Articolo metodologico

Elettrocardiogramma Registrazioni in Topi anestesizzati utilizzando Lead II

DOI:

10.3791/61583

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20 giugno 2020

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1Department of Biochemistry and Molecular Biology, School of Medicine, Kyung Hee University

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

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Vi presentiamo un protocollo ECG tecnicamente facile, economico, veloce e conveniente in piccoli topi e che può essere eseguito con una maggiore sensibilità. Suggeriamo questo metodo come approccio di screening per studiare gli agenti farmacologici, le modifiche genetiche e i modelli di malattia nei topi.

Abstract

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L'elettrocardiogramma è uno strumento prezioso per valutare il sistema di conduzione cardiaca. La ricerca sugli animali ha contribuito a generare nuove informazioni genetiche e farmacologiche riguardanti l'elettrocardiogramma. Tuttavia, effettuare misurazioni dell'elettrocardiogramma in piccoli animali in vivo, come i topi, è stato impegnativo. A tal fine, abbiamo usato un metodo di registrazione dell'elettrocardiogramma in topi anestesi con molti vantaggi: è una procedura tecnicamente semplice, è poco costosa, ha poco tempo di misurazione ed è conveniente, anche nei giovani topi. Nonostante le limitazioni con l'utilizzo dell'anestesia, i confronti tra il controllo e i gruppi sperimentali possono essere eseguiti con una maggiore sensibilità. Abbiamo trattato topi con agonisti e antagonisti del sistema nervoso autonomo per determinare la validità di questo protocollo e confrontato i nostri risultati con i rapporti precedenti. Il nostro protocollo ECG ha rilevato un aumento della frequenza cardiaca e degli intervalli QTc sul trattamento con atropina, diminuzione della frequenza cardiaca e intervalli QTc dopo il trattamento con carbacholo, e frequenze cardiache e intervalli QTc più elevati con isoprena, ma non ha notato alcuna modifica nei parametri ECG sulla somministrazione del propranolololo. Questi risultati sono supportati da relazioni precedenti, che confermano l'affidabilità di questo protocollo ECG. Pertanto, questo metodo può essere utilizzato come approccio di screening per effettuare misurazioni ECG che altrimenti non sarebbero tentate a causa di costi elevati e difficoltà tecniche.

Introduzione

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L'elettrocardiogramma (ECG), un test che misura l'attività elettrica del battito cardiaco, è uno strumento prezioso per valutare il sistema di conduzione cardiaca. I parametri misurati da un ECG includono la frequenza cardiaca, l'intervallo PR, la durata QRS e l'intervallo QT. In breve, l'intervallo PR corrisponde al tempo necessario affinché un impulso elettrico viaggi dal nodo del seno atriale attraverso il nodo atrioventricolare fino alle fibre Purkinje; La durata QRS è il tempo per la depolarizzazione ventricolare che si verifica attraverso il sistema Purkinje e il miocardio ventricolare; e l'intervallo QT è la durata della ripolarizzazione ventricolare.

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Protocollo

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Tutte le procedure sugli animali sono state approvate dal comitato locale per la cura e l'uso degli animali da laboratorio, Kyung Hee University (numero di licenza: KHUASP(SE)-18-108) e conformi alla Guida degli Istituti nazionali di salute degli Stati Uniti per la cura e l'uso degli animali da laboratorio.

1. Animali sperimentali

  1. Tenere tutti i topi (39 topi, Balb/c, maschi, 7-u20129 settimane) in una struttura priva di agenti patogeni, come da guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio.
  2. Mantenere i topi su un ciclo di 12 h luce / buio a temperatura costante con accesso gratuito al cibo e all'acqua.
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Risultati

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Esperimenti farmacologici

Per determinare se la nostra misurazione ECG non invasiva riflette l'influenza della modulazione autonomica sul sistema di conduzione cardiaca, i normali topi Balb/c sono stati sfidati con agonisti e antagonisti del sistema nervoso autonomo (ANS). L'atropina e il carbacholo sono stati utilizzati rispettivamente per il blocco e la stimolazione autonomici parasimpatici, mentre il propranololo e l'isoprenal sono stati somministrati per provocare il blocc.......

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Discussione

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Il protocollo prevede diversi passaggi critici. L'ambiente circostante dovrebbe essere libero da rumore e vibrazioni. Gli elettrodi ECG devono essere inseriti sotto la pelle in modo stabile e coerente di cui il passo di inserimento richiede esperimenti preliminari fino a quando il ricercatore è tecnicamente esperto. Inoltre, l'anestetico deve essere preparato e conservato in modo appropriato e utilizzato alla dose appropriata. Infine, le onde PQRS dovrebbero essere posizionate in modo appropriato nelle singole battute EC.......

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Dichiarazioni

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Gli autori non dichiarano conflitti di interesse, finanziari o di altro tipo.

Ringraziamenti

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Questo lavoro è stato sostenuto dai programmi di ricerca scientifica di base gestiti dalla National Research Foundation of Korea (NRF) (2015R1C1A2A01052419 e 2018R1D1A1B07042484).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
2,2,2-tribromoetanoloSigma-AldrichT48402-25Ganestetici, Avertin
AnimalJapan SLC, Inc., Shizuoka, GiapponeTopi Balb/c, maschi, di età compresa tra 7 e 9 settimane
AtropinaSigma-AldrichA0123antagonista parasimpatico
BioAmpAD Instruments, Bella Vista, AustraliaML132bioamplificatore
CarbacholSigma-AldrichC4382agonista parasimpatico
Elettrodi con aghi per agopunturaDongBang Acupuncture Inc., Sungnam, CoreaDB1060,20 x 15 mm
IsoprenalinaSigma-AldrichI2760agonista simpatico
LabChart 8AD Instruments, Bella Vista, Australiasoftware di analisi dei dati
Mouse foodLabDiet, St. Louis, MO, USA5L79Dieta del topo
PowerLab 2/28AD Instruments, Bella Vista, Australiasistema di acquisizione dati
PropranololoSigma-AldrichP0884antagonista simpatico
SPSS Programma statistico SPSSstatisticoSPSS25.0
Programma

Riferimenti

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ho, D., et al. Heart rate and electrocardiography monitoring in mice. Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).
  2. Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. Cardiovascular physiol....

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Registrazione dell elettrocardiogrammaECG a derivazione IIacquisizione dei dati ECGanalisi dell ECG del toposistema nervoso autonomotrattamento con atropinatrattamento con carbacholotrattamento con isoprenalineposizionamento degli elettrodi ECG

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