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Articolo metodologico

Un protocollo per il bypass gastrico Roux-en-Y nei ratti che utilizza cucitrici lineari

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DOI:

10.3791/62575

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21 agosto 2021

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In questo articolo

Sommario

Il bypass gastrico Roux-en-Y (RYGB) viene eseguito per trattare l'obesità e il diabete. Tuttavia, i meccanismi alla base dell'efficacia del RYGB non sono pienamente compresi e gli studi sono limitati da difficoltà tecniche che portano a un'elevata mortalità nei modelli animali. Questo articolo fornisce istruzioni su come eseguire RYGB nei ratti con alti tassi di successo.

Abstract

Il bypass gastrico Roux-en-Y (RYGB) viene comunemente eseguito per il trattamento dell'obesità grave e del diabete di tipo 2. Tuttavia, il meccanismo di perdita di peso e i cambiamenti metabolici non sono ben compresi. Si ritiene che molteplici fattori svolgano un ruolo, tra cui la riduzione dell'apporto calorico, la diminuzione dell'assorbimento dei nutrienti, l'aumento della sazietà, il rilascio di ormoni che promuovono la sazietà, i cambiamenti nel metabolismo dell'acido biliare e le alterazioni del microbiota intestinale.

Il modello RYGB del ratto presenta una struttura ideale per studiare questi meccanismi. Il lavoro precedente sui modelli di topi ha avuto alti tassi di mortalità, che vanno dal 17 al 52%, limitandone l'adozione. I modelli di ratto dimostrano una riserva più fisiologica per lo stimolo chirurgico e sono tecnicamente più facili da adottare in quanto consentono l'uso di cucitrici chirurgiche. Una sfida con le cucitrici chirurgiche, tuttavia, è che spesso lasciano una grande borsa gastrica che non è rappresentativa del RYGB nell'uomo.

In questo protocollo, presentiamo un protocollo RYGB nei ratti che si traducono in una piccola busta gastrica utilizzando cucitrici chirurgiche. Utilizzando due fuochi di cucitrice che rimuovono il forestomach del ratto, otteniamo una busta gastrica più piccola simile a quella che segue un tipico RYGB umano. La graffatura chirurgica si traduce anche in una migliore emostasi rispetto alla divisione acuta. Inoltre, il forestomach del ratto non contiene ghiandole e la sua rimozione non deve alterare la fisiologia del RYGB.

La perdita di peso e i cambiamenti metabolici nella coorte RYGB sono stati significativi rispetto alla coorte fittizia, con una tolleranza al glucosio significativamente inferiore a 14 settimane. Inoltre, questo protocollo ha un'eccellente sopravvivenza dell'88.9% dopo RYGB. Le competenze descritte in questo protocollo possono essere acquisite senza precedenti esperienze microchirurgiche. Una volta padroneggiata, questa procedura fornirà uno strumento riproducibile per studiare i meccanismi e gli effetti del RYGB.

Introduzione

L'obesità e il diabete di tipo 2 sono diventati epidemie intutto il mondo 1. Sebbene la perdita di peso medico possa migliorare il diabete nei pazienti, quelli con diabete grave beneficiano maggiormente della chirurgia bariatrica. La chirurgia bariatrica si è dimostrata sicura ed efficace nella perdita di peso e nel migliorare o curare il diabete di tipo2 2,3,anche in quelli con malattia di lungadata 4. Le procedure bariatrica metaboliche, come l'attuale chirurgia di bypass gastrico Roux-en-Y gold-standard (RYGB), inducono miglioramenti rapidi e sostenuti nell'om....

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Protocollo

I protocolli sull'uso degli animali sono stati approvati dal Health Science Animal Care and Use Committee dell'Università dell'Alberta (AUP00003000). Vedere la figura 1 per un diagramma che illustra l'anatomia rygb.

1. Bypass gastrico Roux-en-Y

  1. Preparazione degli animali e allestimento operativo
    1. Una settimana prima dell'intervento chirurgico, fornire ai ratti una terapia di reidratazione orale e una dieta liquida oltre alla loro dieta solida e acqua per acclimatarli a questa nuova dieta.
    2. Ratti veloci con accesso all'acqua solo per 12-18 ore prima dell'intervento chirurgico.
      1. ....

