Il presente protocollo dimostra lo sviluppo del biosensore EGGFET (Electrolyte-gated Graphene Field-Effect Transistor) e la sua applicazione nel rilevamento di immunoglobuline G (IgG) biomarcatori.
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Il presente protocollo dimostra lo sviluppo del biosensore EGGFET (Electrolyte-gated Graphene Field-Effect Transistor) e la sua applicazione nel rilevamento di immunoglobuline G (IgG) biomarcatori.
Nel presente studio, il grafene e i suoi derivati sono stati studiati e utilizzati per molte applicazioni, tra cui elettronica, rilevamento, accumulo di energia e fotocatalisi. La sintesi e la fabbricazione di alta qualità, buona uniformità e bassi difetti il grafene sono fondamentali per dispositivi ad alte prestazioni e altamente sensibili. Tra i molti metodi di sintesi, la deposizione chimica da vapore (CVD), considerata un approccio leader per la produzione di grafene, può controllare il numero di strati di grafene e produrre grafene di alta qualità. Il grafene CVD deve essere trasferito dai substrati metallici su cui viene coltivato su substrati isolanti per applicazioni pratiche. Tuttavia, la separazione e il trasferimento del grafene su nuovi substrati sono difficili per uno strato uniforme senza danneggiare o influenzare le strutture e le proprietà del grafene. Inoltre, il transistor a effetto di campo in grafene elettrolitico -gated (EGGFET) è stato dimostrato per le sue ampie applicazioni in varie rilevazioni biomolecolari a causa della sua elevata sensibilità e configurazione standard del dispositivo. In questo articolo, vengono dimostrati l'approccio di trasferimento del grafene assistito da poli (metilmetacrilato) (PMMA), la fabbricazione del transistor a effetto di campo del grafene (GFET) e il rilevamento di immunoglobuline G (IgG) biomarcatori. La spettroscopia Raman e la microscopia a forza atomica sono state applicate per caratterizzare il grafene trasferito. Il metodo si è dimostrato essere un approccio pratico per trasferire grafene pulito e privo di residui preservando il reticolo di grafene sottostante su un substrato isolante per applicazioni elettroniche o di biorilevamento.
Il grafene e i suoi derivati sono stati studiati e utilizzati per molte applicazioni, tra cui l'elettronica 1,2, il rilevamento 3,4,5, l'accumulo di energia 6,7 e la fotocatalisi 1,6,8. La sintesi e la fabbricazione di alta qualità, buona uniformità e bassi difetti il grafene sono fondamentali per dispositivi ad alte prestazioni e altamente sensibili. Dallo sviluppo della deposizione chimica da vapore (CVD) nel 2009, ha mostrato una promessa colossale e ha posto il suo posto come membro essenziale della famiglia del grafene 9,10,11,12,13. Viene coltivato su un substrato metallico e, successivamente per usi pratici, viene trasferito su substrati isolanti14. Diversi metodi di trasferimento sono stati utilizzati per trasferire il grafene CVD di recente. Il metodo poli (metilmetacrilato) (PMMA) assistito è il più utilizzato tra le diverse tecniche. Questo metodo è particolarmente adatto per l'uso industriale a causa della sua capacità su larga scala, del costo inferiore e dell'alta qualità del grafene trasferito14,15. L'aspetto critico di questo metodo è l'eliminazione del residuo di PMMA per le applicazioni del grafene CVD perché i residui possono causare la declinazione delle proprietà elettroniche del grafene 14,15,16, causare un effetto sulla sensibilità e sulle prestazioni dei biosensori 17,18 e creare variazioni significative da dispositivo a dispositivo19.
I biosensori basati su nanomateriali sono stati significativamente studiati negli ultimi decenni, tra cui nanofili di silicio (SiNW), nanotubi di carbonio (CNT) e grafene20. A causa della sua struttura a strato di singolo atomo e delle sue proprietà distintive, il grafene dimostra caratteristiche elettroniche superiori, una buona biocompatibilità e una facile funzionalizzazione, rendendolo un materiale attraente per lo sviluppo di biosensori 14,21,22,23. A causa delle caratteristiche dei transistor ad effetto di campo (FET) come alta sensibilità, configurazione standard e producibilità di massaeconomica 21,24, il FET è più preferito nelle implementazioni portatili e point-of-care rispetto ad altri dispositivi di biorilevamento basati sull'elettronica. I biosensori a transistor a effetto di campo del grafene elettrolitico-gated (EGGFET) sono esempi dei FETdichiarati 21,24. EGGFET è in grado di rilevare vari analiti bersaglio come gli acidi nucleici25, le proteine 24,26, i metaboliti27 e altri analiti biologicamente rilevanti28. La tecnica qui menzionata garantisce l'implementazione del grafene CVD in un dispositivo nanoelettronico di biorilevamento privo di etichette che offre una maggiore sensibilità e un rilevamento accurato del tempo rispetto ad altri dispositivi di biorilevamento29.
