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Articolo metodologico

Chirurgia stereotassica per l'impianto di array di microelettrodi nel Common Marmoset (Callithrix jacchus)

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DOI:

10.3791/60240

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29 settembre 2019

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Questo lavoro presenta un protocollo per eseguire un impianto stereotassico e neurochirurgico di array di microelettrodi nel comune marmoset. Questo metodo consente specificamente registrazioni elettrofisiologiche in animali che si comportano liberamente, ma può essere facilmente adattato a qualsiasi altro intervento neurochirurgico simile in questa specie (ad esempio, cannula per la somministrazione di farmaci o elettrodi per la stimolazione cerebrale).

Abstract

I marmoset (Callithrix jacchus) sono piccoli primati non umani che stanno guadagnando popolarità nella ricerca biomedica e preclinica, comprese le neuroscienze. Filogeneticamente, questi animali sono molto più vicini agli esseri umani dei roditori. Mostrano anche comportamenti complessi, tra cui una vasta gamma di vocalizzazioni e interazioni sociali. Qui, viene descritta un'efficace procedura neurochirurgica stereotassica per l'impianto di array di elettrodi di registrazione nel marmoset comune. Questo protocollo descrive anche i passaggi pre e postoperatori della cura degli animali che sono necessari per eseguire con successo tale intervento chirurgico. Infine, questo protocollo mostra un esempio di potenziale sul campo locale e registrazioni di attività di picco in una marmoset liberamente comandata 1 settimana dopo la procedura chirurgica. Nel complesso, questo metodo offre l'opportunità di studiare la funzione cerebrale in marmoset svegli e liberamente comportandosi. Lo stesso protocollo può essere facilmente utilizzato dai ricercatori che lavorano con altri piccoli primati. Inoltre, può essere facilmente modificato per consentire altri studi che richiedono impianti, come elettrodi stimolanti, microiniezioni, impianto di optrodes o cannula guida, o ablazione di regioni tissutali discrete.

Introduzione

Marmoset comuni (Callithrix jacchus) stanno guadagnando il riconoscimento come un importante organismo modello in molti campi della ricerca, tra cui le neuroscienze. Questi primati del nuovo mondo rappresentano un importante modello animale complementare sia per i roditori che per altri primati non umani (NHP), come il macaco di rhesus. Come i roditori, questi animali sono piccoli, facili da manipolare e relativamente economici da curare e allevare1,2,3,4, rispetto ai NHP più grandi. Inoltre, questi animali hanno una propensione per....

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Protocollo

Gli esperimenti sugli animali sono stati effettuati in conformità con il National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals e approvati dal Santos Dumont Institute Ethics Committee (protocollo 02/2015AAS).

1. Preparazione chirurgia

  1. Fissare ogni array di elettrodi a un supporto per elettrodi compatibile con il telaio stereotassico da utilizzare.
  2. Collegare un supporto per elettrodi al micromanipolatore stereotassico e impostare un microfilo alle coordinate interaurali. Ripetere questa operazione per gli array e i supporti di elettrodi aggiuntivi, se necessario.
    NOTA: La coordinata interaurale....

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Risultati

Lo scopo di questo studio era quello di descrivere una procedura neurochirurgica stereotassica per l'impianto di array di microelettrodi per registrazioni elettrofisiologiche nel marmoset comune. Un intervento chirurgico tipico (dall'induzione dell'anestesia al recupero dell'anestesia) durerà circa 5-7 h, a seconda del numero di array impiantati. Qui, due array sono stati impiantati simmetricamente, uno in ogni emisfero cerebrale. Ogni matrice conteneva 32 microfili in acciaio inossidabile disposti in sette fasci mirati .......

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Discussione

Questo lavoro fornisce una descrizione dettagliata delle procedure coinvolte nell'impianto di array di registrazione di microelettrodi nel cervello marmoset. Questo stesso protocollo può essere facilmente utilizzato quando si impiantano elettrodi, sia fatti in casa che disponibili in commercio, in altri piccoli primati. Inoltre, può essere facilmente adattato per altre estremità sperimentali che richiedono un targeting preciso delle strutture cerebrali. Pertanto, questo protocollo è volutamente vago per quanto riguarda l.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori desiderano ringraziare Bernardo Luiz per l'assistenza tecnica con le riprese e il montaggio. Questo lavoro è stato sostenuto dall'Istituto Santos Dumont (ISD), dal Ministero dell'Istruzione brasiliano (MEC) e dal Superiore di Coordenao de Aperfei-oamento de Pessoal de Novel (CAPES).

