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Articolo metodologico

Semplici strumenti fatti in casa per gestire le mosche della frutta -Drosophila melanogaster

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DOI:

10.3791/59613

24 luglio 2019

In questo articolo

Sommario

Descritto qui è l'uso di diversi strumenti fatti in casa per trasferire, raffreddare e uccidere la Drosophilaadulta , così come per pulire fiale di cultura del vetro e raccogliere le uova. Questi strumenti sono facili da realizzare e sono piuttosto efficienti nella gestione della Drosophila.

Abstract

La mosca della frutta, La Drosophila melanogaster, è ampiamente utilizzata sia nella ricerca biologica che nell'educazione biologica. La manipolazione delle mosche adulte è comune ma difficile nella pratica, poiché le mosche adulte volano. Dimostrata qui è come fare alcuni strumenti semplici ed economici per affrontare problemi difficili nella gestione della Drosophila. I fori nei tappi di schiuma sono fatti e punte pipette o imbuti vengono inseriti nei fori. Le mosche si spostano quindi solo in una direzione nell'assemblaggio della punta/imbuto della pipetta, consentendo un controllo efficiente del trasferimento di Drosophila adulti dentro o fuori da una fiala. I protocolli esistenti sono stati modificati per raffreddare le mosche raffreddando raffreddandoili raffreddando nel ghiaccio tritato e trasferendole su una superficie fredda e dura del gelato. Il gelato è coperto da un pezzo di garza medica che mantiene le mosche immobilizzate dall'acqua condensata quando esaminate sotto uno stereoscopio. Le mosche vengono infine eutanasia per il conteggio e lo smistamento o scartate mediante microonde. Una gabbia a forma di bottiglia è stata sviluppata anche per la raccolta delle uova, nonché un dispositivo di risparmio di manodopera e un protocollo di accompagnamento per la pulizia delle fiale di coltura del vetro.

Introduzione

La mosca della frutta, La Drosophila melanogaster, è un organismo modello ampiamente utilizzato nella ricerca biologica e nell'educazione alla biologia per studiare una vasta gamma di argomenti1,2. I problemi di base di gestione della Drosophila sono il trasferimento di adulti dalla fiala alla fiala e l'immobilizzazione delle mosche in modo che siano più facili da gestire, come tutti gli adulti (ad eccezione di alcuni mutanti3,4) possono volare.

Convenzionalmente, un ricercatore trasferisce le mosche da una....

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Protocollo

1. Preparazione di strumenti e accessori

  1. Arresti a punta/funnel
    1. Ottenere due tappi di spugna (il diametro dei tappi deve essere leggermente maggiore del diametro interno delle fiale utilizzate per trasferire le mosche). Fare un buco nei centri della spugna tappi con un ferro da saldatura elettrica riscaldato.
    2. Ottenere due punte pipette da 1 mL, tagliarne una a metà trasversalmente con un coltello affilato e scartare l'estremità appuntita. Quindi, tagliare 1,5 cm dell'estremità appuntita sulla seconda punta della pipetta. Incollare i resti delle due punte pipette insieme a un adesivo per tutti gli usi per fare una punta d....

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Risultati

I T- e F-stopper sono stati sviluppati come un insieme di strumenti semplici che possono essere adattati e utilizzati in qualsiasi attività di trasferimento di mosca. Trasferire mosche da una vecchia cultura in diverse culture fresche comporta la rimozione dei tappi delle fiale fresche, la loro sostituzione con i tappi F, quindi toccando le mosche nella vecchia fiala, rimuovendo rapidamente la spina e sostituendola con un T-stopper. Se il vecchio cibo è compatto, allora è importante capov.......

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Discussione

Alcuni strumenti fatti in casa per la gestione delle attività di base coinvolte nell'allevamento e nella sperimentazione della Drosophila sono descritti in questo documento. Questi strumenti sono semplici ma piuttosto efficaci. Praticamente, qualsiasi laboratorio può fare questi strumenti con facilità, e una ricerca o un laboratorio didattico non ha bisogno di trovare un'alternativa già pronta che forse non è disponibile a livello locale.

Il trasferimento del volo è la pratica più com.......

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Dichiarazioni

L'autore non ha nulla da rivelare.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Un paio di pinze
Trapano avvitatorevelocità massima: 500 giri/min
Saldatore
Lima
Diametro imbutodel disco< 60mm
Ghiacciaia
Spille
TermometroHCIYET HT-830
Guanti
Matite meccaniche Garza
Tubo100 ul
Forno
Parafilm
Piattodiametro interno 60 mm
Puntali1 ml
Film plastico
Piatto Peri inΦ 36 mm utilizzato per coprire la fiala vuota
Pinzette
Guanti da lavoro protettivi
Impacchi26,5&; 14,5&volte; 2,5 cm o più grande
Soffiatore
Tagliamoschettone
Bottiglia500 ml, diametro interno c.a. 65 mm
Tappo
Spugne in
Spazzola
Fiala Phi; 34 mm & tempi; 90 millimetri
a batteria elettricoper insetti a infrarossi di gomma a polsino lungomedica per microcentrifuga a microonde Peri per pipette plasticaa punta di ghiaccio duro ricongelabili d'aria in gomma per bibite in spugnaacciaio inoxper tubi

Riferimenti

  1. Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
  2. JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
  3. Ashburner....

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Ristampe e permessi

Tag

Manipolazione di DrosophilaTrasferimento delle moscheImmobilizzazione delle moscheRaccolta delle uovaPulizia delle provetteAnestesia per refrigerazioneSacrificio tramite microondeTappini di schiumaPunte per pipetteMetodo del pacchetto di ghiaccio