Preparazione dei complessi di modelli di pinze SNS di Disidrogeno del Fegato

Sommario

Qui viene presentata la preparazione di complessi modello di pinta SNS cobalto(II) di dehydrogenasi di alcool epatico. I complessi possono essere preparati reagendo il precursore del ligando con CoCl₂n. 6H₂O e possono quindi essere riconfondibili permettendo all'etere etilico di diffondersi lentamente in una soluzione acetonitrile che contiene il complesso cobalto.

Abstract

I complessi di modelli chimici sono pronti a rappresentare il sito attivo di un enzima. In questo protocollo, una famiglia di precursori del ligando tridentato (ciascuno in possesso di due sforamenti e un atomo di atomo di atomi (SNS) e basati su composti bis-imidazole o bis-triazole) sono metallati con CoCl₂-6H₂O per permettersi complessi tridentati SNS pinceralt cobalto(II). La preparazione dei complessi modello di cobalto (II) per la diciamigenasi da alcol epatica è facile. Sulla base di un rapido cambiamento di colore dopo l'aggiunta della soluzione CoCl₂-6H₂a acetonitrile che contiene il precursore del ligando, il complesso si forma rapidamente. La formazione del complesso metallico è completa dopo aver permesso alla soluzione di riafflusso durante la notte. Questi complessi di cobalto (II) servono come modelli per il sito attivo di zinco nella dehydrogenasi di alcool epatica (LADH). I complessi sono caratterizzati da diffrazione a raggi X a cristallo singolo, spettrometria di massa elettrospray, spettroscopia visibile ultra-viola e analisi elementare. Per determinare con precisione la struttura del complesso, è necessario determinare la sua struttura a cristalli singolo. I cristalli singoli dei complessi adatti alla diffrazione a raggi X vengono quindi coltivati tramite una diffusione lenta del vapore dell'etere dietilico in una soluzione acetonitrile che contiene il complesso di cobalto(II). Per i cristalli di alta qualità, la cristallizzazione avviene in genere su un periodo di 1 settimana o più a lungo. Il metodo può essere applicato alla preparazione di altri complessi di coordinamento dei modelli e può essere utilizzato nei laboratori didattici universitari. Infine, si ritiene che altri possano trovare questo metodo di cristallizzazione per ottenere singoli cristalli benefici per la loro ricerca.

Introduzione

Lo scopo del metodo presentato è quello di preparare analoghi di piccole molecole di LADH per comprendere ulteriormente l'attività catalitica dei metallonze. LADH è un enzima dimeric che contiene un dominio di legame co-factor e zinco (II) metallo contenente dominio catalitico¹. LADH, in presenza di co-fattore NADH, può ridurre chetoni e aldeidi ai rispettivi derivati dell'alcol². In presenza di NAD^,LADH può eseguire la catalisi inversa di ossidazione di alcoli a chetoni e aldeidi². La struttura cristallina del sito attivo di LADH mostra che il suo centro metallico di zinco (II) è legat....

Protocollo

1. Sintesi del cloro-(n³-S,S,N)-[2,6-bis(N-isopropyl-N'-methyleneimidazole-2-thione)pyridine(II)tetrachlorocobaltate [4]

1. Per preparare complesso 4, aggiungere 0,121 g (3.12 x 10^-4 mol) di 2,6-bis(N-isopropyl-N'-methyleneiidazole-2-thione)pyridine (C₁₉H₂₅N₅S₂)⁶ a 15 mL di acetonitrile in una flacone inferiore rotonda da 100 mL. Successivamente, a questa soluzione, aggiungere 0,0851 g (3,58 x 10^-4 mol) di cloruro di cobalto (II) esadorte (CoCl₂x 6H₂O). La soluzione di reazione dovrebbe cambiare colore dal giallo chiaro al ....

Risultati

Sintesi
Le sintesi dei complessi 4 e 5 sono state eseguite con successo reagendo una soluzione acetonitrile contenente un precursore del ligando bis-thione con esadiadio al cobalto (II) cloruro (Figura 2). Questa reazione si è verificata ad una temperatura di reflusso in presenza di aria. In generale, i complessi 4 e 5 sono stati osservati per essere solubili in acetonitrile, solfuro ditilo, dichlorometan.......

Discussione

La preparazione dei complessi 4 e 5 è facile. Il passo chiave è quello di aggiungere il CoCl solido₂- 6H₂O a una soluzione acetonitrile che contiene il rispettivo precursore del ligando. La soluzione diventa verde scuro in pochi secondi dopo l'aggiunta di CoCl₂- 6H₂O per formare complesso 4. La soluzione diventa blu brillante dopo l'aggiunta di CoCl₂- 6H₂O per formare complesso 5. Per gara.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Pallone a fondo tondo da 100 ml	vetro chimico	CG150691	pallone a fondo tondo a collo singolo da 100 ml, 19/22 giunto esterno
Acetonitrile	Fisher	HB9823-4	di grado HPLC
per roto-vap	Lauda	L000638	Alpha RA 8
Cloruro di cobalto esaidrato	Acros Organics	AC423571000	Acros Organics
Etere	dietilicoFisher	E-138-1	di etiletere anidoro
	Fisher	S63456	a cilindro graduato da 25 mL
	Fisher	11-100-49SH	Isotemp Basic Stirring Piastra riscaldante
Barattoli	Fisher	05-719-481	Barattoli da 250 mL
Ligand	-----	-----	Sintetizzato in precedenza dal professor Miecznikowski
medium batuffoli di cotone	Fisher	22-456-80	batuffoli di cotone medi
fiale da un dram	Fisher	03-339	fiale da un dram con pipetta TFE Lined Cap
	Fisher	13-678-20B	pipette da 5,75 pollici
pipette bulbi Fisher		03-448-21	Fisher Brand Latex Bulb per
pipetta piatto di ricristallizzazione per bagno di sabbia	Fisher	08-741 D	325 mL piatto ricristallizzante per bagno di sabbia
condensatore a riflusso	Chem Glass	CG-1218-A-22	Condensatore con giunto interno 19/22
Rotovap	Heidolph Collegiate	36000090	Brinkmann; Heidolph Evaporatore rotante collegiato con bagno ecologico Heidolph WB Evaporatore rotante Heidolph
di mare per bagno di sabbia	Acros Organics	612355000	sabbia di mare lavata per bagno di sabbia
Agitatore	Fisher	07-910-23	Agitatore magnetico a forma di uovo
Grasso sottovuoto	Fisher	14-635-5D	Dow Corning Pompa per vuoto per grasso ad alto vuoto
per rotovap	Heidolph Collegiate	36302830	Controllo della valvola Rotovac Heidolph

in Refrigeratore Cilindro graduato Piastra riscaldante sabbia