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Articolo metodologico

Evitare il danno da ischemia e riperfusione nel trapianto di fegato

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DOI:

10.3791/61485

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3 dicembre 2020

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* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Di seguito viene presentato un protocollo per fornire un protocollo di trapianto di fegato senza ischemia passo dopo passo in perfusione meccanica normotermica ex situ (37 °C) di fegati umani da donatori a riceventi.

Abstract

Attualmente, la perfusione meccanica ex situ è una tecnica fiorente che fornisce un metodo di conservazione migliore per gli organi dei donatori rispetto alla tradizionale conservazione statica a freddo (0-4 °C). L'afflusso continuo di sangue agli organi mediante perfusione meccanica, dall'approvvigionamento e dalla conservazione fino all'impianto, facilita la prevenzione completa del danno da ischemia e riperfusione e consente la valutazione funzionale ex situ dei fegati dei donatori prima del trapianto. In questo manoscritto, forniamo un protocollo di trapianto di fegato senza ischemia passo dopo passo in cui un apparato di perfusione meccanica normotermico ex situ viene utilizzato per la perfusione pulsatile attraverso l'arteria epatica e la perfusione continua della vena porta dai fegati dei donatori umani ai riceventi. Nel periodo di perfusione, viene condotta un'analisi biochimica del perfusato per valutare l'attività metabolica del fegato e viene eseguita anche una biopsia epatica per valutare il grado di lesione. Il trapianto di fegato libero da ischemia è un metodo promettente per evitare il danno da ischemia-riperfusione e può potenzialmente aumentare il pool di donatori per il trapianto.

Introduzione

Il danno da ischemia e riperfusione (IRI) è una complicanza ben nota e diffusa nel trapianto di organi. Eventi non immunologici evidenti portano a scarsi esiti del trapianto e a una funzione ritardata del trapianto, che sono correlati alle alte percentuali di insufficienza d'organo, retrapianto e morte del ricevente1. La conservazione a freddo convenzionale (CCS) degli organi è stata precedentemente identificata come un metodo classico per rallentare il metabolismo, ma non ha un'influenza sulla prevenzione della disfunzione progressiva e del danno all'integrità cellulare. Inoltre, l'accumulo di leucociti è indo....

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Protocollo

Questo protocollo è stato esaminato e approvato dal comitato etico del Primo Ospedale Affiliato dell'Università Sun Yat-sen, Guangzhou, Cina. Il consenso informato è stato ottenuto da tutti i partecipanti. Tutte le procedure negli studi che hanno coinvolto partecipanti umani sono state eseguite in conformità con la Dichiarazione di Helsinki del 1964 e le sue successive modifiche o revisioni.

1. Preparazione della soluzione di perfusione e del dispositivo

NOTA: Il volume totale della soluzione di perfusione preparata per NMP secondo questo protocollo è di circa 3.000 mL, come riport....

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Risultati

Nell'aprile 2018, un donatore maschio di 66 anni con morte cerebrale non è stato preso in considerazione dai centri di trapianto locali a causa dell'alto rischio di perdita del trapianto in tali donatori. Le ragioni per l'eliminazione del fegato, al momento del prelievo, erano l'età avanzata e l'aspetto macroscopico di consistenza moderata, bordi rotondi del fegato e perfusione non ottimale del trapianto epatico insieme a principali comorbidità del donatore, che includevano ipertensione, cardiopatia ipertensiva e i segue.......

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Discussione

Questa tecnica IFLT è stata stabilita per evitare completamente l'IRI. Questo articolo fornisce un protocollo IFLT passo dopo passo, dal prelievo degli organi, alla conservazione ex situ fino all'impianto.

Basato su NMP, IFLT fornisce una fornitura ininterrotta di sangue e ossigeno agli innesti dall'approvvigionamento e dalla perseveranza all'impianto. Numerosi studi hanno dimostrato che l'NMP presenta vantaggi significativi nella riduzione dell'IRI, nel migli.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno interessi concorrenti da dichiarare.

Ringraziamenti

Questo studio è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (81401324 e 81770410), dalla Base di Cooperazione Internazionale della Provincia del Guangdong per la Scienza e la Tecnologia (Trapianto di Organi) (2015B050501002), dai Fondi Provinciali per le Scienze Naturali del Guangdong per Illustri Giovani Studiosi (2015A030306025), dal Programma di Supporto Speciale per la Formazione di Talenti di Alto Livello nella Provincia del Guangdong (2015TQ01R168), dal Programma Pearl River Nova di Guangzhou (201506010014) e dal Programma Scientifico per i Giovani Insegnanti dell'Università Sun Yat-sen (16ykpy05), Cina.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
10% gluconato di calcioHebei Tiancheng Pharmaceutical Co, Ltd1S18112410130 mL
25% solfato di magnesioHebei Tiancheng Pharmaceutical Co, LtdH200338613 mL
5% bicarbonato di sodioHuiyinbi Group Jiangxi Dongya Pharmaceutical Co, LtdH36020283La quantità dipende dal pH
Cefoperazone sodico e sulbactam sodicoPfizerH200205971,5 g
di Composto Iniezione di AminoacidiGuangdong Litai Pharmaceutical Co., LtdH20063797250 ml di
globuli rossi lavati con leucociti impoveriti incrociatiGuangzhou Blood Center H200337391300 ml di
eparinaChengdu Hepatunn Pharmaceutical Co., LtdH5102120937500
U Liver AssistOrgan Assist OA. Li.Li.140Dispositivo di perfusione
Liver Assist confezione monousoOrgan AssistOA. Li.DP.540Set monouso e cannule
MetronidazoleShanghai Baxter Healthcare Co., Ltd.H200033010,5 g
di agopuntura del cuoio capellutoWuhan W.E.O.Science & Sviluppo tecnologico Co., LtdWEO-JX-32B-5.0Cannula del dotto biliare
Gelatina succinilataB. Braun Medical Suzhou Co., LtdH201131191400 ml
0.7*25mm

Riferimenti

  1. Hanidziar, D., Koulmanda, M. Towards cytoprotection in the peritransplant period. Seminars in Immunology. 23 (3), 209-213 (2011).
  2. Eltzschig, H. K., Eckle, T. Ischemia and reperfusion-from mechanism to translation. Nature Medicine. 17 (11), 1391-1401 (2011).
  3. Ra....

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