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Research Article
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Presentiamo un protocollo per generare movimento ortodontico dei denti nei topi e metodi per la visualizzazione 3D delle fibre di collagene e dei vasi sanguigni del legamento parodontale senza sezioni.
Il movimento ortodontico dei denti è un complesso processo biologico di rimodellamento alterato dei tessuti molli e duri come risultato di forze esterne. Per comprendere questi complessi processi di rimodellamento, è fondamentale studiare i tessuti dentali e parodontali all'interno del loro contesto 3D e quindi ridurre al minimo qualsiasi sezionamento e artefatti tissutali. I modelli di topo sono spesso utilizzati nella biologia dello sviluppo e strutturale, così come nella biomeccanica a causa delle loro piccole dimensioni, alto tasso metabolico, genetica e facilità di manipolazione. In linea di principio questo li rende anche modelli eccellenti per studi relativi all'odontoiatria. Tuttavia, un grosso impedimento è la loro piccola dimensione del dente, i molari in particolare. Questo documento ha lo scopo di fornire un protocollo passo dopo passo per generare il movimento ortodontico dei denti e due metodi per l'imaging 3D del componente fibroso legamento parodontale di un molare mandibolare del topo. Il primo metodo presentato si basa su una configurazione micro-CT che consente l'imaging di miglioramento della fase dei tessuti di collagene fresco. Il secondo metodo è un metodo di compensazione ossea che utilizza cinnamato etilico che consente l'imaging attraverso l'osso senza sessare e preserva la fluorescenza endogena. Combinando questo metodo di compensazione con topi reporter come Flk1-Cre; TdTomato ha fornito una prima opportunità nel suo genere di immagine della vascuola 3D nel PDL e nell'osso alveolare.
Il processo biologico di base nel movimento ortodontico dei denti (OTM) è il rimodellamento osseo. Il trigger per questo processo di rimodellamento è attribuito a cambiamenti nella struttura del legamento parodontale (PDL) come lo stress della matrice extracellulare (ECM), la necrosi, la distruzione e la formazione dei vasisanguigni 1,2,3. Altri possibili fattori scatenanti per il rimodellamento osseo alveolare sono correlati al rilevamento della forza da parte degli osteociti nell'osso, così come alla deformazione meccanica dell'osso alveolare stesso; tuttavia il loro ruolo in OTM non è ancora del tutto chiarito4,5.
Nonostante molti studi volti a rivelare le relazioni struttura-funzione del PDL durante l'OTM, un chiaro meccanismo funzionale deve ancora esseredefinito 6,7. La ragione principale di ciò è la sfida nel recupero dei dati di un tessuto molle (PDL) situato tra due tessuti duri (cemento e osso alveolare). I metodi accettati per raccogliere informazioni strutturali di solito richiedono fissazione e sezionamento che interrompono e modificano la struttura PDL. Inoltre, la maggior parte di questi metodi fornisce dati 2D che, anche se non distorti, forniscono solo informazioni parziali e localizzate. Poiché il PDL non è uniforme nella sua struttura e funzione, è giustificato un approccio che affronta la struttura 3D intatta dell'intero complesso dentale-PDL-osso.
Questo documento descriverà un metodo per generare un OTM nei topi e due metodi che consentono la visualizzazione 3D delle fibre di collagene nel PDL senza alcuna sezione del campione.
I modelli murini sono ampiamente utilizzati per esperimenti in vivo in medicina, biologia dello sviluppo, somministrazione di farmaci e studi strutturali. Possono essere geneticamente modificati per eliminare o migliorare proteine e funzioni specifiche; forniscono un controllo dello sviluppo rapido, ripetibile e prevedibile; sono anche facili da immaginare grazie alle loro piccole dimensioni8. Nonostante i loro numerosi vantaggi, i modelli di topo nella ricerca dentale non vengono utilizzati frequentemente, specialmente quando le manipolazioni cliniche sono giustificate, principalmente a causa dei denti di piccole dimensioni. Modelli animali come ratti9,10,11,cani12,13,maiali14,15,16 e scimmie 17 sono usati più spesso dei topi. Con il recente sviluppo di tecniche di imaging ad alta risoluzione, i vantaggi dell'utilizzo di un modello di mouse per decifrare i processi contorti in OTM sono numerosi. Questo articolo presenta un metodo per generare un movimento mesiale del dente molare nella madibola con livelli di forza costanti che innescano il rimodellamento osseo. La maggior parte degli esperimenti OTM sui roditori sono fatti nella mascella, poiché la mobilità della mattiglia e la presenza della lingua aggiungono un altro livello di complessità. Tuttavia, la madibola ha molti vantaggi quando si desidera l'integrità strutturale 3D. Può essere facilmente sezionato come un osso intero; in alcune specie può essere separato in due emi-madibole attraverso la sifisi fibrosa; è compatto, piatto e contiene solo i denti senza spazi seno. Al contrario, la mascella è una parte del cranio e strettamente correlata ad altri organi e strutture, quindi è necessaria una sezione estesa per sezionare l'osso alveolare con i denti associati.