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Equipments
683 Ventilatore per piccoli animaliHarvard Apparatus, Inc.55-0000
Gruppo per anestesiaBRASMEDCOLIBRI
Forbici da barbiereMundialHC-SERIES
Trapano dentaleNorgenB07-201-M1KG
Termoforo omeotermico e monitorHarvard Apparatus, Inc.50-7212
Telaio stereotassico dell'uistitìNarishige Scientific Instrument LabSR-6C-HT
Monitor paziente e pulsossimetroBionet Co., LtdBM3
Micromanipolatore stereotassicoNarishige Scientific Instrument LabSM-15R
Microscopio chirurgicoOptoSM PLUS IBZ
Instruments
Allis pinze per tessutiSklar36-2275
Divaricatore Alm, punta arrotondata, 4x4 dentiRhosseRH11078
Angled McPherson ForcepsOftalmologiabr11301A
Forbici chirurgiche curveHarvard Apparatus, Inc.72-8422
Pinza per tessuti curviSklar47-1186
Pinza per dissezione delicataWPIWP5015
Punta da trapano dentaleMicrodontISO.806.314.001.524.010
Pinza per tessuti EssringSklar19-2460
FG 1/4 Punta da trapano dentaleMicrodontISO.700.314.001.006.005
Halsey Needle Holder WPI15926-G
Halstead Mosquito PinzeWPI503724-12
Pinze emostatiche, StraightSklar17-1260
Jewler ForcepsSklar66-7436
McPherson-Vannas Microforbice optatalmica, punta da 3 mmArgos InstrumentalARGOS-4004
Pereosteal RaspatoryGolgran38-1
Scalpal HandleHarvard Apparatus, Inc.72-8354
CacciavitiEurotoolSCR-830.00
Ferro da stiroHikari21K006
Forbice chirurgicaHarvard Apparatus, Inc.72-8400
Pinze dentateWPI501266-G
Monouso
Siringa sterile da 1 ml con ago da 26 GDescarpack7898283812785
campo chirurgico 130 cm x 140 cm, presterilizzatoProtDesc7898467276344
Ago 24G, Descarpack presterilizzato7898283812846
campo chirurgico 50 cm x 50 cm, sonde con110100236Esterili-med
presterilizzate,Jiangsu Suyun Medical Materials Co. LTD23007
Qutips con punta in cotoneHigie Topp7898095296063
Electrode Arrayfatto in casa
Tubo endotracheale senza cuffia, diametro interno 2,0 mm, diametro esterno 2,9 mmSolidor7898913077201
Filo di rame stagnato, diametro
M1,4x3 Viti in acciaio inoxUSMICROSCREWM14-30M-SS-P
Nastro medicoMissner7896544910102
Suture chirurgiche in nylonShalonN540CTI25
Lama per scalpo, presterilizzataAdvantiVe1037
solderKesterSN63PB37
soluzione fisiologica sterile 0,9%Isofarma7898361700041
Guanti chirurgici steriliMaxitex7898949349051
Camice chirurgico sterileProtDesc7898467281208
Garza chirurgica, 15 cm x 26 cm presterilizzatoHé ika7898488470315
GelfoamPfizer
Drugs/Chemicals
0.25mg/ml AtropinaIsofarma
10% Lidocaina SprayProdutos Quí micos Farmacê uticos Ltda.
2,5% Enrofloxacino antibiotico veterinarioChemitec0137-02
Dexametasona veterinario antinfiammatorioMSDR06177091A-00-15
Perossido di idrogenoFarmax7896902211537
IsoflouraneBioChimico7897406113068
Jet Soluzionedi polimerizzazione acrilicaArtigos Odontoló gicos Clá ssico
Jet Auto Polimerizzazione AcrilicoArtigos Odontoló gicos Clá ssico
Ketamina 10%Syntec
Lidocaina e Fenilefrina 1,8 ml anestetico localeSS Bianco7892525041049
Soluzione di iodio povidoneFarmax7896902234093
Riohex 2% sapone chirurgicoRioquí mica7897780209418
Silver PaintSPI Supplies05002-AB
Cloruro di tramadolo 50 mg/mlUniã o Quí mica7896006245452
Gel rinfrescante (acido poliacrilico)Allergan
punta in cotone 0,15 mm7896676405644

Riferimenti

  1. Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Seminars in Fetal and Neonatal Medicine. 17 (6), 336-340 (2012).
  2. Harris, R. A., et al.

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Ristampe e permessi

Tag

Impianto di microelectrode arrayregistrazione elettrofisiologicacostruzione del cappuccio cranicoprocedura di craniotomiarimozione della dura madreapplicazione di acrilico dentalecure postoperatorie