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Articolo metodologico

Dispositivi elettrici e a campo magnetico per la stimolazione dei tessuti biologici

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DOI:

10.3791/62111

15 maggio 2021

In questo articolo

Sommario

Questo protocollo descrive il processo passo-passo per costruire stimolatori elettrici e magnetici utilizzati per stimolare i tessuti biologici. Il protocollo include una linea guida per simulare computazalmente campi elettrici e magnetici e la produzione di dispositivi di stimolazione.

Abstract

I campi elettrici (EFs) e i campi magnetici (IF) sono stati ampiamente utilizzati dall'ingegneria tissutale per migliorare la dinamica cellulare come la proliferazione, la migrazione, la differenziazione, la morfologia e la sintesi molecolare. Tuttavia, variabili come la forza degli stimoli e i tempi di stimolazione devono essere considerati quando si stimolano cellule, tessuti o impalcature. Dato che EFs e IF variano a seconda della risposta cellulare, non è chiaro come costruire dispositivi che generino adeguati stimoli biofisici per stimolare campioni biologici. In effetti, mancano prove relative al calcolo e alla distribuzione quando vengono applicati stimoli biofisici. Questo protocollo è focalizzato sulla progettazione e produzione di dispositivi per generare EFs e IF e sull'implementazione di una metodologia computazionale per prevedere la distribuzione di stimoli biofisici all'interno e all'esterno dei campioni biologici. Il dispositivo EF era composto da due elettrodi paralleli in acciaio inossidabile situati nella parte superiore e inferiore delle colture biologiche. Gli elettrodi erano collegati ad un oscillatore per generare tensioni (50, 100, 150 e 200 Vp-p) a 60 kHz. Il dispositivo MF era composto da una bobina, che era eccitata con un trasformatore per generare una corrente (1 A) e una tensione (6 V) a 60 Hz. Fu costruito un supporto di metacrilato polimetile per localizzare le colture biologiche al centro della bobina. La simulazione computazionale ha chiarito la distribuzione omogenea di EF e IF all'interno e all'esterno dei tessuti biologici. Questo modello computazionale è uno strumento promettente in grado di modificare parametri come tensioni, frequenze, morfologie tissutali, tipi di piastre di pozzo, elettrodi e dimensioni della bobina per stimare gli EF e gli IF per ottenere una risposta cellulare.

Introduzione

EFs e IF hanno dimostrato di modificare la dinamica cellulare, stimolando la proliferazione e aumentando la sintesi delle principali molecole associate alla matrice extracellulare dei tessuti1. Questi stimoli biofisici possono essere applicati in diversi modi utilizzando impostazioni e dispositivi specifici. Per quanto riguarda i dispositivi per generare EF, gli stimolatori di accoppiamento diretto utilizzano elettrodi che sono a contatto con campioni biologici in vitro o impiantati direttamente nei tessuti di pazienti e animali in vivo2; tuttavia, vi sono ancora limitazioni e carenze che includono l'insufficiente biocom....

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Protocollo

1. Simulazione di FEI e IF

NOTA: la simulazione di EFs e IF è stata eseguita in multifisica COMSOL.

  1. Selezionare una configurazione 2D assimmetrica per rappresentare entrambi i domini elettrico e magnetico.
  2. Nella configurazione fisica, selezionate l'interfaccia Corrente elettrica per calcolare ef in elettrodi paralleli o l'interfaccia campo magnetico per calcolare le MF attorno alle bobine.
  3. Nella configurazione di studio, selezionate Dominio frequenza (Frequency Domain) per calcolare la risposta di un modello lineare o linearizzato sottoposto ad eccitazione armo....

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Risultati

Simulazione computazionale
Le distribuzioni di FE e MF sono riportate nella figura 3. Da un lato, è stato possibile osservare la distribuzione omogenea dei FE nel sistema capacitivo(figura 3A). L'EF è stato tracciato per osservare in dettaglio l'entità del campo all'interno del campione biologico (figura 3B). Questa simulazione è stata utile per parametrizzare le dimensioni degli elettrodi e produrli per evitare .......

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Discussione

I trattamenti utilizzati per guarire diverse patologie che colpiscono i tessuti umani sono terapie farmacologiche32 o interventi chirurgici33, che cercano di alleviare il dolore localmente o sostituire i tessuti colpiti con espianto o trapianti. Recentemente, la terapia cellulare autologa è stata proposta come terapia alternativa per il trattamento dei tessuti feriti, in cui le cellule sono isolate dal paziente e ampliate, attraverso tecniche in vitro, da impiantare nel sit.......

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Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere alcun conflitto di interessi.

