Articolo metodologico

Conservazione della fertilità nei pazienti con grave disfunzione ovarica

DOI:

10.3791/62098

25 marzo 2021

In questo articolo

Sommario

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Presentiamo dettagli sulle procedure di laboratorio per l'attivazione in vitro senza farmaci (IVA) dei follicoli ovarico per pazienti con grave disfunzione ovarica. Questo metodo potrebbe aumentare il numero di ovociti recuperabili per iperstimolazione ovarica e beneficiare della conservazione della fertilità per quei pazienti.

Abstract

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La funzione ovarica diminuisce progressivamente durante l'invecchiamento e in alcune condizioni fisiopatologiche tra cui anomalie del cariotipo, malattie autoimmuni, terapie chemio- e radiazioni, nonché interventi chirurgici ovarici. Nelle donne non sposate con grave disfunzione ovarica, la conservazione della fertilità è importante per le gravidanze future. Sebbene la crioconservazione degli ovociti sia un metodo stabilito per la conservazione della fertilità, questi pazienti potrebbero preservare solo un numero limitato di ovociti anche dopo l'iperstimolazione ovarica, portando a stimolazioni ripetute per garantire ovociti sufficienti a garantire la gravidanza futura. Per risolvere questo problema, abbiamo recentemente sviluppato una procedura di attivazione in vitro (IVA) senza farmaci, che ci consente di stimolare le prime fasi dei follicoli ovarico a svilupparsi allo stadio del follicolo preantrale. Questi follicoli preantrali possono rispondere al protocollo unico della stimolazione della gonadotropina, con conseguente aumento del numero di ovociti recuperati per stimolazione ovarica per la crioconservazione. L'IVA senza farmaci comprendeva l'approccio chirurgico e la stimolazione ovarica. Abbiamo rimosso una parte della corteccia da una o entrambe le ovaie da pazienti in chirurgia laparoscopica. I tessuti corticali ovarico sono stati tagliati a cubetti per interrompere la via di segnalazione dell'Ippopotamo e stimolare lo sviluppo dei follicoli allo stadio iniziale. Questi cubi sono stati innestati ortotropicamente nelle ovaie rimanenti e sotto il serosa di entrambe le tube di Falloppio. Abbiamo già pubblicato la procedura chirurgica dell'IVA senza farmaci e il protocollo di successiva stimolazione ovarica, ma qui presentiamo i dettagli dei metodi di laboratorio richiesti per l'IVA senza farmaci.

Introduzione

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La funzione ovarica diminuisce progressivamente durante l'invecchiamento e alcune condizioni fisiopatologiche tra cui anomalie del cariotipo, malattie autoimmuni, terapie chemio- e radiazioni e interventi chirurgici ovarici. La conservazione della fertilità è una delle migliori opzioni per le donne non sposate con grave disfunzione ovarica per preservare il loro potenziale per la gravidanza futura. Per la conservazione della fertilità, attualmente sono disponibili due metodi principalmente nel campo dell'onco-fertilità. La crioconservazione degli ovocite è una procedura ben consolidata per la conservazione della fertilità e molti casi di successo sono

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Protocollo

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Il consenso informato scritto è stato ottenuto da ogni paziente POR con riserva ovarica decrescimento che si è iscritto al trattamento IVA senza farmaci. Questo studio è stato approvato dal comitato etico dell'Università Internazionale di Salute e Benessere (n. 17-S-21). Lo studio clinico è stato registrato con il numero UMIN000034464 ed eseguito in conformità con il Codice Etico della World Medical Association (Dichiarazione di Helsinki).

1. Estrazione della corteccia ovarica

  1. Rimuovere parte della corteccia ovarica (10 x 10 mm, spessore 2-3 mm) da una o entrambe le ovaie in anestesia generale attraverso la chirurgia laparoscopica....

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Risultati

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Nella prima pubblicazione dell'approccio IVA15,abbiamo trapiantato i cubi corticali ovarici uno per uno nei siti di innesto in chirurgia laparoscopica(Figura 1A). Poiché sono stati usati 100-150 cubi ovarici, ci sono volle 3-4 ore per l'innesto tissutale sotto chirurgia laparoscopica. Inoltre, alcuni cubi ovarico sono stati persi prima dell'innesto. Poiché la cannula IVA potrebbe trasferire 20-30 cubi in un sito di innesto contemporaneamente (Figu.......

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Discussione

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In questo manoscritto, abbiamo mostrato un protocollo di laboratorio dettagliato per l'IVA senza farmaci. L'IVA senza farmaci è un nuovo approccio di trattamento dell'infertilità per il paziente POR con riserva ovarica in diminuzione per promuovere la crescita dei follicoli secondari, con conseguente rendimento di ovociti più maturi dopo la stimolazione ovarica e aumento della gravidanza disuccesso 20. In 15 pazienti por con riserva ovarica in diminuzione, questo approccio ha raggiunto una gravida.......

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Dichiarazioni

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Gli autori confermano di non avere alcun conflitto di interessi.

Ringraziamenti

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Ringraziamo Tatsuji Ihana, Sachiyo Kurimoto, Kazuko Takahasih, Yuki Yoshizawa, Maho Arashi, Kentaro Fujita, Erina Kudo, Yuka Kurimoto e Mayuko Wakatsuki per aver supportato la procedura IVA senza farmaci e il Prof. Ringraziamo anche Rebecca Truman e Gregory Truman per aver inserito la narrazione inglese. Questo studio è stato supportato dalla Japan Society for the Promotion of Science (JSPS), Scientific Research B (19H03801) e Challenging Exploratory Research (18K19624).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
contenitore per campioni 4.5 onzFALCON354013Possono essere adatti anche altri prodotti
Piatto da 60 mmFALCON351007Altri prodotti possono essere adatti
Telo sterile da 50 x 50 cmHOGY MedicalSR-823Può essere adatto anche qualsiasi tipo di polvere sterile
Pippete monousoFALCON357575Possono essere adatti
anche altri prodottiForbici fini, curveWPI#14224-GSebbene anche altri prodotti possano essere adatti, si consiglia vivamente di utilizzare questi prodotti
Piastra riscaldanteTOKAI HITTPiE-SPUtilizzare in sala operatoria per mantenere la temperatura delle piastre contenenti tessuto ovarico prima del trapianto
Soluzione di albumina sierica umanaIrvine Scientific9988Mezzo per la manipolazione del tessuto ovarico
Cannula IVAKITAZATO446030 IVA-6030ECannula specifica per autotrapianto tissutale
KAI medical Bisturi monousoWPI#5 10-ASebbene anche altri prodotti possano essere adatti, consigliamo vivamente di utilizzare questi prodotti
Micro forbici, CurvedWPI#503364Sebbene anche altri prodotti possano essere adatti, consigliamo vivamente di utilizzare questi prodotti
HTF modificato Medium-HEPESIrvine Scientific90126Terreno per la manipolazione di tessuto ovarico
Garza sterileOsaki Medical15004Qualsiasi tipo di propolvero sterile può essere adatto anche
Pinzette svizzere, punte curveKAI#504505Sebbene anche altri prodotti possano essere adatti, si consiglia vivamente di utilizzare questi prodotti

Riferimenti

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  1. Liang, T., Motan, T. Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation. Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).
  2. Yoon, T. K., et al. Live births after vitrification of....

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Crioconservazione degli ovocitiattivazione in vitroIVA senza farmaciframmentazione della corteccia ovaricainterruzione della segnalazione Hippoautotrapianto ovaricocrescita dei follicoli secondaricoltura di tessuto ovarico

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