBetcon DickensonBD 305167Segmento di stampo perforatore ramificato
Essiccatore (vuoto)Polylab55205Essiccatore
Branson 1800 Pulizia UtrasonicaBransonCPX-952-116R
Sonicatore AcetoneFisher ChemicalA9494Acetone
Alcool isopropolFisher ChemicalA4514Alcool isopropol
GliceroloFisher ChemicalGW33500Glicerolo
10um Polistirene Giallo-Verde Particelle fluorescenti MagspherePSF-010UMPerline fluorescenti
Phantom Miro Vision ResearchMiro M310Fotocamera ad alta velocità
MicropompaCole-Parmer81101Pompa di ricircolo
Leica DM2000Leica MicrosystemsDM2000Microscopio fluorescente
10X ObiettivoLeica Microsystems506259per perforatore
Obiettivo Leica 2.5X LeicaMicrosystems11506083Obiettivo sacco per aneurisma
Leica Blue Filter Cube L5Leica Microsystems513840Blue Filter Cube
Leica EL6000Leica Microsystems11504115Sorgente luminosa
AlconoxAlconox Inc1104-1Detergente
ImageJNIHN/ASoftware di analisi delle immagini open source
https://imagej.nih.gov/ij/
Particle Image Velocimetry Plugin PIVQingson TsengN/Ahttps://sites.google.com/site/qingzongtseng/piv
Leica

Riferimenti

  1. Grant, I. Particle image velocimetry: A review. Proceedings of the Institution of Mechanical Engineers, Part C: Journal of Mechanical Engineering Science. 211 (1), 55-76 (1997).
  2. Lindken, R., Rossi, M., Große, S., Westerweel, J.

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Ristampe e permessi

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