Ringraziamenti

Gli autori ringraziano il sostegno finanziario fornito da "Fondo Nacional de Financiamiento para la Ciencia, la Tecnología, y la Innovación -Fondo Francisco José de Caldas- Minciencias" e Universidad Nacional de Colombia attraverso la sovvenzione n. 80740-290-2020 e il sostegno ricevuto da Valteam Tech - Research and Innovation per fornire le attrezzature e il supporto tecnico nell'edizione del video.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Stimolatore elettrico
Amplificatore operazionaleMotorolaLF-353N----
Quantità: 1
Resistori--------22 kΩ
Quantità: 1
Resistori--------10 kΩ
Quantità: 3
resistori--------2,6 kΩ
Quantità: 2
resistori--------2,2 kΩ
Quantità: 1
Resistori--------1 kΩ
Quantità: 1
Resistori--------220 Ω
Quantità: 2
resistori--------22 Ω
Quantità: 5
resistori--------10 Ω
Quantità: 1
resistori--------6.8 Ω
Quantità: 1
Resistori--------3.3 Ω
Quantità: 2
Condensatori in poliestere--------1 nF
Quantità: 2
Condensatori in poliestere--------100 nF
Quantità: 1
Transistor amplificatore in banda VHF JFETToshiba2SK161----
Quantità: 1
Transistor di potenza BJT NPNMospecTIP 31C----
Quantità: 1
Diodo ZenerMicrosemi1N4148----
Quantità: 1
InterruttoreToogleSPDT - T13----
Quantità: 3
Nucleo toroidale in ferriteCaracol----T*22*14*8
Quantità: 1
Filo di rameGreenshine----AWG – 24
Quantità: 1
Connettore rigido con alloggiamento femminaADAFRUITConnettori ----8 pin
Quantità: 1
Connettore di riferimento con alloggiamento femminaConnettori ADAFRUIT2 pin
Quantità: 1
Connettore terminale a spina femminaJIALUN4mm Lantern Plugs (Spina + Presa) 15 A
Quantità: 1
Dissipatore di calore in alluminioAWIND----Per TIP 31C transistor
Quantità: 1
LedCHANZON----5 mm rosso
Quantità: 1
Connettore femmina per circuito integratoTe Electronics Co., Ltd.----Doppia fila 8 pin DIP
Quantità: 1
set di connettori a 3 pinSTARJST PH 2.0
Quantità: 3
connettori a vite a 2 pinSTARPer PCB
Quantità: 1
connettori a vite a 3 pinSTAR----Per PCB
Quantità: 1
Cavo di prova per connettore a bananaJIALUNP1041 - 4 mm - 15 A
Quantità: 7
Connettori a proiettile per cavo di ricarica a bananaJIALUN4 mm maschio-femmina/femmina-femmina - 15 A
Quantità: 1
Custodia--------ABS
Quantità: 1 Elettrodi
--------Acciaio inox
Quantità: 2
Supporto elettrodo--------Teflon
Quantità: 2
CircuitoQuantità: 1
Stimolatore magnetico
Cooper wireGreenshine----AWG – 18
Quantità: 1
Spine di alimentazione CA--------120 V CA – 60 Hz
Quantità: 1
Puntale connettore femmina a bananaJIALUN----1Set Doppia iniezione - 4 mm - 15 A
Quantità: 2
Puntale maschio a bananaJIALUN----1Set Doppia iniezione - 4 mm 15 A
Quantità: 1
Supporto per piastra per pozzetti per colture cellulari--------PMMA
Quantità: 1
FusibileBussmann2A----
Quantità: 1
trasformatore--------1A – 6 V AC
Quantità: 1
tubo--------PVC
Quantità: 1
Reostato variabileMCPBXS15010 Ω
Quantità: 1
Attrezzatura generale
Doppia sorgente digitale PeakTechDG 1022Z2 x 0 - 30 V / 0 - 5 A CC / 5 V / 3 A fijo
Quantità: 1
Oscilloscopio digitaleRigolDS1104Z Plus100 MHz, larghezza di banda, 4 canali
Quantità: 1
Multimetro digitaleFlukeF179Tensione CC – CA (1000 V). CC attuale – CA 10 A. Frequenza 100 kHz
Quantità: 1
------------------------ stampato

Riferimenti

  1. Balint, R., Cassidy, N. J., Cartmell, S. H. Electrical Stimulation: A Novel Tool for Tissue Engineering. Tissue Engineering Part B: Reviews. 19 (1), 48-57 (2013).
  2. Ercan, B., Webster, T. J. The effect of biphasic electrical....

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Ristampe e permessi

Tag

Stimolazione a campo elettricostimolazione a campo magneticostimolazione di tessuti biologicisimulazione computazionaledispositivo a elettrodi parallelidispositivo magnetico a bobinaproliferazione cellulareingegneria tissutalemisurazione con oscilloscopiostimolazione di scaffold