La lesione cerebrale traumatica (TBI) è comunemente associata a compromissione della memoria. Qui, presentiamo un protocollo per valutare la memoria di lavoro spaziale dopo TBI tramite un'attività metrica. Un test metrico è uno strumento utile per studiare la compromissione della memoria di lavoro spaziale dopo TBI.
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Articolo metodologico
Un test metrico per valutare la memoria di lavoro spaziale nei ratti adulti a seguito di lesioni cerebrali traumatiche
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Le menomazioni alla memoria sensoriale, a breve termine e a lungo termine sono effetti collaterali comuni dopo lesioni cerebrali traumatiche (TBI). A causa dei limiti etici degli studi sull'uomo, i modelli animali forniscono alternative adeguate ai metodi di trattamento dei test e per studiare i meccanismi e le relative complicanze della condizione. I modelli sperimentali di roditori sono stati storicamente i più utilizzati grazie alla loro accessibilità, basso costo, riproducibilità e approcci convalidati. Un test metrico, che verifica la capacità di richiamare il posizionamento di due oggetti a varie distanze e angoli l'uno dall'altro, è una tecnica per studiare la compromissione della memoria di lavoro spaziale (SWM) dopo TBI. I vantaggi significativi delle attività metriche includono la possibilità di osservazione dinamica, basso costo, riproducibilità, relativa facilità di implementazione e ambiente a basso stress. Qui, presentiamo un protocollo di test metrico per misurare la compromissione di SWM nei ratti adulti dopo TBI. Questo test fornisce un modo fattibile per valutare la fisiologia e la fisiopatologia della funzione cerebrale in modo più efficace.
Introduzione
La prevalenza di deficit neurologici come l'attenzione, la funzione esecutiva e alcuni deficit di memoria dopo una moderata lesione cerebrale traumatica (TBI) è superiore al 50%1,2,3,4,5,6,7,8. Tbi può portare a gravi menomazioni nella memoria spaziale a breve termine, a lungo termine e di lavoro9. Queste compromissioni della memoria sono state osservate in modelli di roditori di ....
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Protocollo
Gli esperimenti sono stati condotti seguendo le raccomandazioni delle Dichiarazioni di Helsinki e Tokyo e le Linee guida per l'uso degli animali da esperimento della Comunità europea. Gli esperimenti sono stati approvati dal Comitato per la cura degli animali dell'Università Ben-Gurion del Negev. Una sequenza temporale del protocollo è illustrata nella Figura 1.
1. Procedure chirurgiche e TBI a percussione fluida
- Alcuni ratti Sprague-Dawley adulti maschi e femmine, alloggiati a una temperatura ambiente di 22 ± 1 °C e umidità del 40%-60%, con cicli luce-buio di 12-12 ore.
- Fornire cibo come ch....
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Risultati
Il significato dei confronti tra i gruppi è stato determinato utilizzando il test di Mann-Whitney. La significatività statistica dei risultati è stata considerata a P < 0,05, mentre la rilevanza statisticamente elevata è stata misurata a P < 0,01.
I risultati non hanno mostrato differenze nella NSS tra tutti i gruppi prima dell'intervento e 28 giorni dopo il TBI. Ogni gruppo era composto da 12 femmine o 12 ratti maschi. I punteggi NSS ottenuti 48 ore dopo TBI sono presentati nella
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Discussione
Prendendo di mira in modo specifico il processo di informazione spaziale metrica, questo test metrico fornisce uno strumento necessario per comprendere la carenza di memoria dopo TBI. Il protocollo presentato in questo documento è una modifica delle attività comportamentali precedentemente descritte11. Un'attività metrica descritta in precedenza utilizzava due diversi paradigmi, ciascuno costituito da tre sessioni di assuefazione e una sessione di test. Il primo paradigma consisteva nello spostare.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Ringraziamo la professoressa Olena Severynovska; Maryna Kuscheriava M.Sc; Maksym Kryvonosov M.Sc; Daryna Yakumenko M.Sc; Evgenia Goncharyk M.Sc; e Olha Shapoval, dottoranda presso il Dipartimento di Fisiologia, Facoltà di Biologia, Ecologia e Medicina, Oles Honchar Dnipro University, Dnipro, Ucraina per i loro contributi di supporto e utili. I dati sono stati ottenuti come parte della tesi di dottorato di Dmitry Frank.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Clorexidina al 2% in soluzione alcolica al 70% | SIGMA - ALDRICH | 500 cc | Per l'antisepsi generale della pelle in campo operatorio |
