Method Article

Valutazione della prensione qualificata nei topi utilizzando un auto-allenatore

DOI:

10.3791/59784

September 12th, 2019

In This Article

Summary

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Metodo per valutare l'impatto della formazione sulle capacità motorie è uno strumento utile. Sfortunatamente, la maggior parte delle valutazioni comportamentali può essere laboriosa e/o costosa. Descriviamo qui un metodo robotico per valutare la prensione (reach-to-grasp) abilità nei topi.

Abstract

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Descriviamo un metodo per introdurre topi ingenui a un nuovo compito di prensione (reach-to-grasp). I topi sono alloggiati in gabbie con una fessura frontale che permette al mouse di uscire dalla sua gabbia e recuperare pellet di cibo. La restrizione alimentare minima viene utilizzata per incoraggiare i topi a eseguire il recupero del cibo dalla fessura. Quando i topi iniziano ad associarsi arrivando alla fessura per il cibo, i pellet vengono tirati via manualmente per stimolare l'estensione e la pronazione della zampa per afferrare e recuperare il pellet attraverso lo slot frontale. Quando i topi iniziano a raggiungere i pellet quando arrivano allo slot, il saggio comportamentale può essere eseguito misurando la velocità con cui riescono a cogliere e recuperare il pellet desiderato. Vengono poi introdotti in un auto-addestratore che automatizza sia il processo di fornitura di pellet alimentari per il mouse da afferrare, sia la registrazione di tentativi di raggiungere e afferrare riusciti e non riusciti. Ciò consente la raccolta di dati di raggiungimento per più topi con il minimo sforzo, da utilizzare nell'analisi sperimentale a seconda dei casi.

Introduction

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I metodi per testare sperimentalmente un'abilità motoria lesioni pre e post-neurologiche, nonché modulare la tempistica, la quantità e il tipo di allenamento motorio sono importanti per la ricerca traslazionale. Nell'ultimo decennio, i topi, a causa della conseguente facilità di manipolazione genetica, sono diventati un sistema modello popolare in cui chiarire i meccanismi dell'apprendimento motorio pre e post-lesione. Tuttavia, i saggi comportamentali nei topi non sono stati ottimizzati nello stesso modo in cui tali saggi sono stati per altri mammiferi (soprattutto ratti). Inoltre, ci sono importanti differenze tra il comportamento di un topo e un ratto che suggerisc....

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Protocol

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Tutti i metodi qui descritti sono stati approvati dall'ACUC (Animal Care and Use Committee) della Johns Hopkins University.

1. Preparazione delle gabbie per topi per l'uso

  1. Creare un'apertura scanalata con dimensioni di 0,8 cm di larghezza e 7 cm di altezza dalla base all'estremità anteriore di ogni gabbia, come illustrato nella Figura 1. Questa fessura serve come l'apertura attraverso la quale l'animale raggiungerà.
    NOTA: l'auto-formatore è stato progettato per l'uso con le dimensioni standard della gabbia del mouse (come mostrato nella Figura 1) fornite dalla maggior ....

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Results

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In generale, si consiglia di che ogni sessione di formazione consista in circa 20-30 prove, che possono essere impostate dall'utente, eseguite automaticamente dal formatore automatico e salvate in un unico file di registro per sessione e mouse. Ogni prova può essere eseguita consecutivamente, subito dopo l'altra, con 2-5 s di pausa. I topi formati sull'auto-formatore mostrano un aumento delle abilità in 10 sessioni di allenamento.

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Discussion

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Il nostro auto-trainer valuta la comprensione degli arti anteriori (prensioni) in modo automatizzato. Per raggiungere questo endpoint, molti dei parametri progettati per l'attività di prensione del mouse, tra cui il posizionamento del pellet, le dimensioni del pellet e i criteri di allenamento, sono stati iterati nel corso di diversi anni e adattati dai protocolli precedenti2,5 ,6. Il progresso qui è l'automazione del compito u.......

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Disclosures

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Dan Tasch e Uri Tasch di Step Analysis, LLC ha prodotto un dispositivo auto-trainer con il pagamento di Richard J. O'Brien e Steven R.

Acknowledgements

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Il dispositivo di allenamento automatico è stato costruito da Jason Dunthorn, Uri Tasch e Dan Tasch presso Step Analysis, LLC, con il supporto di input di progettazione e le istruzioni fornite da Robert Hubbard, Richard O'Brien, e Steven .

Teresa Duarte del Centro Champalimaud per l'Ignoto ha fornito preziose informazioni e idee su come descrivere e classificare le azioni del topo.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Filamento ABSstampato in 3D personalizzatoN/Autilizzato per portapellet, telaio, braccio e imbuto
Foglio ABSMcMaster-Carr8586K581spessore 3/8"; utilizzato per componenti di piattaforma, guide per stand di posizionamento e base
Adruino MiniAdruinoA000087versione nano compatibile anche così come altri microcontrollori simili
Supporto di posizionamentoMcMaster-Carr9967T4335 libbre di capacità di carico
Tubo rotondo in acrilico trasparenteMcMaster-Carr8532K14ID 3/8"
Low-Carbon  Filo d'acciaioMcMaster-Carr8855K140.148"  diametro
Dispenser di pelletLafayette Strumento: Neuroscience80209-45con ruota intercambiabile da 45 mg e supporto opzionale
Photointerrupter Breakout Board SparkFunBOB-09322 ROHSprogettato per Sharp GP1A57HRJ00F
Sensore di oggetti riflettentiFairchild SemiconductorQRD1113uscita
fototransistor ServomotoreSparkFunS8213generico ingranaggio in metallo (dimensioni micro)
Fotointerruttore trasmissivoDistanza tra GP1A57HRJ00F nitide: 10 mm, fessura: 1,8 mm

References

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  1. Whishaw, I. Q. An endpoint, descriptive, and kinematic comparison of skilled reaching in mice (mus musculus) with rats (rattus norvegicus). Behavior Brain Research. 78, 101-111 (1996).
  2. Farr, T. D., Whishaw, I. Q.

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