Nel presente protocollo, un modello di trapianto di cuore di topo viene utilizzato per studiare il meccanismo di rigetto dell'allotrapianto cardiaco. In questo modello di trapianto di cuore eterotopico, l'efficienza operativa è migliorata e la sopravvivenza degli innesti cardiaci è assicurata da un'anastomosi cervicale end-to-end dell'impianto cardiaco utilizzando una tecnica di bracciale modificata.
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Articolo metodologico
Una tecnica di bracciale modificata per il modello di trapianto di cuore eterotopico cervicale del topo
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il rigetto dell'allotrapianto cardiaco limita la sopravvivenza a lungo termine dei pazienti dopo il trapianto di cuore. Un modello di trapianto di cuore di topo è ideale per studiare il meccanismo di rigetto cardiaco dell'allotrapianto negli studi preclinici a causa della loro elevata omologia con i geni umani. Questa comprensione aiuterebbe a sviluppare approcci unici per migliorare la sopravvivenza a lungo termine dei pazienti trattati con allotrapianti cardiaci. In un modello murino, l'impianto di cuore da donatore addominale viene comunemente eseguito con un'anastomosi end-to-end all'aorta del ricevente e alla vena cava inferiore utilizzando punti. In questo modello, il cuore del donatore viene impiantato mediante anastomosi end-to-end all'arteria carotide e alla vena giugulare del ricevente mediante la tecnica del bracciale modificato. L'intervento chirurgico di trapianto viene eseguito senza cuciture e quindi può aumentare la sopravvivenza del ricevente poiché non vi è alcuna interferenza con l'afflusso di sangue e il reflusso venoso della parte inferiore del corpo. Questo modello murino aiuterebbe a studiare i meccanismi alla base del rigetto immunologico e patologico (acuto/cronico) degli allotrapianti cardiaci.
Introduzione
Il trapianto di cuore è diventato il trattamento standard per l'insufficienza cardiaca terminale. Più di 5.500 trapianti di cuore all'anno vengono eseguiti nelle organizzazioni registrate sotto la Società internazionale per il trapianto di cuore e polmone. Tra i pazienti sottoposti a trapianto di cuore allogenico, il tasso di rigetto a 1 anno è ancora del >10%, mentre il tasso di rigetto a 3 anni è aumentato al 36%1,2. Tuttavia, mancano trattamenti profilattici efficaci per i pazienti con rigetto cardiaco dell'allotrapianto. Pertanto, sono necessari studi su modelli animali che chiariscano i meccanismi fisiolo....
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Protocollo
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con la Guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio, ottava edizione, National Research Council (US) 2011. Le procedure che coinvolgono soggetti animali sono state approvate dal Comitato per la cura e l'uso degli animali del Chongqing University Cancer Hospital, Chongqing, Cina. Topi maschi BALB/c e C57BL/6 del peso di 20-30 g, ottenuti da fonti commerciali (vedi Tabella dei materiali), sono stati utilizzati per lo studio del trapianto di cuore allogenico. I topi C57BL/6 sono stati utilizzati come donatori e riceventi singeneici, mentre i topi BALB/c sono serviti come rice....
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Risultati
In questo modello di trapianto di cuore eterotopico cervicale di topo, il tasso di sopravvivenza dei topi riceventi era di circa il 95,2% (20 topi su 21 sono sopravvissuti). La causa primaria di morte era il sanguinamento postoperatorio. Il battito cardiaco accelerato con un ritmo regolare serve come indicatore della sopravvivenza del cuore del donatore impiantato.
I topi C57BL/6 e BALB/c erano di tipo MHC (H-2b) e MHC (H-2d) in questo modello, rispettivamente 7,8<.......
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Discussione
Il modello di trapianto di cuore di topo contribuisce allo studio dei meccanismi di rigetto dopo il trapianto di cuore, contribuendo allo sviluppo di approcci unici per migliorare la sopravvivenza a lungo termine dei riceventi di allotrapianti cardiaci. Tuttavia, il trapianto di cuore nei topi è un compito complesso e impegnativo, che richiede un alto livello di tecniche di microchirurgia, specialmente nell'anastomosi vascolare11,12,13
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (81870304) a Jun Li.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sutura monofilamento in poliammide 5-0 | B.Braun Medical Inc. | C3090954 | |
| 8-0 Sutura monofilamento in poliammide | B.Braun Medical Inc. | ||
| 10-0 Sutura in monofilamento di poliammide | B.Braun Medical Inc. | ||
| bracciale in poliuretano 22 G | B.Braun Medical Inc. | 4251628-02 | |
| Bracciale in poliuretano da 26 G | Suzhou Linhua Medical Instrument Co., LTD | REF383713 | |
| Camera di induzione per anestesia | RWD Life Science Co., LTD | V100 | |
| Morsetto microvascolare atraumatico | Beyotime | FS500 | |
| BALB/c e topi C57BL/6 (20– 30 g) | Centro degli animali da esperimento (Università medica dell'esercito, Chongqing, Cina) | ||
| Buprenorfina | Scienze della vita biologica degli Stati Uniti | 352004 | |
| Elettrocoagulatore | Guangzhou Runman Medical Instrument Co., LTD | ZJ1099 | |
| Garza | Henan piaoan group Co., LTD | 10210402 | |
| Termoforo | Guangzhou Dewei Biological Technology Co., LTD | DK0032 | |
| Eparina | North China Pharmaceutical Co., LTD | 2101131-2 | |
| Soluzione HTK | Shenzhen Changyi Pharmaceutical Co., LTD | YZB/Min8263-2013 | |
| Siringa per iniezione (10 mL) | Shandong weigao group medical polymer Co., LTD | 20211001 | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co., LTD | 21070201 | |
| Soluzione fisiologica salina | Southwest pharmaceutical Co., LTD | H50021610 | |
| Ago per cuoio capelluto | Hongyu Medical Group | 20183150210 | |
| Shaver | Beyotime | FS600 | |
| Macchina per anestesia per piccoli animali | RWD Life Science Co., LTD | R500 | |
| Microscopio chirurgico | Tiannuoxiang Scientific Instrument Co., Ltd, Pechino, Cina | SZX-6745 | |
| Tampone | Yubei Medical Materials Co., LTD | 21080274 |
Riferimenti
- Khush, K. K., et al. The International thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-sixth adult heart transplantation report - 2019; focus theme: Donor and recipient size match. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 3....
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Ristampe e permessi