| Bupivacaina 0,1 % | |||
| 4 pannelli di diversi spessori (1,5 cm, 2,5 cm, 5 cm e 8,5 cm) | Questo serve a valutare il difetto | ||
| 4-0 Sutura in nylon | 4-00 | ||
| Flaconi | Techniplast | ACBT0262SU | flaconi da 150 ml riempiti con 100 ml di acqua e 100 ml di soluzione di saccarosio all'1% (p/v) |
| Bottlses (quattro) per compiti topologici e metrici | Per gli oggetti utilizzati due bottigliette, la prima di forma tonda (altezza 13,5 cm) e la seconda sfaccettata (altezza 20 cm) e due bottiglie grandi sfaccettate, la prima 9x6 cm (altezza 21 cm) e la seconda 7x7 cm (altezza 21 cm). | ||
| Trapano per sega a tazza diamantato | Kit sega a tazza in vetro | opzionale. | |
| Bilancia digitale | SIGMA - ALDRICH | Rs 4.000 | |
| Forbici da dissezione | SIGMA - ALDRICH | Z265969 | |
| Etanolo 99,9 % | Farmacia | 5% -10% soluzione utilizzata per pulire le apparecchiature e rimuovere gli odori | |
| EthoVision XT (software video) | Noldus, Wageningen, Paesi Bassi | Dispositivo opzionale | |
| percussione di fluidi | realizzato su misura presso l'officina | universitaria Non è consigliata alcuna marca specifica. | |
| Spugne di garza | Fisher | 22-362-178 | |
| Guanti (guanti da laboratorio sottili) | Opzionale. | ||
| Riscaldatore con termometro | Heatingpad-1 | Modello: HEATINGPAD-1/2 | Non è consigliata alcuna marca specifica. |
| Horizon-XL | Mennen Medical Ltd | ||
| Isofluran, USP 100% | Piramamal Critical Care, Inc | NDC 66794-017 | Liquido anestetico per inalazione |
| Office 365 ProPlus | Microsoft-Microsoft | Office Excel | |
| Microscopio Olympus BX 40 | Olympus | ||
| Pinza operatoria | SIGMA - ALDRICH | ||
| In funzione Forbici | SIGMA - ALDRICH | ||
| PC Computer per la registrazione USV e l'analisi dei dati | Intel | Intel® core i5-6500 CPU @ 3,2 GHz, 16 GB di RAM, sistema operativo a 64 bit | |
| Scatole in plexiglass collegate da uno stretto passaggio | Due scatole in plexiglass trasparenti da 30 cm & volte; 20 cm & volte 20 cm collegate da uno stretto passaggio di 15 cm & volte 15 cm & volte 60 cm | ||
| Purina Chow | Purina | 5001 | Cibo da laboratorio per roditori somministrato a ratti, topi e criceti è un alimento per il ciclo di vita che è stato utilizzato nella ricerca biomedica per oltre 5 |
| gabbie per topi. (ratti, casa, gabbia o altro recinto) | Techniplast | 2000P | Non si consiglia alcuna marca specifica |
| Lame per bisturi 11 | SIGMA - ALDRICH | S2771 | |
| SPSS | SPSS Inc., Chicago, IL, USA | 20 confezioni | |
| Strumento Stereotassico | realizzato su misura presso l'officina | universitaria Non è consigliata alcuna marca specifica | |
| Dispositivo di cronometraggio | Timer a intervalli: temporizzazione per la registrazione di | opzionale. Qualsiasi timer andrà bene, anche se è conveniente utilizzare un timer a intervalli se si sta solleticando più ratti Dispositivo | |
| per attività topologiche e metriche | Autoprodotto a Ben Gurion Università del Negev | Piattaforma circolare bianca di 200 cm di diametro e 1 cm di spessore sul tavolo | |
| Videocamera | Logitech | C920 HD PRO WEBCAM | Videocamera digitale per la registrazione ad alta definizione del comportamento dei ratti in più test del labirinto |
| Windows 10 | Valentina |
Riferimenti
- Binder, L. M. Persisting symptoms after mild head injury: A review of the postconcussive syndrome. Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology. 8 (4), 323-346 (1986).
- Binder, L. M. ....
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Ristampe e permessi
