Articolo metodologico

Basso costo protocollo di analisi dell'impronta e appendere casella Test per topi applicato lo Stress cronico ritenuta

DOI:

10.3791/59027

⸱

23 gennaio 2019

 , 
1Division of Biology, Center for Molecular Medicine, Jichi Medical University

In questo articolo

Sommario

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Il protocollo di basso costo consistente di analisi dell'impronta e appeso prova box dopo lo sforzo del fermo è utile per valutare i disordini di movimento di modello del topo.

Abstract

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Dispersione di andatura è osservata frequentemente in pazienti con disordini del movimento. In modelli murini utilizzati per disturbi del movimento, analisi del passo è importante test comportamentali per determinare se i topi imitano i sintomi dei pazienti. Deficit motori sono spesso indotte da stress quando nessun fenotipo motore spontaneo è osservato nei modelli del mouse. Pertanto, analisi del cammino seguito da carico sarebbe un metodo sensibile per la valutazione del fenotipo motore in modelli murini. Tuttavia, i ricercatori devono affrontare il requisito di un apparecchio costoso per ottenere risultati quantitativi automaticamente da analisi del passo. Per lo stress, lo sforzo di caricamento con metodi semplici senza costosi apparati necessari per scosse elettriche e costretto in esecuzione è auspicabile. Di conseguenza, introduciamo un protocollo semplice e a basso costo, costituito da analisi dell'impronta con carta e inchiostro, appeso test box per valutare la funzione di motore e carico di stress definiti da fermo con un tubo conico. Il deficit del motore dei topi sono stati correttamente rilevati dal presente protocollo.

Introduzione

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Disordini di movimento sono definiti come disturbi del sistema nervoso mostrando un eccesso o scarsità di movimenti volontari o automatico1. In particolare, disturbi dell'andatura sono frequentemente documentato tra i pazienti con i disordini di movimento2,3,4. Pertanto, l'analisi del passo è un idoneo test comportamento per la validazione di modelli animali di disordini di movimento. Nei topi, sono state effettuate analisi automatizzata di andatura per camminare a velocità naturale5 ed a velocità regolabile da tapis roulant

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Protocollo

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Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti in maniera umana. Istituzionali animale esperimento Comitato di Jichi Università medica approvato lo studio. Lo studio è stato condotto in conformità con il regolamento istituzionale per esperimento animale e linea guida fondamentale per condotta corretta di esperimento di animali e attività connesse nelle istituzioni accademiche di ricerca sotto la giurisdizione del MEXT del Giappone. Topi usati in questo protocollo sono state descritte in precedenza21.

1. Test di scatola d'attaccatura

  1. Registrare il peso di ogni topo. Contrassegnare la coda dalla penn....

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Risultati

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I topi eterozigoti maschi di Atp1a3 (Atp1a3+ / −) che sono il modello di topo per la rapida insorgenza distonia parkinsonismo e littermates selvaggio-tipo sono stati utilizzati in questo protocollo. Atp1a3+ / − ha mostrato significativamente più brevi lunghezze di falcata della zampa anteriore e hindlimb rispetto a quelli di tipo selvatico a 4 settimane di età (Figura 5A e 5B figura

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Discussione

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L'analisi dell'impronta e il riquadro sporgente di test sono test comportamentali semplici e poco onerose per la funzione motoria dei topi. I fenotipi di neurobehavioral in diversi modelli di mouse sono stati rilevati con successo da queste prove. Ad esempio, accorciato la lunghezza della falcata nella sclerosi laterale amiotrofica24, maggiore lunghezza della falcata asimmetrica all'atassia-telangiectasia25, maggiore lunghezza di sovrapposizione nella malattia di Huntington.......

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Dichiarazioni

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Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

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Questo lavoro è stato supportato da JSP (Japan Society for Promotion of Science) KAKENHI (sovvenzione per Scientific Research C), concedere numero 18K 07373 (A.S.) e sovvenzioni per le Università Private.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Scatola sospesaO' hara & Co.http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/
PennarelloZEBRAMO-120-MC-BK
Scatola portaO' hara & Co.http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/Accessorio per apparecchi di test a fascio bilanciato
ScatoleO' hara & Co.-Parete laterale della pista
Inchiostro neroShin-asahi-Inchiostro
rossoMaruyamakogyoBC-6
Piastra di Petri monousoCorning351008Piastre di Petri (35 mm di diametro)
Askul Multipaper Super White J Monochrome A3Askul701-712Carta bianca (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm)
50 mL Tubo conicoCorning
Trapano quadratoKAKURI CorporationFABBRICA FAI DA TE (K32-0313)
430829

Riferimenti

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  1. Warner, T. T. Movement disorders. Practical Guide to Neurogenetics. , Elsevier Health Sciences. (2008).
  2. Brashear, A., DeLeon, D., Bressman, S. B., Thyagarajan, D., Farlow, M. R., Dobyns, W. B. Rapid-onset dystonia-parkinsonism in a second family. Neurology. 48 (4), 1066-1069 (1997).
  3. Linazasoro, G., Indakoetxea, B., Ruiz, J.,....

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Analisi del camminofunzione motoria del topotest di carico da stressmisurazione della lunghezza del passolarghezza della base posteriorepreparazione del tubo di contenimentofenotipizzazione comportamentale

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