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Articolo metodologico

Un modello di criolesionismo per studiare l'infarto miocardico nel mouse

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DOI:

10.3791/59958

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19 settembre 2019

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Questo articolo dimostra un modello per studiare il rimodellamento cardiaco dopo la crioinfortuni miocardica nei topi.

Abstract

L'uso di modelli animali è essenziale per sviluppare nuove strategie terapeutiche per la sindrome coronarica acuta e le sue complicazioni. In questo articolo, dimostriamo un modello infarto crioinfortunio criologico murino che genera dimensioni infarto precise con elevata riproducibilità e replicabilità. In breve, dopo l'intubazione e la sternotomia dell'animale, il cuore viene sollevato dal torace. La sonda di un sistema di erogazione di azoto liquido portatile viene applicata sulla parete miocardiale per indurre criolesioni. La funzione ventricolare alterata e la conduzione elettrica possono essere monitorate con ecocardiografia o mappatura ottica. Il rimodellamento miocardico transmurale dell'area infartuata è caratterizzato dalla deposizione di collagene e dalla perdita di cardiomiociti. Rispetto ad altri modelli (ad esempio, la legatura LAD), questo modello utilizza un sistema di somministrazione di azoto liquido portatile per generare dimensioni infarto più uniformi.

Introduzione

La sindrome coronarica acuta (ACS) è la principale causa di morte nel mondo occidentale1,2. L'occlusione acuta delle arterie coronarie porta all'attivazione della cascata ischemica e della necrosi del tessuto cardiaco interessato3. Il miocardio danneggiato viene gradualmente sostituito dal tessuto cicatriziale non contrattuale, che manifesta clinicamente come insufficienza cardiaca4,5. Nonostante i recenti progressi nel trattamento dell'ACS, la prevalenza di ACS e insufficienza cardiaca correlata all'ACS è in aumento e le opzion....

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Protocollo

Gli animali hanno ricevuto cure umane nel rispetto della Guida per i Principi degli Animali da Laboratorio, preparata dall'Istituto di Risorse Animali da Laboratorio, e pubblicata dai National Institutes of Health. Tutti i protocolli sugli animali sono stati approvati dall'autorità locale competente (comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali dell'Università della California (UCSF).

1. Cura degli animali

  1. Ottenere topi all'età di 14 settimane del peso di circa 27 g (ad esempio, dall'Istituto di Animali da laboratorio).
    NOTA: i mouse BALB/c vengono utilizzati per questo articolo.
  2. Tenere i topi in condizion....

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Risultati

Il modello infarto crioinfortuni è adatto per studiare ACS e le sue complicazioni. In questo modello si riscontrano bassi tassi di mortalità e un efficiente recupero postchirurgico. Il crioinfortuni ha indotto danni miocardici che portano a una ridotta funzione cardiaca, allo saccoppiamento elettrico e al rimodellamento transmurale.

L'ecocardiografia può essere utilizzata per monitorare la funzione cardiaca in modo non invasivo in vivo. Nei cuori crioferiti, l'ecocardiografia dimostra una ridu.......

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Discussione

Questo articolo descrive un modello di crioglione del topo per studiare ACS e le relative opzioni farmacologiche e terapeutiche.

Il passo più importante è l'applicazione della criosonia sul tessuto cardiaco. La durata del contatto deve essere strettamente controllata per ottenere la dimensione ottimale dell'infarto e per garantire risultati riproducibili. Il raffreddamento prolungato del miocardio porterà a infarti di grandi dimensioni o perforazione ventricolare. Al contrario, il tempo di raf.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Ringraziamo Christiane Pahrmann per la sua assistenza tecnica. D.W. è stato sostenuto dalla Max Kade Foundation. La T.D. ha ricevuto sovvenzioni dall'Else Kroner Fondation (2012_EKES.04) e dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. ha ricevuto sovvenzioni per la ricerca dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; SCHR992/3- 1, SCHR992/4-1).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Siringa da 10 mlThermo Scientific03-377-23
Sutura 5-0 proleneEthiconEH7229H
Sutura 6-0 proleneEthicon8706H
Sutura 8-0 EthilonEthicon2808G
Assorbimento SpearsFine Science Tools18105-01
BALB/cIl laboratorio JacksonCodice 000651
Bepanthen Unguento per occhi e nasoBayer1578675Unguento per gli occhi
Soluzione di betadineBetadine Purdue PharmaNDC:67618-152
Pinze smussateStrumenti per la scienza fine18025-10
BuprenexReckitt BenckiserNDC Codici:  12496-0757-1, 12496-0757-5Buprenorfina
Cryoprobe 3mmBrymill Cryogenic SystemsCry-AC-3 B-800
etanolo 70%Th. Geyer2270
Forcipe curvoS & T00284
Pinze finiStrumenti per le scienze11251-20
Pinze standardStrumenti per le scienze11023-10
Sonda per anatomia lordaStrumenti per le scienze10088-15
TagliacapelliWAHL8786-451A ARCO SE
Kit cauterio per alte temperatureBovie18010-00
ISOFLURANOHenry Schein Animal Health029405
Catetere IV 20GB. Braun603028
Divaricatore Mini-GoldsteinStrumenti di Fine Science17002-02
NaCl 0,9%B.BraunPZN 06063042                  Arte. Nr.: 3570160soluzione salina
Porta aghiFine Science Tools12075-14
Apparecchio curvo Harvard72-0146
NovaminsulfonRatiopharmPZN 03530402Metamizole
Operating Board Braintree Scientific39OP
Punta fine sostituibileBovieH101
ForbiciFine Science Tools14028-10
Ventilatore per piccoli animaliKent ScientificRV-01
Forbici a molla - Angolato al latoFine Science Tools15006-09
Microscopio operatorioLeica M651
Nastro chirurgico Transpore3M1527-1
Vannas Forbici a mollaStrumenti di scienza fine15400-12
Vaporizzatore Kent ScientificVetFlo-1205S
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Riferimenti

  1. Writing Group. Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association. Circulation. 133 (4), 38-360 (2016).
  2. de Alencar Neto, J. N. Morphine, Oxygen, Nit....

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Ristampe e permessi

Tag

Modello murinosomministrazione di azoto liquidoanalisi della funzione ventricolaremonitoraggio ecocardiograficomappatura otticacolorazione istologicadeposizione di collagenefrazione vascolare stromale