Variazioni incrementali di temperatura per l'allevamento massimo e la deposizione delle uova in Astyanax mexicanus

Summary

Questo articolo delinea le condizioni di laboratorio di base e i protocolli per un regime di temperatura incrementale per stimolare la deposizione massima nel tetra Astyanax mexicanus messicano, che è un modello emergente per gli studi di sviluppo ed evolutivi.

Abstract

Il tetra messicano Astyanax mexicanusè un sistema di modelli emergenti per studi sullo sviluppo e l'evoluzione. L'esistenza di superfici oculari (pesci di superficie) e di mormorii di caverne cieche (pesci delle caverne) in questa specie offre l'opportunità di interrogare i meccanismi alla base dell'evoluzione morfologica e comportamentale. I pesci delle caverne hanno sviluppato nuovi tratti costruttivi e regressivi. I cambiamenti costruttivi includono aumenti delle papille gustative e delle mascelle, organi sensoriali della linea laterale e grasso corporeo. I cambiamenti regressivi includono perdita o riduzione degli occhi. pigmentazione della melanina, comportamento scolastico, aggressività e sonno. Per interrogare sperimentalmente questi cambiamenti, è fondamentale ottenere un gran numero di embrioni generati. Da quando i pesci di superficie e i pesci delle caverne originali di A. mexicanus sono stati raccolti in Texas e Messico negli anni '90, i loro discendenti sono stati regolarmente stimolati a riprodursi e generare un gran numero di embrioni bimestà nel laboratorio di Jeffery. Sebbene l'allevamento sia controllato dall'abbondanza e dalla qualità degli alimenti, dai cicli luce-oscurità e dalla temperatura, abbiamo scoperto che i cambiamenti incrementali di temperatura svolgono un ruolo chiave nello stimolare la deposizione massima delle uova. Il graduale aumento della temperatura da 72 ° F a 78 ° F nei primi tre giorni di una settimana riproduttiva fornisce due-tre giorni consecutivi di deposizione delle uova con il numero massimo di embrioni di alta qualità, che viene poi seguito da una graduale diminuzione della temperatura da 78 ° F a 72 ° F durante gli ultimi tre giorni della settimana di deposizione delle uova. Le procedure mostrate in questo video delineano il flusso di lavoro prima e durante una settimana di allevamento in laboratorio per la deposizione delle uova stimolata dalla temperatura incrementale.

Introduction

Il teleost Astyanax mexicanus ha una forma di superficie con gli occhi (pesci di superficie) e molte diverse abitazioni cieche (pesci delle caverne)^{formano 1,2}. I pesci delle caverne si sono evoluti nell'oscurità perpetua e sotto i limiti alimentari, con conseguente comparsa di nuovi tratti costruttivi e regressivi³. I tratti costruttivi includono aumenti delle papille gustative e delle dimensioni della mascella, organi sensoriali della linea laterale e riserve di grasso. I tratti regressivi includono la perdita o la riduzione della pigmentazione della melanina, degli occhi e d....

Protocol

Questa procedura è stata approvata dalle linee guida istituzionali per la cura degli animali dell'Università del Maryland, College Park (attualmente IACUC 469 #R-NOV-18-59; Progetto 1241065-1).

Figura 1. Calendari durante una settimana di riproduzione e una settimana non riproduttiva. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Results

Generalmente alleviamo e devasiamo i discendenti di pesci di superficie originariamente raccolti a Nacimiento del Rio Choy a San Luis Potosi, Messico (pesce di superficie di Rio Choy) e San Solomon Springs nel Balmorhea State Park, Texas (pesce di superficie del Texas) e pesci delle caverne derivati da Cueva de El Pachón (pesce grotta di Pachón) a Tamaulipas, Messico, e Cueva de los Sabinos (pesce delle caverne di Los Sabinos) e Sotano de la Tinaja (pesce delle caverne di Tinaja) a San Luis Potosi Messico.

Discussion

Astyanax mexicanus è un nuovo modello biologico che si genera frequentemente e può essere allevato facilmente nel laboratorio^1,2. Poiché siamo interessati ai meccanismi di sviluppo che sono alla base dei cambiamenti evolutivi nel pesce delle caverne A. mexicanus, la produzione e l'uso di embrioni è vitale per i nostri obiettivi di ricerca. Lo scopo principale del mantenimento di uno stock adulto di pesce è la produzione di embrioni e giovani ava.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Blackworms	Eastern Aquatics, Lancaster, PA	Nessuno
Reti di allevamento Uova	su misura
	AquaCave Lake Forest, IL.	Nessuno
Kit di test colorimetrico	Petco	SKU:11916	API Kit per il test del pH d'acqua dolce
Fiocchi di tuorlo d'uovo	Pentair, Minneapolis, MN	Nessuno
Fingerbowls	Carolina Biological Supply	741004	Piatti di coltura, 4,5 pollici, 250 mL
Reti portatili	Qualsiasi negozio
Incubatrice per embrioni	Fisher Scientific	51-029-321HPM	405 L
Sali marini oceanici istantanei	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Nessuno
Blu di metilene	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	M9140
Pipette Pasteur	Fisher Scientific	13-678-20	5,75 pollici.
Soluzione di ammollo a rete	Qualsiasi negozio
Ciclo di nutrafin	Amazon	Nessuno	Booster batterico
Frigorifero per alimentazione dal vivo	Qualsiasi fonte
Stereomicroscopio	Qualsiasi fonte
	Qualsiasi fonte
Tetra Tropical Crisps	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Nessuno