Confronto dei metodi per isolare i funghi entomopatogeni da campioni di suolo

Thais A. Correa; Fernanda S. Santos; Mariana G. Camargo; Simone Quinelato; Vânia R. E. P. Bittencourt; Patricia S. Golo

doi:10.3791/63353

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Articolo metodologico

Confronto dei metodi per isolare i funghi entomopatogeni da campioni di suolo

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DOI:

10.3791/63353

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6 gennaio 2022

Thais A. Correa¹ , Fernanda S. Santos² , Mariana G. Camargo³ , Simone Quinelato² , Vânia R. E. P. Bittencourt¹^,³ , Patricia S. Golo¹^,³

¹Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, ²Laboratório de Taxonomia Bioquímica e Bioprospecção de Fungos/Coleção de Cultura de Fungos Filamentosos, Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ), ³Departamento de Parasitologia Animal, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

In questo articolo

Sommario

Le colonie fungine entomopatogene sono isolate da campioni di terreno tropicale utilizzando l'esca Tenebrio , l'esca Galleria e il mezzo artificiale selettivo, cioè l'agar destrosio di patate arricchito con estratto di lievito integrato con cloramfenicolo, tiabendazolo e cicloeximide (mezzo CTC).

Abstract

L'obiettivo del presente studio è quello di confrontare l'efficacia dell'uso di esche per insetti rispetto al mezzo selettivo artificiale per isolare i funghi entomopatogeni (EPF) dai campioni di suolo. Il suolo è un ricco habitat per microrganismi, tra cui ePF in particolare appartenenti ai generi Metarhizium e Beauveria, che possono regolare i parassiti artropodi. I prodotti biologici a base di funghi sono disponibili sul mercato principalmente per il controllo dei parassiti degli artropodi agricoli. Tuttavia, nonostante l'elevata biodiversità endemica, solo pochi ceppi sono utilizzati nei bioprodotti commerciali in tutto il mondo. Nel presente studio, 524 campioni di terreno sono stati coltivati su agar destrosio di patate arricchito con estratto di lievito integrato con cloramfenicolo, tiabendazolo e cicloeximide (mezzo CTC). La crescita delle colonie fungine è stata osservata per 3 settimane. Tutti i Metarhizium e Beauveria EPF sono stati morfologicamente identificati a livello di genere. Inoltre, alcuni isolati sono stati identificati molecolarmente a livello di specie. Ventiquattro di questi 524 campioni di suolo sono stati anche esaminati per l'insorgenza di EPF utilizzando il metodo dell'esca per insetti (Galleria mellonella e Tenebrio molitor). Un totale di 51 ceppi di EPF sono stati isolati (41 Metarhizium spp. e 10 Beauveria spp.) dai 524 campioni di suolo. Tutti i ceppi fungini sono stati isolati da terreni coltivati o praterie. Dei 24 campioni selezionati per il confronto, il 91,7% era positivo per EPF con Esca Galleria , il 62,5% con esca Tenebrio e il 41,7% con CTC. I nostri risultati hanno suggerito che l'uso di esche per insetti per isolare l'EPF dal suolo è più efficiente rispetto all'uso del mezzo CTC. Il confronto dei metodi di isolamento oltre all'identificazione e alla conservazione dell'EPF ha un impatto positivo sulla conoscenza della biodiversità. Il miglioramento della collezione EPF supporta lo sviluppo scientifico e l'innovazione tecnologica.

Introduzione

Il suolo è la fonte di diversi microrganismi, tra cui funghi entomopatogeni (EPF). Questo particolare gruppo di funghi è riconosciuto dalla loro capacità di colonizzare e spesso uccidere gli ospiti degli artropodi, in particolare gli insetti¹. Dopo l'isolamento, la caratterizzazione, la selezione dei ceppi virulenti e la registrazione, gli EPF sono prodotti in serie per il controllo dei parassiti degli artropodi, il che supporta la loro rilevanza economica². Di conseguenza, l'isolamento dell'EPF è considerato il primo passo verso lo sviluppo di un biopesticida. Beauveria spp. (Hypocreales: Cordycipitaceae) e