Questo articolo descrive un metodo per misurare la riattività della vascolatura retinica in vivo con soggetti umani utilizzando una tecnica di provocazione respiratoria di gas per fornire stimoli attivi durante l'acquisizione di immagini vasoliche.
Articolo metodologico
Questo articolo descrive un metodo per misurare la riattività della vascolatura retinica in vivo con soggetti umani utilizzando una tecnica di provocazione respiratoria di gas per fornire stimoli attivi durante l'acquisizione di immagini vasoliche.
L'apporto vascolare alla retina ha dimostrato di adattarsi dinamicamente attraverso vasoconstriction e vasodilation per soddisfare le esigenze metaboliche della retina. Questo processo, chiamato reattività vascolare retinica (RVR), è mediato dall'accoppiamento neurovascolare, che è compromesso molto presto nelle malattie vascolari della retina come la retinopatia diabetica. Pertanto, un metodo clinicamente fattibile per valutare la funzione vascolare può essere di notevole interesse sia nella ricerca che negli ambienti clinici. Recentemente, l'imaging in vivo della vascolatura retinica a livello capillare è stato reso possibile dall'approvazione FDA dell'angiografia della tomografia a coerenza ottica (OCTA), un metodo di angiografia non invasivo, minimo e senza tintura con risoluzione del livello capillare. Allo stesso tempo, i cambiamenti fisiologici e patologici nella RVR sono stati mostrati da diversi ricercatori. Il metodo mostrato in questo manoscritto è progettato per studiare rVR utilizzando OCTA senza bisogno di alterazioni delle procedure di imaging clinico o del dispositivo. Dimostra l'imaging in tempo reale della vascolatura della retina e della retina durante l'esposizione a condizioni ipercapniche o iperossiche. L'esame viene eseguito facilmente con due persone in meno di 30 min con minimo disagio o rischio di soggetto. Questo metodo è adattabile ad altri dispositivi di imaging oftalmico e le applicazioni possono variare in base alla composizione della miscela di gas e alla popolazione del paziente. Un punto di forza di questo metodo è che permette uno studio della funzione vascolare retinica a livello capillare in soggetti umani in vivo. Le limitazioni di questo metodo sono in gran parte quelle di OCTA e di altri metodi di imaging della retina, inclusi artefatti di imaging e una gamma dinamica limitata. I risultati ottenuti dal metodo sono immagini OCT e OCTA della retina. Queste immagini sono suscettibili a qualsiasi analisi possibile nei dispositivi OCT o OCTA disponibili in commercio. Il metodo generale, tuttavia, può essere adattato a qualsiasi forma di imaging oftalmico.
La domanda metabolica della retina dipende da un adeguato e costante apporto di ossigeno fornito da un sistema ben regolato di arterioli, capillari e venule1. Diversi studi hanno dimostrato che la funzione dei vasi retinicoli umani di calibro maggiore può essere valutata in vivo con vari stimoli fisiologici2,3,4,5 e farmacologici6,7 stimoli. Inoltre, la funzione anomala di questo sistema vascolare è comune nelle malattie vascolari retiniche come la retinopatia....
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Questo studio è stato approvato dalla University of Southern California Institutional Review Board e ha aderito ai principi della Dichiarazione di Helsinki.
1. Impostazione di Gas Non-rebreathing Apparatus

Figura 1: Diagramma dell'apparato non reputato. L'impostazione completa è stata suddivisa in tre unità separate in base alla loro funzione e alla frequenza con cui vengono trattate in modo indipendente. Questi includono: l'unità di controllo del....
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L'output di questo esperimento è costituito dalle letture manuali tratte dall'ossimetro dell'impulso, dalla tempistica nota per l'esposizione al gas o dalla scansione OCTA e dai dati grezzi di imaging OCTA. Un'immagine OCTA è costituita dalle scansioni B dello Strumento di personalizzazione di Office e dal segnale di decorrelazione associato a ogni B-scan. I parametri dei dati sono forniti dalle specifiche del dispositivo. È stata utilizzata una piattaforma laser OCTA con una lunghezza d'onda centrale di 1040-1060 nm. Le.......
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La metodologia appena descritta è il protocollo completo per un esperimento di provocazione della respirazione gassosa che consente la misurazione dell'RVR di un soggetto in un ambiente controllato in momenti specifici senza modifiche al dispositivo di imaging OCTA e minimo disagio o rischio per il soggetto. Questa configurazione è descritta in modo che consente facili modifiche per soddisfare le esigenze del ricercatore. Può ospitare tubi aggiuntivi per adattarsi a diverse stanze cliniche e alcuni elementi come il tubo .......
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Carl Meditec ha fornito sovvenzioni, attrezzature e sostegno finanziario ad AHK in relazione all'argomento di questo articolo.