Utilizzando una camera di umidità interna accoppiata a un sistema di carico all'interno di una micro-TAC ad alta risoluzione che consente il miglioramento della fase, abbiamo sviluppato un metodo per visualizzare tessuti fibrosi freschi in 3D comeprecedentemente descritto 9,18,19,20,21,22,23. I tessuti freschi vengono scansionati immediatamente dopo che l'animale è stato sacrificato senza alcuna colorazione o fissazione, il che riduce i manufatti tissutali e le alterazioni delle proprietà biomeccaniche. Questi dati 3D possono essere utilizzati per analisi di distribuzione e direzione delle fibre come descritto altrove19.
Il secondo metodo di imaging 3D di tessuti interi qui presentato si basa sulla pulizia ottica della madibola che consente l'imaging delle fibre PDL attraverso l'osso senza alcuna sezione. È interessante notare che consente anche la visualizzazione delle fibre di collagene dell'osso stesso, tuttavia questo non sarà discusso qui. In generale, ci sono due metodi per la pulizia dei tessuti. Il primo è la radura a base acquosa in cui il campione è immerso in una soluzione acquosa con un indice di rifrazione maggiore di 1,4 attraverso una semplice immersione, iperidratazione o immersione di idrogel. Tuttavia, questo metodo è limitato nel livello di trasparenza e nella conservazione strutturale del tessuto e quindi richiede la fissazione del tessuto. Il secondo metodo che produce campioni altamente trasparenti e non richiede fissazione è il metodo di compensazione a base disolventi 24,25. Abbiamo generato un metodo di compensazione modificato a base di solventi basato sull'etil-3-fenilprop-2-enoato (etil cinnamato, ECi) per i campioni mandibolari. Questo metodo ha i vantaggi di utilizzare agenti di compensazione non tossici per uso alimentare, restringimento minimo dei tessuti e conservazione delle proteine fluorescenti.
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con le Linee guida del NIH per la cura e l'uso degli animali da laboratorio e le linee guida del Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali dell'Università di Harvard (protocollo n. 01840).
1. Movimento ortodontico dei denti
2. Micro-TAC di fibre PDL in emi-madibole fresche
3. Metodo di compensazione (figura 3)
Questo articolo presenta un metodo per produrre OTM e due metodi per l'imaging 3D di fibre di collagene all'interno del PDL senza alcuna sezione. Ai fini della ricerca animale, quando l'allineamento dei denti non è necessario, un movimento del dente è considerato ortodontico se genera rimodellamento dell'osso alveolare a tutti i livelli delle radici. È necessario un livello di forza costante applicato sui denti per generare un OTM affidabile. Qui, una bobina NiTi a memoria di forma attivata viene utilizzata per generare una forza costante di 10 g per tutto il tempo sperimentale di 7 giorni e oltre se giustificata. L'attivazione della bobina qui descritta(Figura 1)genera tensione nella bobina NiTi all'interno della fase martensitica e porta la bobina allo stato di isteresi, che fornisce una sollecitazione costante sul dente. Riscaldare la bobina con la luce di polimerizzazione dopo l'inserimento della bobina farà anche in modo che la lega si sposti nella sua forma austenitica e che l'effetto memoria della forma avrà luogo.