In questo lavoro, viene dimostrato un processo complessivo per lo sviluppo di un biosensore EGGFET e la sua funzionalizzazione per il rilevamento di biomarcatori, incluso il trasferimento di grafene CVD su un substrato isolante, raman e caratterizzazioni AFM del grafene trasferito. Inoltre, la fabbricazione di EGGFET e l'integrazione con un pozzo di consegna del campione di polidimetilsilossano (PDMS), la funzionalizzazione del biorecettore e il rilevamento di successo dell'immunoglobulina G umana (IgG) dal siero mediante esperimenti spike-and-recovery sono anche discussi qui.
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1. Trasferimento della deposizione chimica da vapore del grafene
2. Fabbricazione del transistor a effetto di campo di grafene (GFET)
3. Funzionalizzazione del GFET per il rilevamento di IgG
4. Rilevamento IgG
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I risultati rappresentativi mostrano il grafene CVD trasferito caratterizzato rispettivamente da Raman e AFM. Il picco G e i picchi 2D dell'immagine Raman forniscono informazioni complete sull'esistenza e la qualità del grafenemonostrato 32 trasferito (Figura 1). Processi litografici standard 30,31 sono stati applicati per fabbricare il dispositivo GFET, come mostrato nella Figura 2
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Il grafene CVD acquistato su film di rame deve essere tagliato alla giusta dimensione per le seguenti fasi di fabbricazione. Il taglio dei film può causare rughe, che devono essere prevenute. I parametri forniti nella fase di fabbricazione possono essere indicati per l'incisione al plasma del grafene e questi numeri potrebbero essere variati quando si utilizzano strumenti diversi. Il campione inciso deve essere attentamente monitorato e ispezionato per garantire un'incisione completa al grafene. È possibile applicare più...
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Gli autori non hanno interessi concorrenti o interessi contrastanti da divulgare.
Gli esperimenti sono stati condotti presso la West Virginia University. Riconosciamo le strutture di ricerca condivise presso la West Virginia University per la fabbricazione dei dispositivi e la caratterizzazione dei materiali. Questo lavoro è stato sostenuto dalla NATIONAL Science Foundation degli Stati Uniti sotto Grant No. NSF1916894.
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| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| Acido 1-pireneutirico N-idrossisuccinimide estere | Sigma Aldrich | 457078-1G | funzionalizzazione |
| Asylum MFP-3D Atomic Force Microscope | Oxford Instruments | caratterizzazione del grafene | |
| AZ 300 MIF | MicroChemicals | AZ 300 MIF | rivelatore di fotoresist |
| AZ 300 MIF Microchemicals AZ 300 | MIF | fotoresist | |
| Albumina sierica bovina | Sigma Aldrich | 810014 | |
| bloccante Branson 1210 Sonicatore | SONITEK | Pulizia dei campioni | |
| Mordenzante di rame | Sigma Aldrich | 667528-500ML | Rimozione del film di rame per rilasciare grafene |
| Dimetil solfossido (DMSO) | VWR | 97063-136 | funzionalizzazione |
| Punzoni monouso per biopsia, Integra Miltex | VWR | 21909-144 | creare bene in PDMS |
| Mordenzante d'oro | Gold Etch, TFA, Transene | 658148 | incantare |
| Grafene | Grafene supermercato | 2 "x 2" foglio | elemento di biorilevamento del dispositivo |
| Aptamero IgG | Coppia di basi Biotecnologie | biorecettore | personalizzato |
| Keithley 4200A-SCS Analizzatore di parametri | Tektronix | misurazione e rilevamento | |
| KMG CR-6 | KMG sostanze chimiche | 64216 | Mordenzante al cromo |
| Kurt J. Lesker Evaporatore E-beam | Kurt J. Lesker | deposizione di metalli | |
| Laurell Technologies 400 Spinners | Laurell Technologies | WS-400BZ-6NPP/LITE | rivestimento a film sottile |
| March PX-250 Plasma Asher | March Instruments | pulizia dei campioni | |
| Mordenzante al nichel | Mordenzante al nichel, TFB, | mordenzante | 600016000 |
| OAI Esposizione alle inondazioni | OAI | Fotolitografia | |
| Soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) | Sigma Aldrich | 806552-500ML | tampone |
| PMMA 495K A4 | Microchemicals | PMMA 495K A4 | Fotoresist per assistere il trasferimento del grafene |
| Polidimetilsilossano (PDMS) | Sigma Aldrich | Pozzetto di consegna del campione | |
| Microscopio Raman Renishaw | Caratterizzazione del grafene | ||
| Idrossido di sodio (NaOH) | Funzionalizzazione Sigma Aldrich | 221465-25G | |
| Allineatore maschera MA6 Suss Microtech | Fotolitografia | Suss MicroTec | |
| Thermo Scientific Piastra riscaldante Cimarec | Thermo Scientific | SP131635 | campione e dispositivo Cottura |
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