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Risultati

Animali e alloggi
36 ratti Wistar maschi erano alloggiati in coppia e venivano nutriti con una dieta sterile ad alto contenuto di grassi per roditori al 60% a partire da sei settimane dietà (Figura 2). A 16 settimane di età, sono stati sottoposti a RYGB o a un intervento chirurgico fittizio. Dopo la prima settimana postoperatoria, i ratti sono stati ripresi con una dieta ricca di grassi. Metà dei ratti sono stati eutanasiati a 2 settimane post-operatorie e l'altra metà è .......

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Discussione

Rygb comporta la creazione di una piccola busta gastrica (meno di 30 mL) e la creazione di un arto biliopancreatico e di un arto Roux(figura 1). Negli esseri umani, l'arto biliopancreatico è tipicamente da 30 a 50 cm e trasporta secrezioni dal residuo gastrico, dal fegato e dal pancreas. L'arto Roux è tipicamente lungo da 75 a 150 cm ed è il canale principale per il cibo ingerito. Il canale comune è il restante piccolo distale intestinale a cui si uniscono i due arti ed è dove si verifica la.......

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Dichiarazioni

Ethicon forniva due cucitrici lineari da taglio da 45 mm, ricariche multiple della cucitrice da 3,5 mm e suture in polipropilene 6-0. Gli autori non hanno altri conflitti di interesse da dichiarare.

Ringraziamenti

Questo studio è stato finanziato dall'American Society for Metabolic and Bariatric Surgery Research Award. Ethicon ha gentilmente fornito suture, cucitrici e clip. La ricerca di dottorato dell'autore principale è stata finanziata dal programma di investigatori clinici dell'Università dell'Alberta e dalla Alberta Innovates Clinician Fellowship. Vorremmo anche ringraziare Michelle Tran per la sua illustrazione medica dell'anatomia RYGB.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
2-0 Suture di setaEthiconK533
3-0 Suture VicrylEthiconJ219H
4% isofluranoN/AN/A
5% Destrosio e 0,9% di cloruro di sodio - 1000 mLBaxter2B1064
50 mL Provette da centrifuga conicheFisher Scientific14-432-22
6-0 Suture in proleneEthicon8805H
N/AN/A
Rasoio per peli di animaliN/AN/A
Soluzione BetadineN/AN/A
Porta ago Castrojievo con blocco 14 cm (liscio curvo)World Precision Instruments503258
ECHELON FLEX Taglierina lineare endoscopica articolataEthiconEC45A
Pinzetta economica #4World Precision Instruments501978
Taglierina lineare articolata ENDOPATH ETS Ricariche da 45 mmEthicon6R45B
con pad riscaldante (15,2 cm L x 20,3 cm L), sonda di temperatura del pad e 10 protezioni per maniche monouso e non sterili KentRT-0515
Kent ScientificEC404VL-10
Liquid Diet Feeding Tube (150 mL)Bio-Serv9007
Liquid Diet Feeding Tube Holder (corto regolabile)Bio-Serv9015
Micro Mosquito ForcepsWorld Precision Instruments500452
Micro ScissorsWorld PrecisionInstruments 503365
Dieta per topi, Calorie ad alto contenuto di grassi (60%), Pellet morbidiBio-ServS3282
No. 11 Lama e manico per bisturiN/AN/A
Opmi Vario Microscopio operatorioZEISSS88
Griglia per pavimento sopraelevatoTecniplastGM500150 Griglia
Dieta liquida per roditori, Lieber-DeCarli '82, Control, 4 litri/saccoBio-ServF1259
Soluzione di irrigazione al cloruro di sodio allo 0,9% - 500 mLBaxterJF7633
Tamponi di cotone steriliN/AN/A N/A
Telo sterileN/AN/A
Asciugamano sterileN/AN/A
Unità di cauterizzazione termicaWorld Precision Instruments501293
Macchina per anestesia Controller per pad riscaldante a infrarossi lontani Scientific Collare elisabettiano per ratti grandi Kent Scientific RT-0515 per pavimenti sopraelevati

Riferimenti

  1. World Health Organization. Obesity and Overweight. , Available from: http://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/obesity-and-overweight (2018).
  2. Courcoulas, A. P., et al. Three-year outcomes of bariatric surgery vs lifestyle intervention for type 2 diabetes mellitus treatment. JAMA Surgery. 15213 (10)....

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Ristampe e permessi

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