Qui mostriamo i risultati rappresentativi dei topi maschi di 9 settimane. Lo spazio mesiodistale medio tra le corone del primo e del secondo molare dopo 7 giorni di OTM è di 40 μm misurato tra le superfici interprossimali dei molari nella micro-TC con ingrandimento 1X (n=12, st.dev. = 15 μm)(Figura 1E). Lo spazio medio del PDL nella direzione mesiodistale è di 80 μm prima e dopo 7 giorni di OTM (Figura 4B). Ciò conferma che il primo molare tradotto mesialmente e 7 giorni è un tempo adeguato per generare OTM in un modello di topo generando al contempo processi di riassorbimento osseo e apposizione in natura (Figura 4). I topi venivano nutriti con una dieta standard a pallet duri. Non è stato apportato alcun cambiamento dietetico all'inserimento post-dispositivo.
Il primo metodo presentato per visualizzare i cambiamenti nel complesso dentale-PDL-osso durante l'OTM si basa sull'imaging micro-CT potenziato in fase di tessuti freschi (Figura 4) che è stato descritto in dettaglio inprecedenza 9,18,19,20,22,23. In breve, fornito una capacità di miglioramento di fase di una micro-TAC o di un sincrotrone, stabilizzazione meccanica del tessuto fibroso e ambiente umidificato, le fibre collagene fresche possono essere visualizzate senza alcun agente fissazione o contrastante. Nel PDL le fibre che si vedono sono quelle che sono collegate sia al dente che all'osso, principalmente collagene di tipo I19. Questa opportunità unica di visualizzare in 3D un PDL intatto consente l'analisi della densità della fibra 3D, dell'orientamento delle fibre e del movimento 3D del dente come descritto inprecedenza 9,19. Nello specifico, qui presentiamo la visualizzazione della rete fibrosa nel PDL. Al tempo 0, si può osservare un rimodellamento fisiologico sia nell'osso che nel PDL. Il rimodellamento avviene anche nel cementum cellulare; tuttavia, questo non è direttamente correlato al metodo presentato e quindi non verrà elaborato. L'interfaccia osso-PDL è per lo più liscia sia nei piani trasversale (Figura 4A) che sagittale (Figura 4B) prima di qualsiasi applicazione di forza. Nel piano coronale (Figura 4C), l'interfaccia osso-PDL è più ruvida soprattutto verso la regione apicale che potrebbe essere indicativa del fatto che l'equilibrio di rimodellamento tende al riassorbimento. A 3 giorni di OTM (Figura 4D-F), su cui il primo molare viene spostato mesialmente (la direzione è rappresentata dalla freccia tratteggiata), la densità delle fibre nel PDL è ridotta (punte di freccia bianche). L'interfaccia osso-PDL è più ruvida rispetto a 0 giorni a causa dello sviluppo di crateri nella superficie ossea che sono indicativi dell'attività osteoclastica e dei processi di riassorbimento osseo associati principalmente alle forze di compressione nel PDL26, tuttavia qui visto nelle aree di tensione a 3 giorni. La distruzione dei tessuti nelle aree di tensione all'interno del PDLè stata suggerita 27,28 e può essere chiaramente vista usando questo metodo. Il bordo ruvido è visto a diversi livelli delle radici (frecce bianche) e quindi suggerisce che il movimento del dente è di natura traslazionale e non solo ribaltamento della corona. A 7 giorni di OTM (Figura 4G-I), i segni di riassorbimento osseo, come i crateri all'interno dell'osso, i bordi ruvidi e l'espansione dello spazio PDL, sono visti su tutti i piani, ma lo spazio PDL medio è più stretto rispetto a 3 giorni di OTM (Figura 4D-F). In alcune aree, tuttavia, il bordo osso-PDL è diventato più liscio dopo 7 giorni di OTM queste aree si trovano sulle superfici distali delle radici, il che è molto probabilmente un'indicazione per l'apposizione ossea, come previsto in OTM alla direzione mesiale.
A causa del lungo tempo di imaging micro-CT (~ 19 h) e della rotazione dello stadio, il montaggio del campione è essenziale per mantenere fermo il campione. Il campione instabile comporterà scansioni sfocate. La figura 5 presenta l'aspetto della micro-TAC quando il campione si è spostato durante la scansione. Il dente e l'osso sono sfocati. Né le fibre PDL né gli osteociti sono osservati. In tali incidenti c'è una sagoma presente intorno al margine di un oggetto. Nella figura 5è possibile osservare più contorni della corona dentale (frecce).
A seconda dell'obiettivo di ricerca, la risoluzione e la visualizzazione delle fibre PDL possono essere sacrificate nel commercio per tempi di scansione più brevi quando si desidera solo informazioni sui tessuti duri.
