Processo di stampaggio basati su bagnato-filatura di gelatina per la rigenerazione tissutale

Sommario

Abbiamo sviluppato e descrivere un protocollo basato sul concetto di filatura bagnata, per la realizzazione di biomateriali basati su gelatina utilizzata per l'applicazione dell'ingegneria tissutale.

Abstract

Questo articolo presenta un metodo economico per fabbricare gelatina, come un polimero naturale, in fibre monofilamento o altre forme appropriate. Attraverso sul bagnato metodo di filatura, fibre di gelatina sono prodotte per estrusione liscia in un mezzo adatto coagulazione. Per aumentare la superficie funzionale di queste fibre di gelatina e la loro capacità di imitare le caratteristiche dei tessuti, la gelatina può essere modellato in una forma di tubo facendo riferimento a questo concetto. Esaminato dai test in vitro e in vivo, i tubi di gelatina dimostrano un grande potenziale per l'applicazione nell'ingegneria tissutale. Agendo come un materiale di riempimento adatto gap, gelatina tubi possono essere utilizzati per sostituire il tessuto nella zona danneggiata (ad esempio, nel sistema nervoso o cardiovascolare), nonché per promuovere la rigenerazione fornendo una sostituzione diretta delle cellule staminali e circuiti neurali. Questo protocollo fornisce una procedura dettagliata per la creazione di un biomateriale basato su un polimero naturale, e la sua attuazione è previsto per lo sviluppo del correlativi polimeri naturali, che aiutano a realizzare strategie di rivitalizzazione del tessuto di grande beneficio.

Introduzione

L'ultimo sviluppo nella rigenerazione del tessuto comporta l'applicazione dell'ingegneria tissutale, che rappresenta una sfida per il miglioramento di nuove strategie terapeutiche nei trattamenti medici. Ad esempio, il limitato potenziale di rigenerazione del sistema nervoso, seguenti lesioni o malattia, pone un problema significativo per la salute in tutto il mondo. A causa della complessità dei processi fisiopatologici associati con il sistema nervoso, l'uso di autoinnesto tradizionale o l'esecuzione di chirurgia di stabilizzazione ha dimostrato di offrire benefici in esiti funzionali, ma non ci è prova forte per gli effetti della fissazione spinale Chirurgia

Protocollo

I tessuti grassi sono stati ottenuti da interventi chirurgici ortopedici, come certificato da istituzionale Review Board di Tri-Service ospedale generale, Taipei, Taiwan, r.o.c. procedure che coinvolgono soggetti animali sono state approvate dal comitato di cura degli animali a livello nazionale Centro medico della difesa, Taiwan (R.O.C).

1. Inumidire il processo di filatura

1. Preparazione della soluzione
   1. Sciogliere 5 g di gelatina in polvere in 100 mL di acqua bidistillata per ottenere la concentrazione della soluzione di 5% (p/v).
   2. Mescolare il composto lentamente a 60-70 ° C durante la notte ....

Risultati

In questo studio, abbiamo sviluppato con successo la gelatina in fibre (Figura 2A) e tubi (Figura 2B, C) attraverso il concetto di filatura bagnata user-friendly. Questi materiali a base di gelatina possono essere utilizzati come qualsiasi strumento medico, a seconda delle loro forme. Considerando che la superficie funzionale e telaio di tali materiali sono più adatti per la rigenerazione tissuta.......

Discussione

Abbiamo presentato lo sviluppo di biomateriali a base di gelatina utilizzando un semplice wet spinning tecnica può essere applicata nello studio dei polimeri naturali per la rigenerazione tissutale. Questo lavoro ha dimostrato la possibilità di fabbricazione di gelatina come fonte proteica grande senza l'aggiunta di altre fonti, con l'obiettivo di ottimizzare le proprietà della gelatina stessa. Lo sviluppo di biomateriali a base di gelatina è stato interamente effettuato a temperatura ambiente (22-26 ° C). Una preparazio.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Preparazione della soluzione:
Gelatina di tipo B (suina)	Ferak	Art. -Nr. 10733	flaconcino da 500 g
Processo di filatura a umido:
Pompa peristaltica	Gilson	Modello M312	Minipuls*3
Connettore per tubo in plastica	World Precision Instruments	14011	1 scatola
Siringa	Sterican	5A06258541	26Gx1/2"(0,45 x 12mm)
Acetone	Ferak	Art. -Nr. 00010	Flaconcino da 2,5 L
Policaprolattone CAPA 6500	Perstorp	24980-41-4-Diclorometano
	Scharlau	CL03421000	Flaconcino da 1 L
Pipetta in vetro Pasteur	Fisher Scientific	13-678-20A-Emostatico
	Shinetec instruments	ST-B021-Catetere
venoso periferico (Introcan Certo)	B. Braun	1B03258241	24Gx3/4"(0,7 x 19 mm)
Morfologia del tubo di gelatina:
Macchina per rivestimento per sputtering ionico	Hitachi	e1010-Microscopia
elettronica a scansione	Hitachi	S-3000N	-
Coltivazione di cellule sulla provetta di gelatina:
Trypsin-EDTA	Gibco	488625	Fiala da 100 mL
Siero fetale bovino	Gibco		923119 Fiala da 500 mL
Terreno di Eagle's modificato di Dulbecco	Gibco	31600-034	Polvere
Cheratinocita-SFM medium	Gibco	10744-019	Fiala da 500 mL
Pallone di coltura T25	TPP	90025	Tipo VENT
Piastra a 6 pozzetti	Falcon	1209938	-
Immunocitochimica:
Soluzione salina tamponata con fosfato	Gibco	654471	Flaconcino da 500 mL
Acido acetico glaciale	Ferak	Art. -Nr. 00697	Flaconcino da 500 mL
Tensioattivo NP-40 (soluzione di Tergitol)	Sigma	056K0151	Flaconcino da 500 ml
Siero di capra normale	Vector Laboratories	S-1000-20	Fiala da 20 mL, concentrato
Nestina (anticorpo primario)	Santa Cruz Biotechnology	SC-23927-Donkey
anti-mouse-fluoresceina isotiocianato ( anticorpo secondario)	Santa Cruz Biotechnology	SC-2099-Hoechst
33342	Anaspec	AS-83218	fiala da 5 ml
In vivo test di biocompatibilità:
Tiletamine+zolazepam	Virbac	BC91	flaconcino da 5 ml
Xilazina	Bayer corea	KR03227	flaconcino da 10 ml
Ketoprofene	Astar	1406232	flaconcino da 2 ml Soluzione
di iodio Povidone	Everstar	HA161202	Barile da 4 litri
Cefazolin	Cina Chemical & Farmaceutico	18P909	Flaconcino da 1 g
Lama per bisturi	Shinetec instruments	ST-B021-Forbice
chirurgica	Shinetec instruments	ST-B021	-