Questo lavoro è stato supportato da NIH K08EY027006, R01EY030564, UH3NS100614, borse di ricerca da Carl eiss Meditec Inc (Dublino, CA) e Unrestricted Department Funding from Research to Prevent Blindness (New York, NY).
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 5% CO2 gas [5% CO2, 21% O2, 74% N2] (Compresso) | Dipendente dall'istituto (Praxair) | ||
| Detergente disinfettante Bacdown | Decon Labs | 8001 | https://deconlabs.com/products/disinfectant-bdd/ |
| Clean-Bor Tubes (diametro interno 35 mm) | Vacumed | 1011-108 | http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&skuid=1197 |
| Adattatore per bracciale per riempimento sacca Douglas | Vacumed | 22254 | http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&prodid=343 |
| Sacca Douglas (capacità 200 L) | Harvard Apparatus | 500942 | https://www.harvardapparatus.com/douglas-bag.html |
| Giunto a gomito (diametro interno 19 mm/diametro esterno 22 mm), | |||
| (serie Pro) | CMS | CMS 500DL | https://www.walmart.com/ip/Pro-Series-CMS-500DL-Fingertip-Pulse-Oximeter-Blood-Oxygen-Saturation-Monitor-with-silicon-cover-batteries-and-lanyard/479049154 |
| diametro interno 22 mm) | |||
| (1/8" per gas compresso) | |||
| Salviette disinfettanti per detergente al perossido di idrogeno | Clorox Healthcare | 30824 | https://www.cloroxpro.com/products/clorox-healthcare/hydrogen-peroxide-cleaner-disinfectants/?gclid=EAIaIQobChMIk-KG4vi15QIVcRh9Ch0NNwLPEAAYASAAEgJIa_D_BwE&gclsrc=aw.ds |
| Gocce oculari lubrificanti | Refresh Refresh | Plus | https://www.refreshbrand.com/Products/refresh-plus |
| Valvole di controllo direzionale manuali: Rubinetto a forma di T a tre vie (diametro interno 28,6 mm, diametro esterno 35 mm) | Hans Rudolph | serie 2100C | www.rudolphkc.com |
| medicale O2 (compresso) | dipendente dall'istituto | ||
| (silicone, modello #9061) | OCTA Hans Rudolph | 602076 | www.rudolphkc.com |
| (PLEX Elite 9000) | Carl Zeiss Meditec, Dublino, CA, USA | https://www.zeiss.com/meditec/int/product-portfolio/optical-coherence-tomography-devices/plex-elite-9000-swept-source-oct.html | |
| Soluzione oftalmica di fenilefrina cloridrato, USP 2,5% | Paragon Bioteck, Inc | NDC 42702-102-15 | https://paragonbioteck.com/products/diagnostics/phenylephrine-hydrochloride-ophthalmic-solution-usp-2-5/ |
| Clip nasale in plastica sterile Schiuma CS100 | Sklar sterile | 96-2951 | https://www.sklarcorp.com/disposables/plastic/plastic-nose-clip-sterile-foam-box-of-100.html |
| proparacaina cloridrato soluzione oftalmica, USP .5% | Bausch + Lomb | NDC 24208-730-06 | https://www.bausch.com/ecp/our-products/rx-pharmaceuticals/generics |
| Regolatore (dipendente dal serbatoio - 5% CO2: Regolatori per bombole di gas multistadio Fisherbrand) | Genstar Technologies Company | 10575150 | https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575150?keyword=true |
| Regulator (dipendente dal serbatoio - Ossigeno: Regolatori multistadio per bombole di gas Fisherbrand) | Genstar Technologies Company | 10575145 | https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575145?keyword=true |
| Tubo in gomma (diametro interno 19 mm, diametro esterno 27 mm), Made in House | |||
| Nastro sigillante - Parafilm Wrap (2" di larghezza) | Cole Parmer | PM992 | https://www.coleparmer.com/i/parafilm-pm992-wrap-2-wide-250-ft-roll/0672050?PubID=VV&persist=True&ip=no&gclid=EAIaIQobChMInY3vqomz5QIVfyCtBh1VSg64EAAYASAAEgJ9n_D_BwE |
| Tamponi sterili per la preparazione dell'alcol | Medline | MDS090670 | https://www.medline.com/product/Sterile-Alcohol-Prep-Pads/Swab-Pads/Z05-PF03816 |
| Soluzione oftalmica Tropicamide, USP 1% | Akorn | NDC 17478-102-12 | http://www.akorn.com/prod_detail.php?ndc=17478-102-12 |
| Adattatore per tubi, Made in House | |||
| Valvola a due vie non respiratoria (serie 2600- diametro interno 28,6 mm, diametro esterno 35 mm) | Hans Rudolph | serie 2600, UM-112078 | www.rudolphkc.com |
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