Un metodo complementare per la visualizzazione 3D delle fibre PDL senza alcun sezionamento è tramite microscopia ottica su campioni otticamente cancellati utilizzando ECi (Figura 3). Questo metodo può essere utilizzato su un campione senza fissazione e preserva i segnali fluorescenti che esistono nel tessuto prima della compensazione. Le emi-madibole prima e dopo la compensazione ECi sono mostrate nelle figure 3B e 3C. Un'adeguata pulizia del campione del PDL può essere confermata quando una carta griglia può essere vista attraverso il ramus della mavibile. La quantità di compensazione può essere regolata allungando il processo di disidratazione. La figura 6 mostra il segnale di seconda generazione armonica (SHG) proveniente dalle fibre di collagene sia nell'osso alveolare che nel PDL in una mattiera cancellata. L'imaging delle fibre di collagene dell'osso in 3D è un processo complicato, che spesso utilizza metodi di microscopia elettronica come FIB / SEM. Tuttavia, utilizzando il metodo di compensazione basato su ECi e SHG, le fibre ossee alveolari sono chiaramente viste, specialmente nella direzione orizzontale. Quando si traduce attraverso il campione in profondità nel PDL dalla superficie ossea, la transizione al livello della fibra PDL è molto chiara poiché le fibre cambiano improvvisamente il loro orientamento in uno verticale.
La microscopia a fogli leggeri può anche essere utilizzata per l'imaging di proteine fluorescenti attraverso l'osso. In questo caso di campione sdoganato da un Flk1-cre transgenico; Il topo tdtomato19,29,30, le cellule endoteliali fluorescenti che rivestono i vasi sanguigni sono chiaramente osservate(figura 7A,B, C, E). La corretta cancellazione è la chiave per generare immagini intelligibili con microscopia a fogli luce. Quando l'osso non è completamente sdoganato, i vasi sanguigni all'interno del PDL non sono statiosservati (figura 7D, F).
Figura 1: Inserimento ortodontico dell'apparecchio. A. La commissione per l'a Letto per topi realizzato in laboratorio per sostenere l'animale e tenere la bocca aperta. La piattaforma in plastica (PP) per il corpo è inclinata di 30° e il poggiacapo (HR) è su un angolo di 45 ° dalla superficie di PP. Un supporto per tubi a 2 livelli (TS) viene utilizzato per elevare la testa finale del PP. Il loop di graffetta (freccia nera) ancora gli incisivi superiori e la catena di potenza ortodontica inferiore (freccia bianca) si aggancia agli incisivi inferiori. Lo specchio di ispezione di 5 mm di diametro è stato utilizzato per l'ispezione visiva dei molari. B. La commissione per l' Vista laterale del letto del mouse. Gli angoli tra le superfici sono contrassegnati (verde e magenta). C. La commissione per l' Immagine rappresentativa del dispositivo posizionato correttamente. D. La commissione per l' Molari visti attraverso lo specchio di ispezione prima dell'impianto del dispositivo. E. La commissione per l' Immagine rappresentativa dei molari dopo il movimento ortodontico. Le linee tratteggiate tracciano il contorno del primo e del secondo molare. F. Diagramma del dispositivo e del suo posizionamento. La linea rossa rappresenta la legatura del filo attorno al primo molare. La linea arancione rappresenta la resina composita scorrevole utilizzata per ancorare la bobina. La bobina NiTi è mostrata in blu ed etichettata. G. La commissione per l' Emi-madibola sezionata con il dispositivo collegato dopo il movimento ortodontico di 7 giorni. Si noti come i 3 filetti di bobina sono ancora aperti, indicando che la bobina è ancora attiva dopo 7 giorni. Barra di scala = 1 mm in Mi e G. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 2: Emi-madibola montata in una camera su misura per l'imaging micro-TC. A. Set-up completo della camera campione all'interno della macchina micro-CT. La sorgente di raggi X è vista a sinistra e il rivelatore a destra. Il rettangolo rosso delinea l'emi-madibola montata nella camera sullo stadio del campione (SS). La camera di esempio qui mostrata fa parte di un set-up di prova meccanico, tra cui motore (M), incudine (A, delineata da linee tratteggiate bianche) e albero dell'incudine (AS) in cima alla camera. L'intero set up viene avvitato sul palco CT. L'immagine interna mostra il primo primo della regione rossa delineata, contenente la camera di umidità con campione all'interno. B. La commissione per l' Vista dall'alto del campione montato sullo stadio di campionamento. Le piscine di umidità (freccia grigia) sono integrate sul perimetro per mantenere l'umidità durante l'imaging. Sul palco circolare al centro, l'emi-madibola può essere montata nella scanalatura profonda inclinata (freccia nera). Una scanalatura sottile (freccia bianca) segna la linea mediana dello stadio per aiutare ad orientare il campione. C. La commissione per l' Diagramma dello stadio circolare con la scanalatura del campione. L'inclinazione della scanalatura sostiene la mattiere e consente di montare i molari lungo l'asse verticale delle radici. D. La commissione per l' Fetta 2D micro-CT rappresentativa combinata con un'immagine del volume 3D del campione emi-madibile. Il divario interprossimale qui è di 52 μm. Il campione è montato sullo stadio del campione sottostante (non mostrato) e l'incudine (A) in cima dal composito dentale (DC). Barra di scala = 500 μm. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 3. Metodo di compensazione basato su ECi per le emi-madibole del mouse sezionate. A. La commissione per l'a L'emi-madibola sezionata è immersa nel 4% di PFA, 50% EtOH, 70% EtOH e 100% EtOH consecutivamente. Dopo la disidratazione, l'emi-madibola viene conservata in ECi per un minimo di 12 ore fino all'imaging. B. La commissione per l' Emi-madibola subito dopo la dissezione. C. La commissione per l' Emi-madibola dopo il completamento della compensazione. Barre di scala = 5 mm Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 4: Scansioni rappresentative in situ micro-CT del PDL di un campione fresco nelle diverse fasi del movimento ortodontico. A-C, nessun movimento ortodontico. A. La commissione per l'a Immagine 2D micro-CT nel piano trasversale dell'emi-madibola che mostra le radici mesiali (M) e distali (D) all'interno dell'osso alveolare, B-Buccal, L-Lingual lati dell'osso alveolare. Tra le radici dei denti e l'osso alveolare, lo spazio PDL e le fibre al suo interno sono chiaramente osservati. Immagine B. 2D nel piano sagittale. Immagine C. 2D nel piano coronale. D-E, immagini 2D dopo 3 giorni di OTM, le punte delle frecce puntano verso le aree del PDL con riduzione della densità delle fibre di collagene, le frecce bianche puntano verso aree di riassorbimento osseo. G-I, immagini 2D dopo 7 giorni di OTM, le frecce nere puntano verso le regioni di apposizione ossea. Barre di scala = 150 μm. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 5: Immagine micro-CT 2D nel piano sagittale, che mostra strutture sfocate sia del dente che dell'osso a causa del movimento del dente durante la scansione. Le frecce puntano su più linee della tavola del dente, indicandone il movimento. Barra di scala 150 μm. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 6: Madibola cancellata ECi che mostra il primo molare immaginato con seconda generazione armonica (SHG). La freccia bianca punta in una regione in cui si vedono fibre di collagene del PDL, si noti l'orientamento verticale, le frecce nere puntano in una regione in cui sono viste sia fibre verticali del PDL che fibre orizzontali dell'osso alveolare. Dente T, F-furcation, osso ab-alveolare, radice MR-mesiale, radice DR-Distal, barra di scala 150 μm. Le immagini sono state ottenute utilizzando un obiettivo multi-immersione 20X per soluzioni con RI di 1.33-1.56. Il laser di eccitazione è stato impostato a 860nm con una potenza del 10%. Tempo di abitazione dei pixel: 0,51μs; Modalità di scansione: fotogramma; Media: 16; Tipo di rivelatore: rilevatore di tubi fotomoltiplicatore non scansionato; Detector Gain 800V. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 7. Immagini al microscopio lightsheet del mouse Flk1-Cre;tdTomato cancellato da ECi. A. La commissione per l'a Emi-madibola di controllo cancellata in modo ottimale. La rete di vasi sanguigni all'interno dell'osso (testa di freccia) e dello spazio PDL (freccia) è visibile. B. La commissione per l' l'interno della regione mesiolinguale del primo molare (rosso delineato in A) mostra i vasi sanguigni. C. emi-madibola OTM a 7 giorni e D. non ottimale cancellato emi-madibola. E. La commissione per l' Immagine 2D del pannello C nel piano sagittale, l'immagine mostra vasi sanguigni ben definiti in osso (freccia grigia) e spazio PDL (frecce bianche). F. Immagine a sezione bidimensionale del pannello D, stessa regione delle immagini in E, con conseguente sfocatura dell'immagine. Barre di scala A, C, D = 500 μm, B, E, F = 100 μm Le immagini sono state scattate con un obiettivo di piano 5X, usando la fotocamera come rilevatore. Il laser ad eccitazione era di 561 nm con una potenza del 4%. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Presentiamo un protocollo per generare movimento ortodontico dei denti nei topi e metodi per la visualizzazione 3D delle fibre di collagene e dei vasi sanguigni del legamento parodontale senza sezioni.
