Questo documento introduce un metodo di schiusa senza utilizzare un guscio d'uovo per studi tossicologici su inquinanti particellari come le microplastiche.
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Articolo metodologico
Effetti ecotossicologici delle microplastiche sullo sviluppo di embrioni di uccelli mediante schiusa senza guscio d'uovo
In questo articolo
Sommario
Abstract
Le microplastiche sono un tipo di inquinante globale emergente che rappresenta una grande minaccia per la salute degli animali a causa del loro assorbimento e traslocazione nei tessuti e negli organi animali. Gli effetti ecotossicologici delle microplastiche sullo sviluppo di embrioni di uccelli non sono noti. L'uovo di uccello è un sistema completo di sviluppo e nutrizione e l'intero sviluppo dell'embrione avviene nel guscio d'uovo. Pertanto, una registrazione diretta dello sviluppo di embrioni di uccelli sotto lo stress di inquinanti come le microplastiche è altamente limitata dal guscio d'uovo opaco nella schiusa tradizionale. In questo studio, gli effetti delle microplastiche sullo sviluppo di embrioni di quaglia sono stati monitorati visivamente dalla schiusa senza guscio d'uovo. I passaggi principali includono la pulizia e la disinfezione delle uova fecondate, l'incubazione prima dell'esposizione, l'incubazione a breve termine dopo l'esposizione e l'estrazione del campione. I risultati mostrano che, rispetto al gruppo di controllo, il peso umido e la lunghezza corporea del gruppo esposto alle microplastiche hanno mostrato una differenza statistica e la proporzione epatica dell'intero gruppo esposto è aumentata in modo significativo. Inoltre, abbiamo valutato fattori esterni che influenzano l'incubazione: temperatura, umidità, angolo di rotazione delle uova e altre condizioni. Questo metodo sperimentale fornisce preziose informazioni sull'ecotossicologia delle microplastiche e un nuovo modo di studiare gli effetti negativi degli inquinanti sullo sviluppo degli embrioni.
Introduzione
La produzione di rifiuti di plastica è stata di circa 6300 Mt nel 2015, un decimo dei quali è stato riciclato e il resto è stato bruciato o sepolto sottoterra. Si stima che circa 12.000 mt di rifiuti di plastica sarebbero sepolti sottoterra entro il 20501. Con l'attenzione della comunità internazionale ai rifiuti plastici, Thompson ha proposto per la prima volta il concetto di microplastiche nel 20042. Le microplastiche (MPs) si riferiscono a piccole plastiche a particelle con un diametro delle particelle inferiore a 5 mm. Attualmente, i ricercatori hanno rilevato l'onnipresente presenza di parlamentari nelle coste di va....
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Protocollo
1. Preparazione prima dell'esposizione
- Selezionare le uova di quaglia fecondate nate lo stesso giorno per il test di esposizione.
- Selezionare le uova di quaglia con pesi simili. Ogni uovo di quaglia fecondato è di circa 10-12 g.
- Pulire completamente tutte le uova di quaglia fecondate dalle feci esterne e da altri detriti.
- Sterilizzare ogni uovo di quaglia fecondato pre-covato e le uova da utilizzare (scegliere le uova con forma simile del guscio, in particolare la punta dell'uovo) con una soluzione antibiotica (penicillina e streptomicina, 1:1000, temperatura ambiente). Sterilizzare l'incubatore con il 75% di etanolo.
- ....
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Risultati
Per l'analisi dei dati sperimentali, abbiamo confrontato il peso umido, la lunghezza del corpo, la lunghezza dello sterno e il cambiamento dell'indice epatosomatico tra il gruppo di controllo e i 6 gruppi sperimentali, misurando e riflettendo la crescita e lo sviluppo degli embrioni di quaglia da una prospettiva macro. Abbiamo rilevato sei embrioni di quaglia normali in ogni gruppo. Ogni embrione ha raggiunto lo stadio richiesto di Hamburger e Hamilton (HH).
Nella figura 1.......
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Discussione
Questo documento fornisce un efficace schema sperimentale per valutare lo sviluppo dell'embrione di quaglia rilevando gli indici di sviluppo di base. Tuttavia, ci sono ancora alcune limitazioni a questo esperimento.
In primo luogo, la mortalità degli embrioni di quaglia nella fase successiva della schiusa è più alta a causa della schiusa senza guscio. Ci sono fattori artificialmente incontrollabili come la distruzione del normale rapporto proteico nel processo sperimentale. Abbiamo limitato i.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare. Tutti gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti noti o relazioni personali che avrebbero potuto influenzare il lavoro di questo documento.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato da progetti chiave di ricerca e sviluppo nella regione autonoma uigura dello Xinjiang (2017B03014, 2017B03014-1, 2017B03014-2, 2017B03014-3).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Macinatore di tessuti multicampione | Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd. | Tissuelyser-24 | Macina le plastiche di grandi dimensioni in quelle di piccole dimensioni a bassa temperatura |
| Bilancia elettronica | OHAUS corporation | PR Series Precisione | Utilizzato per pesare |
| le uova di quaglia fecondate | Guangzhou Cangmu Agricultural Development Co., Ltd. | Uova di quaglia per la cova senza guscio | |
| Particelle fluorescenti di polipropilene | Foshan Juliang Optical Material Co., Ltd. | Tipi di plastica selezionati per l'esperimento | |
| Incubator | Shandong, Bangda Incubation Equipment Co., Ltd. | 264 pc | Fornire un luogo per la crescita e lo sviluppo dell'embrione |
| Microsfere di polistirene su scala nanometrica | Xi' Fornitore verificato - Ruixi Biological Technology Co., Ltd. | 100 nm, 200 nm, 500 nm | Tipi di materie plastiche selezionate per l'esperimento |
| Righello in acciaio | Deli Group | 20 cm | Utilizzato per misurare la lunghezza |
| Sterilizzatore a vapore a pressione di riscaldamento verticale | Shanghai Shenan Medical Instrument Factory | LDZM-80KCS-II | Sterilizzare gli articoli sperimentali |
Riferimenti
- Geyer, R., Jambeck, J. R., Law, K. L. Production, use, and fate of all plastics ever made. Science Advances. 3 (7), 5(2017).
- Thompson, R. C., et al. Lost at sea: Where is all the plastic. Science. 304 (5672), 838-838 (2004).
- Barletta, M., Lima, A. R. A., Costa, M. F.
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Ristampe e permessi
