Articolo metodologico

Un sistema di imaging ad alta definizione regolabile per studi comportamentali di adulti drosofili

DOI:

10.3791/62533

8 giugno 2021

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Questo protocollo descrive come creare una semplice camera di osservazione del comportamento della Drosophila adulta e come scattare fotografie / video ad alta definizione della morfologia o del comportamento di diversi tipi di moscerini della frutta nella camera di osservazione attraverso metodi relativamente semplici e convenienti.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Drosophila melanogaster è un modello molto potente nella ricerca biologica, ma un cattivo modello per la fotografia o la videografia. Questo documento descrive un metodo semplice ma efficace per osservare e documentare il comportamento o la morfologia delle mosche. Le mosche sono state collocate in una camera di osservazione traslucida c.a. Ø15 x 5mm (senza cibo all'interno) o Ø15 x 12 mm (con un pezzo di cibo alto 8 mm all'interno). Dopo aver coperto con un filtro ultravioletto (UV) / trasparente ad alta trasmittanza luminosa, la camera è stata posizionata sotto uno stereomicroscopio con zoom 5-50x e sono state posizionate mini luci video a diodi emettitori di luce (LED) su entrambi i lati del microscopio per illuminare la camera per ottenere una luce uniforme, morbida, luminosa e quasi priva di ombre. Quindi, una fotocamera digitale compatta con zoom ottico 3-5x, in grado di registrare video ad alta definizione o risoluzione superiore 1080 P (a una frequenza fotogrammi di ≥30 fps), è stata collegata all'oculare del microscopio tramite una staffa e fotografie o video sono stati scattati attraverso l'oculare. Regolando la manopola dello zoom dello stereomicroscopio zoom, è stato molto facile tracciare le mosche e scattare immagini ravvicinate panoramiche o dettagliate secondo necessità, mentre la fotocamera registrava tutto al microscopio. Poiché le mosche possono rimanere in qualsiasi posizione nella camera, possono essere osservate e registrate da tutte le direzioni. Le fotografie o i video scattati sono di buona qualità dell'immagine. Questo metodo può essere utilizzato sia per la ricerca scientifica che per l'insegnamento.

Introduzione

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Drosophila melanogaster è un modello eccezionale nella ricerca biologica; tuttavia, è un cattivo modello per la fotografia o la videografia, in quanto è troppo piccolo per una fotocamera o una videocamera e troppo grande per un microscopio composto1. Nonostante l'eccellente ricerca descritta in letteratura, la maggior parte degli studi ha fornito solo immagini sfocate e poco chiare, piuttosto che fotografie chiare e nitide con dettagli chiari che illustrano il comportamento della mosca descritta. Inoltre, sebbene i comportamenti delle mosche siano stati ampiamente studiati (ad esempio, corteggiamento e combattimento), la maggior parte ....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Costruzione del sistema di osservazione/documentazione

NOTA: I materiali necessari per costruire il sistema di osservazione/documentazione del comportamento della mosca sono mostrati nella Figura 1e il sistema completato è mostrato nella Figura 2. Il protocollo per costruire il sistema e come usarlo sono descritti di seguito.

  1. Make a fly behavior observation chamber (FBOC).
    1. Procuratevi un contenitore piccolo e traslucido (non trasparente) per ....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Scatta attraverso un filtro UV per immagini chiare e nitide
Esegui un semplice esperimento per osservare la differenza tra un filtro UV e il vetro ordinario in laboratorio. Prendi una fiala di coltura di mosche, rimuovi il tappo, mettilo sotto un microscopio stereo di dissezione e coprilo (alternativamente) con un filtro UV e un coperchio della capsula di Petri. Le fotografie scattate in questi due casi sono mostrate nella Figura 5. La fotografia scattata attraverso il fi.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La luce è al centro della fotografia e della videografia ed è il fattore decisivo per ottenere immagini di alta qualità16. Qui, due luci video a LED con luminosità e temperatura del colore regolabili sono state utilizzate come illuminatori e un materiale traslucido è stato selezionato per realizzare l'FBOC. I pannelli luminosi a LED su entrambi i lati fornivano una luminosità sufficiente e il materiale traslucido ammorbidiva e spargeva la luce, producendo infine una luce uniforme, morbida e brilla.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ringraziamo il professor Li Xiangdong e il fotografo Cheng Jing per le utili discussioni e suggerimenti. Questo lavoro è stato supportato dal Progetto Esplorativo (20200101) del Life Science Experimental Teaching Demonstration Center della China Agricultural University.

....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
fotocamera compatta, Nikon P310Nikonzoom ottico 3-5x, cam record 1080 P HD video
schiuma di etilammina60 mm x 60 mm x 15 mm
Food Blue No 1CAS 3844-45-9
mini luci LED e trasformatoreGODOXLED-P120hanno temperatura di colore 5000-5600 K
contenitore piccolo (ad es. tappo di bottiglia)su Ø Filtro UV / trasparente 15 mm x 20 mm
Filtro UV/trasparente di alta qualità con elevata trasmittanza, zoom 30-40 mm
Stereomicroscopio zoom 5-50x

Riferimenti

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chyb, S., Gompel, N. Atlas of Drosophila morphology: Wild-type and classical mutants. , Academic Press. (2013).
  2. Yang, D. Carnivory in the larvae of Drosophila melanogaster and other Drosophila species. Scientific Reports. 8, 15484(2018).
  3. Piper, M. D., et a....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Richiedi il permesso di riutilizzare il testo o le figure di questo articolo JoVE

Richiedi permesso

Tag

Drosophila BehaviorHigh Definition ImagingStereo MicroscopeFly Observation ChamberBehavioral RecordingFly MorphologyLED Video LightsDigital Camera AdapterMacro Close UpPanoramic Imaging

Articoli correlati