Questo studio è stato supportato dal NIH (NIDCR R00- DE025053, PI:Naveh). Vorremmo ringraziare l'Harvard Center for Biological Imaging per le infrastrutture e il supporto. Tutte le cifre sono generate con biorender.com.
| Siringa BD Luer-Lok da 1 mL | BD | 309628 | |
| soluzione salina tamponata con fosfato | VWR Life Sciences | 0780-10L | |
| 200 etanolo a prova | VWR Life Sciences | V1016 | Lega di alluminio 5019|
| filo | Sigma-aldrich | GF15828813 | 0,08 mm di diametro, lunghezza 100°, tempra dura. Usato come legatura del filo attorno al molare. |
| Avizo 9.7 | Thermo Fisher Scientific | N/A | Utilizzato per analizzare le scansioni microCT |
| Castroviejo Micro Needle Holders | Strumenti per la scienza fine | 12060-01 | |
| Clr Plan-Apochromat 20x/1.0, CorrVIS-IR M27 85mm | Zeiss | N/A | Utilizzato per l'imaging di seconda generazione armonica |
| Impugnatura a cono a presa, a terminazione singola, a forma di mano | G.Hartzell e figlio | 126-CSH3 | Impugnatura del specchio di ispezione |
| EC Plan-Neofluar 5x/0.16 | Zeiss | 440321-9902 | Utilizzato per l'imaging a foglio luminoso |
| Elipar DeepCure-S LED lampada polimerizzante | 3M ESPE | 76985 | |
| Eppendorf safe-lock tubes, 1.5mL | Eppendorf | 22363204 | |
| Ethyl cinnamate, >= 98% | Sigma-aldrich | W243000-1KG-K | |
| Ago ipodermico, 27G x 1/2'' | BD | 305109 | |
| Ketathesia 100mg/ml | Henry Schein Salute degli animali | NDC:11695-0702-1 | |
| Tergicristalli delicati KIMWIPES | Kimberly-Clark | 21905-026 (numero di catalogo VWR) | Acquistato da VWR |
| LightSheet Z.1 sistema di microscopio a doppia illuminazione | Zeiss | LightSheet Z.1/LightSheet 7 | Utilizzato per l'imaging di fogli luminosi |
| LSM 880 NLO multi-fotone microscopio | Zeiss | LSM 880 NLO | Utilizzato per l'imaging a due fotoni |
| MEGAmicro, piano, diametro 5 mm, filettatura SS | Hahnenkratt | 6220 | Specchio ispezionativo della superficie frontale |
| Macchina MicroCT, MicroXCT-200 | Xradia | MICRO XCT-200 | |
| Mini-Colibri | Fine Science Tools | 17000-01 | |
| PermaFlo Composito fluido | Ultradent | 948 | |
| Piattaforma procedurale | N/A | N/A | Realizzato su misura con materiali di laboratorio |
| Microfono stereo di routine M80 | Leica Micosystems | M80 | |
| Sentalloy NiTi molla elicoidale aperta | TOMY Inc. | Una bobina NiTi chiusa di 0,15 mm di diametro con un diametro interno della bobina di 0,9 mm eroga una forza di 10 g. Prodotti simili possono essere acquistati da Dentsply Sirona. | |
| Filo per legatura in acciaio inossidabile T-304, diametro 0,009'' | Ortodonzia | SBLW109 | 0,009'' (23 mm) di diametro, tempra morbida |
| X-Ject E (xilazina) 100mg/ml | Henry Schein Salute animale | NDC:11695-7085-1 | |
| Z100 Restaurativo, colore A2 3M | ESPE | 5904A2 |
